寒天BHIの基礎、準備および使用



の BHI寒天 またはブレインハートインフュージョン寒天培地は、栄養価の高い固形培地です。スペイン語では、それをブレインハートインフュージョン寒天と呼びます。これは非選択的培地であり、これは、あらゆる種類のグラム陽性菌およびグラム陰性菌、ならびにいくつかの酵母菌および糸状菌を開発することができることを意味する。.

それは、子牛の脳および心臓の注入、動物組織の消化性加水分解物、カゼイン膵臓加水分解物、塩化ナトリウム、グルコース、リン酸二ナトリウムおよび寒天からなる。.

BHI寒天培地は、細菌検査室で最も頻繁に使用される培地の1つです。それは初代培養、他の選択培地で得られたコロニーの継代培養として、または実験室での菌株の維持のために、補足なしで使用することができます。.

一方、血液寒天培地やチョコレート寒天培地などの濃縮培地を調製する際のベースとして使用するのに理想的な培地です。どちらも栄養の観点から要求の厳しい微生物を分離するのに理想的です。しかし、それはグルコースを含んでいるので溶血のパターンを観察するのは適切ではないということを考慮に入れなければなりません。.

同様に、BHI寒天培地は、一般的な培地では増殖が困難な病原性微生物を単離するための特別な手段の調製に使用できます。 ヘモフィルスsp, Francisella tularensis、Corynebacterium diphtheriaeおよびHistoplasma capsulatum.

抗生物質添加剤のBHI寒天培地は、真菌の単離のための選択培地になります。.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1ウェッジ
    • 2.2プレート
    • 2.3血液寒天の調製
  • 3つの用途
    • 3.1サプリメントなしでの使用
    • 3.2他の培地を調製するためのベース寒天として
  • 4品質管理
  • 5参考文献

財団

それは血液や他の栄養補助食品の添加でその濃縮度を高めることができる、適度に要求の厳しい微生物を分離するための栄養価の高い培地です。.

それは非選択的培地であり、それゆえそれはほとんどのグラム陽性菌およびグラム陰性菌、ならびにいくつかの真菌の増殖を可能にする。しかし、それは抗生物質の添加で選択的になることがあります.

この培地には、子牛の脳と心臓、動物組織由来のペプチド加水分解物、カゼイン膵臓加水分解物が含まれています。これらの化合物はすべて、ビタミン、アミノ酸、窒素、および炭素の供給源として機能します。.

グルコースは、発酵した後に微生物にエネルギーを提供する炭水化物です。一方、塩化ナトリウムおよびリン酸二ナトリウムは浸透平衡を維持し、中性に近いｐＨを提供する。最後に、寒天は培地に固体の粘稠度を与える.

準備

脱水媒体52グラムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。混合物を沸騰するまで熱源に持って行き、溶解プロセスの間頻繁にかき混ぜる.

添加物なしでBHI寒天のくさびか版を準備できます.

くさび

くさびの調製のために、各チューブの半分を満たすまで調製物を供給し、それらが固化するまでベースの上に横たわるようになるとき、蓋をして121℃で15分間オートクレーブ中で滅菌する。それから使用まで冷蔵庫で保管してください.

プレート

溶解した混合物を１２１℃で１５分間オートクレーブ処理し、それが出たときにそれを５０℃に冷却しそして２０ｍｌの培地を滅菌ペトリ皿に入れる。それらは使用されるまで固化し、反転させそして冷蔵庫に貯蔵することが許される。植える前にプレートが室温になるようにする.

培地のpHは7.4±0.2であるべきです.

準備されていない媒体はベージュ色で、準備されています.

血液寒天の調製

培地を滅菌した後、約45〜50℃の温度に冷却し、この時点で血液（50ml）を加え、穏やかに混合して均質化し、各ペトリ皿に20mlを無菌的に入れる。泡がプレート上に形成された場合、それらを排除するためにバーナーの炎が泡の上を素早く通過するはずです。.

同様に、混合物が45〜50℃の温度に達したときに対応する添加剤を加えることによって特別な培地を調製することができる。.

媒体はチェリーレッドです.

用途

サプリメントなしで使用する

無添加のBHI寒天培地は初代培養として、また後で同定するために中程度または中程度の要求がある純粋な微生物株を植えるのに役立ちます.

