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培地の構成、目的および手順
の 培地の調製 それは所望の微生物の増殖のために実験室で使用される日常的な方法論である。培地は、微生物集団の発達に必要な全ての栄養素を保有する固体、液体または半固体の調製物です。.
一般的に、微生物を成長させるための手段はタンパク質とアミノ酸に富み、通常あなたが研究したい生物の成長に有利に働く成分、例えばとりわけビタミン、血液、血清を含みます。.
その組成は目的の微生物の必要性に従って変化するので、一般的または普遍的な培地はない。いくつかのバクテリアはどんな培地でも成長することができますが、他は特別な必要条件を持っています.
索引
- 1それは何で構成されていますか？?
- 1.1寒天
- 1.2流体
- 1.3抽出物
- 1.4ペプトン
- 1.5ショックアブソーバー
- 2つの目的
- 3種類のメディア
- 3.1その構成に基づく
- 3.2微生物の種類に基づく
- 4つのステップ
- 5参考文献
それは何で構成されていますか？?
真菌や細菌などの微生物は、そのサイズが小さいため、個別に研究することはできません。したがって、人口の大幅な増加を可能にする人工的な方法でそれらを栽培する必要があります.
例えば、細菌を研究したいのであれば、それらが増殖してコロニーを形成することができるようにそれらを適切な条件で提供しなければなりません（これは肉眼で観察することができます）.
培地の調製は、培養したい微生物の種類によって大きく異なる。それを準備する前に、それは仕事の本体の基本的な栄養ニーズを知ることが必要です.
次に、培地で使用される最も一般的な構成要素について、それらの準備の一般的な考え方を説明するために説明します。
寒天
これは、作物のゲル化剤として使用され、固形または半固形の培地を探すときに添加されます。培地の調製に用いられた最初の固化剤はゼラチンであったが、1883年に寒天がW. Hesseによって細菌学の世界に導入された。.
細菌性寒天は藻類から抽出した複雑な枝の多糖類を主成分としています。この化合物はアイスクリームやジャムなどの一般的な食品の増粘剤として使用されています.
それはいくつかの理由で微生物学において非常に貴重な要素です。微生物がそれを分解することができないという主な理由で、100℃の温度で液化し、45℃以下に達するまで液体状態のまま.
あなたが固形培地を調製したい場合には、寒天濃度はおよそ1.5％であるべきです、一方、半固体は0.3から0.5％まで準備されるべきです.
流体
病原性有機体の栽培は、それらがそれらの自然の環境でそうであるように発達することができるように体液を必要とする。このため、全血または除細動血が追加されます。体液は健康な動物から抽出され、いったん殺菌されると、培地に加えられます.
抽出物
それらは様々な動物の部分（肉や肝臓など）や野菜（種子）から得られ、ペースト状や粉末状の固体濃縮物を得るために加工されます。最も一般的なのは、酵母、麦芽、肉です。.
ペプトン
これらの有機化合物は動物または植物組織の酵素的または化学的加水分解によって得られる。目的は、タンパク質の基本単位であるアミノ酸に富んだコンテンツを追加することです。.
ショックアブソーバー
緩衝剤または緩衝剤システムはpHの突然の変化を避け、体が許容する最適範囲を維持するのを助けます.
アルカリ性培地を好む細菌もありますが、ほとんどの生物はpH 7で適切に発育することができます。ただし、6と9の間のpHの変動に抵抗する細菌があります.
pHに敏感な種では、損傷は過剰量の水素またはヒドロキシルイオンによってではなく、細胞に浸透することができる弱酸または塩基の増加によって引き起こされます.
また、pHを監視し、発酵や他のプロセスによって引き起こされる偏差を回避するためのpHが追加されています.
目的
培養培地を調製するときの主な目的は、単離されたい生物の開発が成功することを可能にするために必要な全ての成分を加えることである。成分と栄養素の最も効果的な組み合わせは、望ましい培地を達成するために識別されなければなりません.
これらのステップは環境の組成と栄養素の利用可能性に依存するので、培地の調製と保存の両方が成功した成長を確実にするために重要です。.
微生物の培養は、受光強度、温度および培地の酸性度またはアルカリ度のレベルなど、培地の外部にあるいくつかの要因によって影響を受ける課題であることを考慮に入れなければならない。したがって、これらの各変数を考慮する必要があります。.
