ベアードパーカー寒天培地の基礎、調製および使用



ベアードパーカー寒天培地 それは固体の、選択的かつ異なる培地です。それは、検出およびコアグラーゼ陽性ブドウ球菌計数のために1962年に作成されました(黄色ブドウ球菌).

カゼイン膵臓加水分解物、肉エキス、酵母エキス、塩化リチウム、グリシン、ピルビン酸ナトリウム、亜テルル酸カリウム、寒天、卵黄エマルジョン.

ベアードパーカー寒天培地の能力に基づいています 黄色ブドウ球菌 亜テルル酸塩の還元とレシチンの生産両方の特性はこの種のための特定の特徴を持つコロニーを生み出す。したがって、それはこの微生物の検出に大きな効果を提供します.

の典型的なコロニー 黄色ブドウ球菌 それらは黒または濃い灰色で、無色の境界線とそれらを囲む透明なハローがあり、他の微生物と区別されています。この病原体は臨床サンプル、水、化粧品、生または調理済み食品に含まれています。.

その診断または検出は、とりわけ食中毒、やけどを負った皮膚症候群、中毒性ショック症候群、膿瘍、髄膜炎、敗血症、心内膜炎などのさまざまな病状のために非常に重要です。.

索引

  • 1財団
    • 1.1栄養力
    • 1.2選択的
    • 1.3差動
  • 2準備
    • 2.1卵黄エマルジョン
    • 2.2 1%w / vの亜テルル酸カリウム
    • 2.3培地の調製
  • 3使用
    • 3.1臨床サンプル
    • 3.2食品サンプル
    • 3.3水サンプル
  • 4品質管理
  • 5おすすめ
  • 6参考文献

財団

栄養価

カゼイン膵臓加水分解物、肉抽出物および酵母抽出物は、一般的な微生物開発に必要な栄養素、ビタミンおよびミネラルの供給源であり、ピルビン酸およびグリシンは、特定の成長を促進する化合物である。 黄色ブドウ球菌.

選択的

ベアードパーカー寒天培地は選択的である。なぜなら、それは付随する植物相の成長を阻害する物質を含み、一方でその成長を促進するからである。 黄色ブドウ球菌. 抑制化合物は塩化リチウムと亜テルル酸カリウムです。.

差動

これは、 黄色ブドウ球菌 コアグラーゼ陰性ブドウ球菌の残りの部分. 黄色ブドウ球菌 亜テルル酸塩を黒色の金属フリーテルルに還元し、黒色または濃灰色のコロニーを形成する能力を有する。.

同様に、卵黄は酵素レシチナーゼおよびリパーゼの存在を証明するための基質を提供する。. 黄色ブドウ球菌 それは陽性レシチナーゼであり、それ故にコロニーの周りにはっきりとしたハローが観察され、レシチンが加水分解されたことを示している。.

この意味では、この寒天の中で周囲に明るいハローで明るい黒または濃い灰色のコロニーの出現は 黄色ブドウ球菌. 

沈殿帯が形成される場合、それはリパーゼ活性があることを示している。のいくつかの株 黄色ブドウ球菌 それらは陽性のリパーゼであり、他の陰性である.

その場合は 黄色ブドウ球菌 リパーゼが陽性であれば、黒色または濃灰色のコロニーの周囲に不透明な領域が観察され、その後レシチナーゼの作用により透明なハローが観察される。.

細菌以外のコロニー 黄色ブドウ球菌 この培地で生育することができると、周囲にハローがなく、無色または茶色のコロニーが形成されます。.

非定型の黒いコロニーも無色の境界線の有無にかかわらず、しかし明確なハローなしで観察することができます。これらのコロニーは考慮されるべきではありません、それらはに対応しません 黄色ブドウ球菌.

準備

卵黄エマルジョン

新鮮な鶏の卵を取ってよく洗い、70%アルコールに2〜3時間入れます。その後、卵は無菌的に開き、卵白は卵黄から慎重に分離されます。その後、50mlの卵黄を採取し、50mlの無菌生理溶液と混合する。.

1%w / vの亜テルル酸カリウム

いくつかの商業用住宅では、使用準備が整った1%亜テルル酸カリウムを販売しています。それは媒体が固まる前に媒体に加えられます.

実験室でこの溶液を調製するために、亜テルル酸カリウム1.0gの重さを量り、そして水の一部に溶解させる。その後、水の量を100mlにする。溶液はろ過法で滅菌する必要があります.