それは淡色の媒体であるので、それは顔料を観察するのに理想的であり、そしてまたそれは妨害物質を含まないので、それはオキシダーゼおよびカタラーゼのような生化学的試験を行うために使用され得る。寒天.

同様に、BHI寒天ウェッジは、実験室で一定期間菌株を維持するために広く使用されています（bacterioteca）。.

細菌株を表面に植えたプレートまたはウェッジを３７℃で２４から４８時間インキュベートする。一方、真菌では温度と潜伏時間は求められている真菌の種類によって異なります.

他の培地を調製するためのベース寒天として

このベースで濃縮された選択培地を調製することができます.

充実した

その主な機能は、微生物検査室での日常的な使用のための血液寒天の調製における基礎として役立つことです。特にBHI塩基は、以下の株の単離に役立ちます。 連鎖球菌sp. しかしながら、それはグルコースを含むので溶血パターンの観察には適さないという欠点を有する。.

それはまたの分離のためのウサギまたは馬の血の寒天の準備で使用されます ヘモフィルスsp. より良い結果を得るためには、濃縮サプリメントを追加することができます（IsoVitaleX）.

サンプルが気道から寒天に由来する場合は、付随する細菌叢を抑制し、菌株の回復の可能性を高めるためにバシトラシンを添加することができます。 ヘモフィルスsp.

一方、血液寒天培地（子羊またはヒト）は亜テルル酸塩シスチンを用いて調製することができます。 コリネバクテリウムジフテリア. 同様に、それを単離するためにシスチンとグルコースを添加して、ウサギ血液寒天を調製することは有用です。 Francisella tularensis.

血液寒天プレートの播種は、消耗により行われ、そして微好気性（５〜１０％ＣＯ）中で３５〜３７℃で２４〜４８時間インキュベートされる。2）.

選択的

抗生物質を添加したこの培地は、真菌の単離のためにサブロー寒天培地に代わることができます。.

BHI寒天培地とクロラムフェニコール（ゲンタマイシンまたはペニシリン）、ストレプトマイシンおよびウマ血液との組み合わせは、 Histoplasma capsulatum.

単離する微生物に応じて、35〜37℃または室温で好気的に培養することをお勧めします。このために2枚のプレートを使用して、時々インキュベーションは両方の温度範囲で必要です。.

いくつかの真菌が好き 白癬菌 彼らは7日間まで室温でインキュベートする必要があります.

品質管理

調製した各バッチから、1枚のプレートまたはウェッジを37℃で24時間インキュベートし、増殖がないことを確認することをお勧めします。血液寒天培地を調製するときは特に重要です。.

一方、培地の品質は、既知または認証された標準株を接種し、それらの発達を観察することによって評価することができます。.

この意味では、添加物なしでBHI寒天を評価するために、 大腸菌 ATCC 25922, 黄色ブドウ球菌 ATCC 25923または カンジダ・アルビカンス ATCC10231。これらをエアロビオシス中で37℃で24〜48時間インキュベートする。すべての場合において、満足のいく成長が期待される.

血液寒天プレートを評価するために、  化膿連鎖球菌 ATCC 19615, 肺炎球菌 ATCC 6305または 白癬菌mentagrophytes ATCC 9533.

細菌株を微好気球菌中で３７℃で２４時間インキュベートし、一方真菌を室温で湿潤室中で７日間までインキュベートする。すべての場合において、満足のいく成長が期待される.

参考文献

  1. 研究所ブリタニア。ブレインハートインフュージョン寒天。 2015年に入手可能：britanialab.com.
  2. BDラボラトリーズブレインハートインフュージョン（BHI）寒天。 2013年に入手可能：bd.com.
  3. ディフコフランシスコソリアメルギゾラボラトリーズ、Ｓ。ブレインハートインフュージョン寒天。 2009年.
  4. ネオゲン研究所ブレインハートインフュージョン寒天。 Foodafety.neogen.comで入手可能です。
  5. Gil M. Agar blood：基礎、用途、そして準備2018年に入手可能：lifeder.com.
  6. ウィキペディアの貢献者。ブレインハートインフュージョンウィキペディア、フリー百科事典。 2018年9月19日、03：58 UTC。 wikipedia.orgから入手できます。 2019年3月2日アクセス済み.
  7. Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリー＆スコットの微生物学的診断12編社説Panamericana S.A.アルゼンチン.