基礎ラクトサードスープ、調製および使用



の 乳糖スープ 処理された食品、乳製品または水で行われた微生物学的分析からサルモネラ菌株を分離する際に主に濃縮前の培地として使用される、液体の非選択培地です。これは、食品の微生物学的仕様に関する国際委員会（ICMPF）によって推奨されています。.

培地には、ゼラチン、肉エキス、ラクトース、バクテリアの成長に必要な物質の酵素消化が含まれています。さらに、ラクトースは発酵性の炭水化物なので、いくつかの大腸菌群はガス生産でそれを分けることができます.

この理由のために、ラクトースブロスは、全公衆および糞便性大腸菌群の推定的研究のためにアメリカ公衆衛生協会（APHA）によって推奨されており、それを最も可能性の高い数（NMP）の標準的技法におけるラウリル硫酸トリプトースブロスに代わる優れた代替として認定する。 ）、食品、牛乳および地表水、地下、娯楽、家庭および産業廃棄物のサンプルの微生物学的分析に使用される.

索引

  • 1財団
  • 2準備
  • 3つの用途
    • 3.1事前濃縮
    • 3.2全大腸菌および糞便性大腸菌の分析
  • 4媒体の品質管理
  • 5参考文献

財団

いくつかのサンプルの微生物学的分析のために、予備濃縮のステップは、非常に少量であるか、またはその生存能力を侵害するかまたは最小限にする好ましくない条件下にあり得る特定の微生物を回収することができるために不可欠である。.

そのようなものは、おそらくで汚染された乾燥および加工食品の場合です。 サルモネラsp. これらの場合、バクテリアが存在すると、それらは製品の製造工程中に物理的および化学的な誤処理を受けています。.

このようにして、微生物は、脱水、抑制性または毒性生成物への曝露、および他の細菌のより大量の存在によって生じる重複などの有害因子に曝露される。.

この意味で、ラクトースブロスは微生物の損傷した構造に修復効果があり、それを検出することができるような方法でそれを回復させそして再生させる。.

同様に、ラクトースブロスは、その生存能力に影響を与え得る阻害物質を希釈する能力を有し、その発生を可能にする。さらに、ラクトースブロスの栄養成分は、成長のために戦略的です。 サルモネラsp 上記の他の微生物.

最終的な識別のために、それは決定的な作物の他の手段に向かって継代栽培されなければなりません.

他方、培地の組成はまた、ガスを産生するラクトース発酵微生物の検出を可能にする。.

準備

１リットルのラクトースブロスを調製するために、１３グラムの脱水培地を秤量し、そして１０００ｍｌの蒸留水に溶解する。.

水に媒体を溶かすのを助けるために、あなたは少し溶液を加熱することができますが、それほど多くはありません。.

均質になったら、溶液を次のように調製する：ブロスを用いて大腸菌群を探す場合、試験管を入れたラックを用意し、Durham発酵管を上下逆に挿入する。.

ダラム管は、ガスの形成、大腸菌群の検索における貴重なデータの検出を可能にするため、非常に重要な細部です。.

チューブの準備ができたら、10 mlのラクトースブロスをチューブに分注します。これはダラムチューブ全体を覆うのに十分な量でなければなりません。.

ラクトースブロスが濃縮前のブロスとして使用される場合は、ダーラム発酵チューブを配置する必要はありません。この場合、大量の培地（225 ml）が必要です。これは、500 mlのボトル、広い口の中、耐熱性のスクリューキャップで供給されます。.

その後、チューブまたはフラスコを121℃で15分間オートクレーブに入れる。.

培地は25℃で6.9±0.2の最終pHに維持する必要があります。.

ワインは使用されるまで冷蔵庫に保管されます。.

使用する前に、ブロスは室温で調質する必要があります.

他方、ラクトースブロスは二倍濃度で調製することもできる。.

色の変化によって乳糖発酵が行われたチューブを示すために、pH指示薬として乳糖ブロスにブロモクレゾールパープルを追加する研究所もあります。この場合、ブロスは紫色になり、発酵が黄色に変わった場合.

用途

微生物学の実験室では、泌乳ブロスは、信頼性が高く速い結果を提供する比較的安価な培地として広く使用されています（24-48時間）。.

それは水と食物中の合計と糞便性大腸菌群の分析のために、またはサルモネラ菌のための前濃縮ブロスとして使用することができます。.

事前濃縮

濃縮前はサンプルを濃縮する前のステップで、加工食品中のサルモネラ属菌の回収率を大幅に向上させます。.

これを行うために、固形食品（２５グラム）または液体（２５ｍｌ）のサンプルを２２５ｍｌのラクトースブロスに播種し、そして２４〜４８時間インキュベートする。その後、亜セレン酸シスチンブロスまたはテトラチオネートブロスを濃縮培地中で継代培養する。それからそれは選択的な媒体XLDおよびSSに渡ります.

総および糞便性大腸菌群の分析

それは糞便汚染の指標として優れた手段です.

したがって、ラクトースブロスは、最確数法による大腸菌群研究の推定段階に理想的です。.

大量の大腸菌群が疑われるサンプルでは、​​少量の大腸菌群が接種される（１ｍｌ）が、少量の大腸菌群が疑われるサンプルでは、​​より多くの検体が接種される（１０ｍｌ）。.

分析用に10の希釈液を作成-1, 10年-2, 10年-3, 使用濃度ごとに3〜5個のチューブ電池を形成.

各希釈液から同じ量をラクトースブロスに蒔きます。.

チューブを２４時間インキュベートする。陰性のブロスをさらに24時間インキュベートする.

結果の解釈は、2つの特性を観察することによって行われます。1つ目は濁度の有無で、この培地はpH指示薬を含まないため、色の変化はありません。.

二つ目はガスの生産かどうかです。ガスは内部の1つ以上の空気の泡の出現によって、Durhamの管で容易に示されます.

両方の特性、すなわちガス生成に伴う濁度が観察される場合、それは肯定的であると考えられる。ポジティブチューブは確認用培地（Brilliant Green 2％BileおよびECブロス）で再播種する必要があります。.

媒体の品質管理

- 培地の調製において、同じ目的が大腸菌群の研究であるならば、Durhamsチューブを置くことを忘れないことが重要です。.

- 殺菌する前に培地を過熱しないでください.

- 滅菌する前に試験管に入れ、その後は絶対にしないでください。.

- 培地に3ヶ月以上の準備がある場合は使用しないでください.

- 通常の培地の特性に変化があることに気付いた場合は使用しないでください。.

- ラクトースブロスのバッチを調製するとき、として知られている株を植えることによってそれの品質をテストします 大腸菌, Enterobacter aerogenes , Citrobacter freundii そして 肺炎桿菌. 彼らはガス生産（ポジティブコントロール）で、非常によく成長します.

- それはまた含むことができます 緑膿菌, サルモネラ菌 Typhimurium ○ エンテロコッカス・フェカリス, それは成長するが、ガスを生産することなく成長する（ネガティブコントロール）.

- 脱水媒体の元の色はベージュ色であり、媒体の色は非常に透明で透明な黄色に調製されたことに留意すべきである。色や外観に変化がある場合は、その品質が低下している可能性があります。.

参考文献

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