培地の調製

脱水媒体60 gを量り、940 mlの蒸留水に溶かす。混合物を約5〜10分間静置する。.

溶解プロセスを改善するために、媒体を頻繁に攪拌して熱を加えます。ちょっと沸かしましょう。オートクレーブで121℃で15分間滅菌する.

それが45℃の温度に達するまで放置し、そして50mlの卵黄エマルジョンおよび10mlの1%テルライトを添加する。よく混ぜ、滅菌ペトリ皿に15〜20 ml入れる.

固化させ、プラッカーで順序を逆にして使用するまで冷蔵庫に保存する。.

調製培地の最終pHは6.8±0.2であるべきである。.

サンプルを植える前に、プレートが周囲温度になるまで待ちます。プレートを縞またはDrigalskiスパチュラで表面に播種することによって播種する.

脱水媒体の色は淡褐色であり、調製媒体の色は淡琥珀色である。.

使用する

臨床サンプル

臨床サンプルは、プレートの一端にある材料の一部を排出することによって直接播種され、そこから消耗によって線条になります。 35〜37℃で24〜48時間インキュベートする.

食品サンプル

10gの食品サンプルを秤量し、90mlの0.1%ペプトン化水中で均質化し、必要ならばそこから希釈液を調製する。プレートに0.3mlの調製溶液を三連で接種し、Drigalskiスパチュラで表面に播種する。 35〜37℃で24〜48時間インキュベートする.

この方法論は、得られた典型的なコロニーを数えることを可能にし、そして存在する場合に理想的である。 黄色ブドウ球菌 g / mlサンプルあたり10 CFU以上.

あなたがその量を疑うならば 黄色ブドウ球菌 それが小さいか、または多くの付随するフローラがある場合は、10%NaClと1%ピルビン酸ナトリウムを含むトリプチケースソイブロスでサンプルを濃縮することが推奨されます。これは 黄色ブドウ球菌 そして付随する植物相の発達を阻害するでしょう。曇っているチューブはベアードパーカー寒天培地に播種されます.

水サンプル

真空濾過システム中で滅菌し、100mlの水を濾過し、次いで0.4ミクロンの微孔性膜を滅菌クランプで取り除き、ベアードパーカープレート上に置く。 35〜37℃で24〜48時間インキュベートする。この技術は、の典型的なコロニーの計数を可能にする。 黄色ブドウ球菌.

品質管理

ベアードパーカー寒天培地の品質を評価するために、以下のような既知の株を使用することができる。 黄色ブドウ球菌 ATCC 25923, 黄色ブドウ球菌 ATCC 6538, 表皮ブドウ球菌 ATCC 12228, 大腸菌 ATCC 25922または プロテウスミラビリス ATCC 43071.

の株の場合 黄色ブドウ球菌 ATCCは亜テルル酸塩を減らすことが知られており、それらは陽性リパーゼとレシチナーゼです。したがって、満足できる発色があり、中心が黒色で縁が無色で凸型のコロニーが成長し、不透明なハローともう1つのハローがより透明でなければなりません。.

一方、 表皮ブドウ球菌 この培地では発育不良が予想され、灰色がかった褐色から黒色のコロニーが見られ、明瞭なハローは見られない。.

大腸菌 そして P.ミラビリス それは完全にまたは部分的に阻害されると予想される。成長すると、褐色のコロニーは不透明な領域も透明なハローもなく成長するでしょう。.

おすすめ

-亜テルル酸塩と卵黄を加えた後は、培地を加熱しないでください。.

-卵黄エマルジョンの調製およびその培地への添加は、非常に傷つきやすい汚染工程である。細心の注意を払う必要があります.

-の典型的なコロニーの存在がある場合 黄色ブドウ球菌 前記株にコアグラーゼ試験を装着することによって確証されなければならない。.

-コアグラーゼに関して疑わしい結果がある場合は、他の確認試験を実施しなければならない.

-の典型的なコロニーの存在を混同しないように注意してください 黄色ブドウ球菌 黒い色の異型コロニー.

参考文献

  1. ウィキペディアの貢献者。ベアードパーカー寒天培地。ウィキペディア、フリー百科事典。 2017年3月15日、19時36分UTC。利用可能な場所:wikipedia.org/ 2019年2月18日アクセス済み.
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  3. 研究所ブリタニア。ベアードパーカー寒天培地。 2015年に入手可能:britanialab.com
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