寒天チョコレートの基礎、用途および調製



の チョコレート寒天 それは固体の、濃縮された、非選択的かつ非分化的培地である。それはあらゆるタイプの細菌を育てることができるが栄養の観点から要求の微生物の隔離のために主に使用されています.

そのため、CSFや関節液など、通常は無菌のサンプルの播種においてその有用性が特に高まります。それはまた、多微生物サンプルを播種するために選択された手段の中に含まれていますが、これらの場合には、付随する植物相を阻害する抗生物質を加えることが必要です。.

この媒体はチョコレートと非常によく似た特徴的な褐色をしているので、その名前です。準備は血液寒天に非常に似ています、この場合だけ赤血球が壊れるように血液を加熱しなければなりません.

血液寒天のようなその調製は、それが容易に汚染されるので、非常に繊細です。このため、多くの研究所では、品質を保証する商業用住宅ですでに準備されているこの培地を入手することを好みます。.

索引

  • 1財団
  • 2つの用途
    • 2.1コロンビア寒天培地で調製したチョコレート寒天培地
    • 2.2 GCベース寒天で調製したチョコレート寒天（淋菌用）
    • 2.3MüellerHinton寒天で調製したチョコレート寒天
    • 2.4 Thayer Martin寒天培地で調製したチョコレート寒天
  • 3準備
    • 3.1計算
    • 3.2計量して溶かす
    • 3.3滅菌する
    • 3.4血液の凝集
    • 3.5血液を使わずにチョコレートアガーを作るもう一つの方法
  • 4品質管理
  • 5参考文献

財団

この培地は、栄養分が豊富な寒天と加熱された血液で構成されています。赤血球の溶血は、属などのいくつかの微生物の増殖に必要な第X因子（ヘミン）および第V因子（NAD）を提供します。 血友病. それはまたの分離のために非常に有用です Neisserias sp.

血液寒天のように、必要に応じて様々な培地を基本寒天として使用できます。最も推奨されるのはコロンビア寒天培地、ミューラーヒントン、GC寒天培地およびThayer Martin寒天培地であるが、使用される培地の中にはブレインハートインフュージョンおよびトリプチケースソイ寒天培地がある。.

チョコレート寒天のいくつかの変種は、IsovitalexまたはPolivitexと呼ばれる市販の強化サプリメントを含みます.

これらのサプリメントはビタミンBを含みます12年, L-グルタミン、アデニン、塩酸グアニン、p-アミノ安息香酸、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（NAD）、チアミンピロリン酸、硝酸第二鉄、塩酸チアミン、塩酸システイン、L-シスチンおよびグルコース.

チョコレート寒天は血液寒天よりも濃縮されているが、溶血パターンの観察はできないことに注意することが重要です。.

用途

Columbia寒天を使用したチョコレート寒天

この培地はカゼインと心臓の膵臓で消化された食肉ペプチド、塩化ナトリウム、寒天、酵母エキスとコーンスターチを含みます。ビタミン、ミネラル、必須アミノ酸も豊富です.

加熱された血液を含むこの塩基は、ナイセリア属の細菌の単離に理想的です。一方、ブルセラのサプリメントを培地に添加すれば、上記の微生物を単離することができる。馬の血を使用すると結果が改善されます.

GCベース寒天で調製したチョコレート寒天（淋菌用）

この培地はペプトン、コーンスターチ、一塩基性および二塩基性緩衝液、塩化ナトリウムおよび寒天を含んでいます.

市販されているほとんどのチョコレートアガープレゼンテーションにはこのベースが含まれており、加熱された血液は含まれていませんが、ヘミンと成長因子、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、V因子、グルコースの化学的サプリメントの合成混合物が含まれます。.

MüellerHinton寒天で調製したチョコレート寒天

それはのような要求の厳しい微生物の抗菌剤感受性試験を実行するために使用されます。 肺炎球菌 5％加熱ラム血を使用.

