大豆ブロストリプチカゼナの基礎、調製および使用



の 大豆ブロストリプチカーゼイナ それは液体培地で、非常に栄養価が高く非選択的です。その多目的性のために、それは微生物学研究室で最も広く使われている液体培地の一つです。.

略語でTSBを略して、ブロストリプチカサ大豆または消化カゼイン - 大豆としても知られています。 Tryptic私は スペイン語での頭字語はスープまたはCST。その用途により、その用途は非常に多様です。それはトリピン、大豆ペプトン、塩化ナトリウム、リン酸二カリウムおよびグルコースで構成されています.

それは、栄養的に要求のあるものおよび嫌気性細菌を含む臨床的に重要な病原性細菌を再生することができる。いくつかの日和見真菌や汚染物質もこの環境で開発することができます.

その高い栄養力のために、それは微生物汚染を検出するために高い感度を持っています、この理由のためにそれはワクチンの微生物学的分析のためにUSDA動植物健康検査サービスによって選ばれました。.

同様に、トリプチカーゼ大豆スープは、化粧品や食品などの工業レベルでの製品の微生物学的研究に関する様々な薬局方（欧州EP、日本JPおよび北米USP）の要件を満たしています。.

一方、その有用性にもかかわらず、この培地は比較的安価であるため、ほとんどの微生物学研究所にとって手頃な価格であることを言及する価値があります。準備もとても簡単です.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1トリプチサミンダイズ
    • 2.2 - トリプチカゼイン大豆ブロスの変種
  • 3使用
  • 4シード
  • 5品質管理
  • 6制限
  • 7参考文献

財団

トリプテイナ、ペプトン、グルコースは、迅速な微生物開発のための理想的な培地に変えるための必須の栄養価を彼に提供します。.

約6〜8時間のインキュベーションは、ほとんどの微生物ですでに増殖が見られます。しかし、成長するのに数日間続くことがあるゆっくり成長する株があります.

塩化ナトリウムおよびリン酸二カリウムは、それぞれ浸透平衡およびpH調整剤として作用する。増殖の存在は培地中の濁りの出現によって証明される。成長がない場合、培地は半透明のままです。.

その淡い色のために、それが生成する顔料に対応する、記事の始めに位置する画像に示されるもののような顔料の生成を観察することは可能である。 緑膿菌. 

準備

-トリプシン大豆スープ

トリプチケースソイブロスを調製するために、デジタルスケールで３０グラムの脱水された市販の培地を量る。それからそれはフィラに含まれている蒸留水1リットルに溶けます.

混合物を５分間放置し、次に媒体の溶解を助けるために熱源に持って行く。それは1分間沸騰しながら頻繁に振るべきです.

一旦溶解すると、それは必要に応じて適切なサイズのチューブに分配される。綿栓またはベークライトキャップ付きのチューブを使用することができます。続いて、チューブをオートクレーブ内で培地を用いて121℃で15分間滅菌する。.

培地のpHは7.3±0.2でなければなりません

脱水培地の色は薄いベージュ色で、乾燥した場所に10〜35℃で保存する必要があることを考慮に入れる必要があります。調製したブロスは薄琥珀色で、冷蔵庫（2〜8℃）に保存する必要があります。.

-トリプチカゼイン大豆スープのバリエーション

トリプチカミンで修飾された大豆ブロスは、胆汁酸塩とノボビオシンを加えることによって調製することができます。 大腸菌. 同じ目的のための別の選択肢は、バンコマイシン、セフィ​​キシムおよびテルライト（２．５μｇ ／ ｍｌ）を補充したトリプチケースソイブロスを調製することである。.

他方、目的がバイオフィルム形成を刺激することである場合、より多くのグルコース（０．２５％）をトリプチカゼイン大豆ブロスに添加することができる。.

使用する

それはのような要求が厳しいか迷惑な細菌の成長を可能にするのに十分に栄養がある 肺炎球菌, Streptococcus spとBrucella sp, 血液や血清を補給する必要はありません.

同様に、いくつかの真菌は、このようなブロスで発生する可能性があります。 カンジダアルビカンスコンプレックス, アスペルギルス属 e Histoplasma capsulatum.

さらに、嫌気性条件下でのこの培地は、クロストリジウム属に属する細菌、ならびに臨床的に重要な嫌気性非胞子形成細菌の回収に理想的である。.

6.5％塩化ナトリウムを添加した場合、Enterococcusおよび他のD群連鎖球菌の増殖に使用できます。.

研究レベルでは、それは様々なプロトコルにおいて、特にバイオフィルムまたはバイオフィルムを形成する細菌の研究において非常に有用であった。それはまた、Kirby and Bauerの方法によりアンチビオグラムを実施するのに必要なMac Farlandの0.5％で細菌懸濁液を調製するためにも使用される。.

この場合、同様の外観の3〜5個のコロニーを採取し、4〜5mlのトリプチカゼイン大豆ブロス中に乳化する。それを次いで３５〜３７℃で２〜６時間インキュベートし、続いて滅菌食塩水を用いて所望の濃度に調整する。トリプチケースソイブロスは、18〜24時間のインキュベーションには使用しないでください。.

播種

試料は直接播種するか、または選択培地から採取した純粋なコロニーを継代培養することができる。接種前の培地が白濁しないように接種量は少なくしてください.

通常24時間、好気中で37℃でインキュベートしますが、これらの条件は求められている微生物によって異なります。必要に応じて、嫌気性条件で37℃で数日間インキュベートすることもできます。例えば、要求の厳しい、または成長の遅い微生物では、最大7日間インキュベートすることができます。.

ワクチンなどの医薬品の微生物学的分析では、プロトコルはより厳格です。このような場合、増殖していないブロスは14日間の連続培養に達するまで廃棄されません。.

品質管理

調製された各バッチについて、無菌性を実証するために、接種なしで1または2本のチューブをインキュベートするべきである。それは変わりません.

既知の株を植えてその行動を評価することもできます。使用することができる株の中にあります：

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, カンジダ・アルビカンス ATCC 10231, 枯草菌 ATCC 6633, 黄色ブドウ球菌 ATCC 6538または25923, 大腸菌 ATCC 8739,  化膿連鎖球菌 ATCC 19615, 肺炎球菌 ATCC 6305, 緑膿菌 ATCC 9027, ネズミチフス菌 ATCC 14028.

すべての場合において、増殖は各微生物に適した雰囲気および温度の条件下で満足できるものでなければならない。.

制限事項

-グルコースの発酵は酸の産生による培地のｐＨの低下を引き起こす。これは酸性度に敏感ないくつかの微生物の生存にとって不利であるかもしれません.

-酸度に加えて、数日後のバクテリアは環境を不快にする毒性物質の結果としての栄養分を枯渇させるので、それは株の維持のために推薦されません。.

-ブロスは汚染されやすいので、すべての無菌プロトコールに注意を払う必要があります。.

-トリプチカゼイン大豆ブロスの調製後は、この種の操作は汚染に対して非常に弱いので、ブロスを別の滅菌チューブに移そうとしないでください。.

参考文献

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