メディアの種類
その組成に基づいて
その組成に基づいて、3つの主な種類の作物があります：天然または経験的、半合成的および定義された合成的または化学的手段.
自然環境
自然環境では正確な組成は不明です。これらには、牛乳、希釈血液、野菜ジュース、エキス、肉やペプトンの注入などの成分が含まれます。経済的な理由から、大豆抽出物、ホエー、糖蜜などのような低コストの成分がしばしば添加される。.
半合成メディア
その組成が部分的に知られている場合、それは半合成培地と呼ばれる。寒天を含む培地は半合成培地になります.
それらの中で私達は他の例の中で、パパデキストロース寒天、czapek-dox寒天、エンバク寒天、ペプトン肉寒天、を持っています.
合成培地または化学培地
この場合、培地の組成 - 炭素、窒素、硫黄、リンおよび他の成長因子源の量に関して - は完全に知られている。他の研究者に再現可能な結果を得たい場合には非常に便利です。.
いわゆる「特別な増殖要件を有する微生物」については、必要な成分を添加することが必要である。このタイプの例は 乳酸桿菌.
微生物の種類に基づく
同様に、その中で増殖することができる微生物の種類に基づく培地のための別の分類がある。この原則に従うと、私たちは以下のような一般的な濃縮方法、選択的方法および差別的方法を得ることができる。それぞれについて以下に説明します。
一般的な手段
これらは多種多様な微生物の開発を認めています。もしある生物がその成長のために特別な条件を必要とするならば、それはこのタイプの作物でうまく成長することができないでしょう。.
濃縮手段
濃縮手段は特定の種類の微生物の増殖を促進するが、他の種類の微生物が増殖するのを防ぐための物質は添加されていない。.
選択メディア
彼らは微生物の特定の成長を探し、それをとりわけ真菌、細菌、原生動物と呼びます。これをするために、彼らは他人の発達を阻害します.
この目標を達成するために、微生物の大規模なグループのために致命的な化合物を添加して、関心のある生物に無害にすることができ、または求める微生物によってのみ同化され得るエネルギー源を追加する.
病原性微生物を増殖させるために医療サンプルを採取するときに選択培地が使用されます。ここでは、病原体の増殖を促進し、そして患者からの正常な微生物叢の発生を抑制することが必要である。.
例えば、亜硫酸ビスマス寒天は、グラム陽性菌や消化管腔に見られる多数の菌の増殖を許しません。したがって、それは腸チフスを引き起こすグラム陰性菌を栽培するために使用されます, サルモネラ菌 糞便サンプル.
差動メディア
このタイプは、同じ環境で成長する別の種に対してそれらを識別することができるように、関心のある生物の何らかの診断上の特徴（例えば、その代謝における特異性）を使用します.
微分培地および選択培地は両方とも、臨床微生物学および公衆衛生の分野において非常に有用である。これらの分野では、衛生状態が悪いことに関連する特定の微生物の存在を検出する必要があるからである。.
所望のコロニーに独特の特徴を与える指標物質を作物に添加することができる。例えば、寒天 - エオシン - メチレンブルー（略してＥＭＢ）およびマッコンキー - 寒天にラクトースおよびｐＨ指示薬を添加する。.
したがって、ラクトースを発酵させてアルデヒドを生産する能力を有するコロニーがこれらの培地中で発達すると、それらは特別な色で観察され得る。.
ステップ
現在、培地は凍結乾燥形態で購入することができる。したがって、調製が容易になり、生成物のみが再水和される。内容物は（あなたが準備したい最終量を考慮に入れて）秤量されそして製品の全ての表示に従って蒸留水に溶解されなければならない。.
液体培地の内容物は、その後の滅菌のために所望の容器（ペトリ皿、チューブなど）に分けられなければならない。固体媒体を分配するためには、それをマイクロ波を用いて又は材料を水浴にさらすことによってそれを溶融することが必要である。培地のpHを調整する必要があります.
通常寒天は試験管やペトリ皿に使われます。寒天が適切な角度で傾斜した位置で固化し、最終的な末端が対角線になるようにする場合、この配置はフルートピークまたは傾斜管として知られています。寒天が完全に垂直の位置で固まるとき、それは「深い」と呼ばれます.
オートクレーブを使用して - メディアを滅菌した後 - 彼らは冷却することができます。これらは、微生物のない環境で取り扱わなければなりません。最も一般的なのは、その付近の無菌環境を保証する照明付きライターで作業することです。.
参考文献
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