寒天CLEDの基礎、用途および調製



の CLED寒天 （シスチン - ラクトース - 電解質 - 欠損）は、尿路感染症の診断に使用されるディファレンシャル固体培地です。培地の組成は、尿中病原体の良好な増殖のために設計されており、コロニー形成単位（CFU）の定量化に理想的です。.

グラム陰性菌およびグラム陽性菌もその中で増殖することができるので、ＣＬＥＤ培地は非選択的である。しかし、これは問題ではありません、ほとんどの尿路感染症は単一タイプの微生物によって引き起こされているからです。.

多菌感染症の場合、2〜3種類のバクテリアが得られますが、まれであり、ほとんどの場合汚染されたサンプルです。.

この培地で増殖することができるグラム陰性菌の中には、家族に属する桿菌があります。 腸内細菌科 尿路病原体は、尿サンプル中で最も頻繁に分離されます。 大腸菌、肺炎桿菌、プロテウス・ミラビリス, Morganella morganii, 緑膿菌, とりわけ.

同様に、この培地で増殖することができるグラム陽性菌の中には 黄色ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌、大便連鎖球菌、ストレプトコッカス・アガラクティエ、コリネバクテリウム属、ラクトバチルス属 そして彼らは複合体のように酵母を育てることさえできます カンジダ・アルビカンス.

しかしながら、培地の化学組成のために、それはいくつかの要求の厳しい尿生殖器病原体の増殖を可能にしない。 淋菌, ガードネレラ 膣, とりわけ.

索引

  • 1 CLED寒天の基礎
  • 2 CLED寒天（ベビス）の基礎
  • 3つの用途
    • 3.1播種尿サンプル
    • 3.2解釈
    • 3.3識別
  • 4準備
  • 5参考文献

CLED寒天の基礎

ＣＬＥＤ培地は、エネルギー源として肉抽出物、カゼイン膵臓加水分解物およびゼラチン加水分解物を有する。それらは要求の厳しい細菌の開発のための栄養素を提供します.

それはまたシスチン、その小さいサイズによって区別できる大腸菌群の成長を可能にするアミノ酸を含んでいます.

同様に、ラクトースは発酵性炭水化物を含んでいます。発酵菌と非発酵乳糖を区別できること.

発酵しているバクテリアは酸の産生によって培地のpHを変え、黄色のコロニーを発生させますが、発酵していないバクテリアは培地に変化を起こさないので、元の寒天の色を帯びた緑色になります。.

この培地ではブロモチモールブルーであるpH指示薬の存在のおかげで発酵反応が明らかにされています.

一方、培地の低電解質濃度は属の典型的な侵襲的成長を阻害する プロテウス, 群発効果と呼ばれます。これは、プロテウス属が存在するかどうかを含むＵＦＣの計数を可能にするので、他の手段に関して利点を生み出す。.

しかし、低濃度の電解質は属のいくつかの種の成長を阻害します 赤痢菌, これが他の方法と比べて不利である.

CLED寒天（ベビス）の基礎

元のフクシン酸組成物（Andrade指標）を元の組成物に組み込んだBevisによって作られたこの培地の変形または修正がある。それは非発酵細菌から発酵を区別するためにブロモチモールブルーと一緒に作用します.

従来の培地と改変培地の違いは、コロニーが採用する色です。ラクトース発酵性細菌の場合、コロニーはピンク色または赤色のハローを有する赤みがかったオレンジ色を獲得し、一方、非発酵性細菌は青灰色である。.

用途

CLED寒天培地は尿サンプルの播種専用です。この培地の使用はヨーロッパの研究室で特に頻繁に行われていますが、アメリカではあまり使われていません。.

信頼できる結果を得るためには、サンプルのコレクションは次のような特定のパラメーターを満たす必要があります。

  • サンプルを取る前に抗生物質を飲まない.
  • 侵襲的方法でサンプルを採取することが不可能な場合は、より集中しているので、朝の最初の1時間から尿を採取することが好ましい。.
  • サンプルを取る前に性器を徹底的に洗ってください.
  • 最初の排尿ストリームを破棄してから容器を置きます.
  • 滅菌ラベルのついた容器に25〜30 mlの尿を集める.
  • 氷に囲まれた実験室にすぐに行く.
  • それは2時間の放出の前に処理されるか、または最高24時間4℃で冷蔵されなければなりません.

播種尿サンプル

尿サンプルは1:50に希釈する必要があります.

希釈のために、0.5mlの患者の尿を入れ、そして24.5mlの無菌の生理的溶液で希釈する。.

CLED培地上でドリガルスキースパチュラで表面あたり0.1mlの希釈した尿と種を蒔く。これはコロニーを数えるのに適した播種方法です。結果はCFU / mlで表現されなければならないので、それが尿サンプルで使用される理由はここにあります.

得られたコロニーの定量化のために、次のように進めてください：プレートのコロニーを数え、そして10倍してから50倍します。このようにして、尿1mlあたりのCFU量を得ます。.

解釈

10万CFU / mlを超えるインディカ尿路感染症

1000 CFU / ml以下を数える - 感染なし

1000〜10,000 CFU / mlのカウント - 疑わしい、汚染の可能性がある、サンプル採取を繰り返す.

識別

CLED寒天培地上で生育したコロニーはグラムにするべきであり、微生物の形態特異的特性に応じて特定の継代培養が行われる.

例えば、それがグラム陰性桿菌である場合、それはラクトースの発酵の有無を裏付ける、マッコンキー寒天培地上に播種されるであろう。さらに、オキシダーゼテストを実行するために栄養価の高い寒天が付属しています.

グラムがグラム陽性球菌を明らかにした場合、それは塩味のマンニトール寒天培地および栄養寒天培地で継代培養することができる。後者では、カタラーゼ試験が実施される。最後に、酵母が観察された場合は、サブロー寒天培地に播種されます。.

多くの研究所はCLED培地の使用を不要とし、尿サンプルをまくために血液寒天培地、MacConkeyおよび栄養寒天培地のみを使用することを好む.

準備

1リットルの蒸留水の入ったバイアルに、36.2グラムの粉末CLED寒天を溶かします。 5分の休憩の後、1分間沸騰するまで絶えず混合しながら、再懸濁寒天を温めます.

その後、121℃で15分間オートクレーブで滅菌します。時間が終了したら、それをオートクレーブから取り出し、４５℃の温度に達するまで冷却させる。その後、各滅菌ペトリ皿に15〜20 mlの間で役立った.

プレートを提供するための手順は、汚染を避けるために層流フード内またはブンゼンバーナーの前で実行する必要があります.

供給されたプレートを固化させ、反転させたプレートホルダーに注文して入れ、使用するまで冷蔵庫（２〜８℃）に保存する。.

調製培地の最終ｐＨは７．３±０．２であるべきである。.

参考文献

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