それはまたナイセリア属とヘモフィルスの一次単離にも役立ちますが、 血友病 ウマ血液の使用は、それが第Ｘ因子および第Ｖ因子の豊富な供給源であるので、好ましい。.

一方、播種するサンプルが非滅菌領域からのものである場合は、その領域の通常の細菌叢を抑制するために抗生物質を添加することをお勧めします。.

属の細菌の存在が疑われる呼吸器サンプルの例 血友病 バシトラシンはの成長を抑制するのに使用されています ブドウ球菌、ミクロコッカス、レンサ球菌 と腐生性ナイセリア.

性器のサンプルの場合、疑わしい箇所 ヘモフィルス・デュクレイ, 以下の方法で調製されたチョコレート寒天が首尾よく使用された：５％のチョコレート化ウマ血液、１％のイソビタレックス濃縮および３μｇ ／ ｍｌのバンコマイシンを含むミューラーヒントン寒天.

Thayer Martin寒天培地で調製したチョコレート寒天培地

この媒体はの分離のために特別です 淋菌. それは付随の植物相を抑制するために抗生物質を含まなければなりません。子羊の血が使われている.

準備

使用するベース寒天培地の調製についての指示が見られるべきです。それらは脱水培地のパッケージの裏にあります。彼らは通常、1リットルの培地を調製するためにどれだけの量を量るべきかを説明します。.

実験室であなたは必要とされる正確な量を準備することができます、それは1リットルより多くても少なくてもよいです.

計算

必要な量を準備するためにどれだけの量を量るべきかを計算するために、3の規則が作られます。例：

1リットルのためにそれが40グラムを量ることが必要で、実験室が800 mlを必要とするならば、それは言われます：

1000ミリリットル-40グラム

800ml - X

式は次のようになります。

X = 32 gr（800 mlの重さまでの量）.

計量して溶かす

必要量を秤量して水を入れたフィオラに入れます.

適度な熱に加熱し、脱水媒体が完全に溶解するまで回転運動で穏やかに混合し、1分間沸騰させる。.

滅菌する

フィオラをオートクレーブに導入し、121℃で20分間培地を滅菌する。.

血液の骨材

オートクレーブを出るときは、血液を入れて培地が褐色になるまで混合するために、培地の温度が約56〜70℃になるまで静置します。.

あなたがサプリメントを追加しようとしているなら、これはそれをする時です。続いて、各滅菌ペトリ皿に２０ｍｌを混合して提供する。.

全体の手順は、層流フード内またはブンゼンバーナー周辺で実行する必要があります.

凝固するまで放置し、冷蔵庫で逆さにしておく.

血液を使わずにチョコレートアガーを作るもう一つの方法

基本培地を上記のように調製し、市販の脱水ヘモグロビンをオートクレーブ中で溶解および滅菌する。.

両方の溶液を５０℃に冷却し、添加してサプリメントを添加する。無菌状態で混ぜ合わせてから滅菌ペトリ皿に入れる.

品質管理

それは赤血球を溶解し、同時に感熱性であるファクターVを維持するために理想的であるので、血液が示された温度に置かれることが重要です.

寒天の表面に気泡があってはいけません。 100枚のプレートの各バッチは、その無菌性をチェックするために24時間、37℃のストーブの中で1枚または2枚のプレートでインキュベートする.

最良の結果を得るために、チョコレート寒天は調製後すぐに使用する必要があります。.

臨床的に重要な主要な要求微生物の増殖に対する、新しく調製した培地の有効性を評価するために、対照細菌株を実験室で服用しなければならない。.

参考文献

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  4. Llanes R、Reyes A、RodríguezC、GuzmánD、Llop A. Microbiology LaboratoryにおけるGC-Biocen Agarの基本培地の使用の可能性. Rev Cubana Med Trop,  2004年; ５６（３）：２３７−２３８に記載されている。 scielo.sldで入手できます。.
  5. ウィキペディアの貢献者。チョコレート寒天。ウィキペディア、フリー百科事典。 2018年12月17日、19時54分UTC。 en.wikipedia.orgで入手可能です。.