亜セレン酸塩ブロスの基礎、調製および使用



の 亜セレン酸スープ それは選択的液体培地です。それはサルモネラ属の腸病原性細菌の存在が疑われるサンプルの濃縮のためにLeifsonによって設計されました。.

この培地は、アメリカ公衆衛生協会（APHA）の要件を満たしているため、便試料、尿、液体または固形食品、水などに含まれるサルモネラ菌の存在を調べるために使用されています。.

それが持っている化学組成は、これらの微生物の回収に有利に働き、そして今度は他の微生物の増殖を阻害する。それは腸内細菌科に属するほとんどの細菌に主に毒性があります。しかしながら、それはまた、赤痢菌の株の回収を可能にし、そしてシュードモナスおよびプロテウスの増殖を阻害しない。.

それは、無水亜セレン酸水素ナトリウム、無水リン酸ナトリウム、ペプトンおよびラクトースからなる。シスチンが追加された変種もあり、それ故にその名前の亜セレン酸 - シスチンブロス.

現在のところ、亜セレン酸 - シスチンブロスの使用が好ましい。なぜなら、テトラチオネートナトリウムブロスのような同じ目的の他の選択培地で観察されるのと同等のより高い割合のサルモネラ回収率が得られるからである。.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1 - セレナ
    • 2.2 - 市販媒体の準備
    • 2.3亜セレン酸シスチンブロス
  • 3つの用途
  • 4シード
  • 5品質管理
  • 6制限
  • 7参考文献

財団

ブロスに含まれるペプトンは、微生物を適切に発育させるための栄養素として機能します。サルモネラ菌はペプトンを窒素、ビタミン、アミノ酸の供給源として使用しています.

ラクトースは発酵性の炭水化物ですが、亜セレン酸ナトリウムはグラム陽性菌、特に腸内細菌叢、特に腸内細菌科に存在するほとんどのバクテリアの増殖を遅らせる阻害物質です。リン酸ナトリウムは培地のpHを安定させる緩衝剤です.

L-シスチンを含む亜セレン酸ブロス変種の場合、この追加化合物は亜セレン酸の毒性を最小限に抑え、サルモネラ菌の回収率を高める還元剤です。.

準備

-亜セレン酸スープ

あなたが混合物の成分を持っているならば、あなたは計量することができます：

無水セレン酸水素ナトリウム4グラム.

無水リン酸ナトリウム10g.

ペプトナ5グラム.

乳糖4グラム.

化合物を1リットルの滅菌蒸留水に溶解します。それは全体を溶かすためにわずかに加熱することができます.

オートクレーブは使用すべきではないので、研究所によってはそれを殺菌するために流動性のある蒸気に10分間さらします。培地が滅菌されている場合は、使用されるまで冷蔵庫に保管できます。.

それはまた殺菌することなくそして殺菌試験管に直接10〜15mlを供給することなく調製することができる。.

この場合は、安静にして直ちに使用してください。培地は無菌ではないため、後で使用するために冷蔵庫に保存することはできません。.

-市販培地の調製

市販の培地が利用可能である場合、２３ｇの脱水培地を秤量し、そして１リットルの滅菌蒸留水に溶解する。短時間で温めて溶解を終了させる。オートクレーブで滅菌しないでください。無菌試験管に無菌的に10または15 mlを入れる.

培地の最終pHは7.0±0.2であるべきです.

脱水媒体の色はベージュ色であり、調製物は透明で半透明の琥珀色であることに留意すべきである。.

亜セレン酸シスチンブロス

それは亜セレン酸ブロスの同じ化合物を含みますが、10 mgのシスチンが加えられます。その他の手順は上記とまったく同じです。.

用途

この媒体は、疫学的研究、病気がその急性期にない場合、無症候性の患者または健康な保因者に使用されるのに特別です.

サルモネラ属の単離は、それらが通常サンプルを汚染することが稀な方法であることが通常わかっているので、通常は困難である。少量であることは、大量に見いだされる他の細菌属の成長と容易に重なります.

その一方で、加工食品を加工する原材料は、熱、脱水工程、消毒剤の使用、放射線および防腐剤などの使用にさらされることが多い。.

それ故、原料中に存在するサルモネラは、上記の工業プロセスへの製品の提出により誤処理される。同様に、糞などの臨床サンプルの場合、それらが抗生物質で治療されたことがある患者から来たものであるならば、株は弱いかもしれません。.

したがって、SS寒天、キシロース寒天、リジンデオキシコール酸（XLD）などの選択培地での回収率を最適化するために、サルモネラ菌の存在が疑われるサンプルはすべてラクトースブロスで濃縮し、次に亜セレン酸ブロスで濃縮する必要があります）、とりわけ、腸溶性ヘクテン寒天培地（ＨＥ）および緑色鮮やかな寒天培地。.

播種

便試料については、試料1gを採取し、10〜15mlの亜セレン酸ブロスを含むチューブに懸濁する。スツールが液体の場合は1mlを取り、スープに吊り下げます。直腸スワブの場合は、スワブ材料をブロスに排出します。.

固形食品のサンプルでは1グラムを取り、亜セレン酸ブロスに懸濁.

液体食品では、二重濃度で亜セレン酸スープと同じ部分に混ぜる.

尿サンプル用に遠心分離し、上清を捨て、全ての沈殿物を取り出し、亜セレン酸ブロスに懸濁する.

ブロスを３７℃で２４時間インキュベートする。細菌の増殖は濁度によって証明されます。 １サンプルあたり追加のチューブを含めて４２℃でインキュベートすることもできる。続いて、亜セレン酸ブロスから選択的固形培地を播種する。.

品質管理

無菌性を制御するために、接種なしの各バッチからの亜セレン酸ブロスを37℃で24時間インキュベートする。媒体の濁り、または色の変化がないことが予想される.

培地の良好な機能を制御するために、以下のような既知の菌株を使用することができる。

Salmonella enteritidis ATCC 13076, ネズミチフス菌 ATCC 14028,  サルモネラ菌コレラ菌 ATCC 12011, 大腸菌 ATCC 25922と プロテウスミラビリス ATCC 43071.

期待される結果は以下のとおりです。

  • 最初の3つの細菌株では、増殖は十分でなければなりません.
  • に 大腸菌 部分抑制.
  • プロテウス中等度の成長.

制限事項

中亜セレン酸塩ブロスは人間の肌に有毒である、それで直接接触は避けられるべきである.

参考文献

  1. Flores-Abuxapqui J、Puc-Franco M、Heredia-Navarrete M、Vivas-Rosel M、Franco-Monsreal J.両方とも37℃および42℃でインキュベートした亜セレン酸ナトリウムとテトラチオン酸ナトリウムの培地比較の孤立 サルモネラ菌 キャリアスツール. Rev Biomed 2003年14（4）：215〜220
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