寒天EMBの基礎、調製および使用



の EMB寒天培地 は、腸内細菌科、主に腸内細菌科のグラム陰性桿菌、およびその他の非要求性グラム陰性桿菌の単離に使用される選択的かつ異なる固体培地です。頭字語EAMとしても知られています、これはエオシン - メチレンブルーを意味します.

この培地は、1916年にHolt-Harris and Teagueによって作成されました。ペプトン、ラクトース、スクロース、リン酸二カリウム、寒天、エオシン、メチレンブルー、水が含まれています。特に、Levineで修飾されたEMB寒天培地を使用する場合は、MacConkey寒天培地と非常によく似ています。.

実際、生化学的には異なりますが、それぞれの検査室は同じ機能を果たしているので、どちらを使用するかを決定します。.

それは、プロテウス属による大量生産の点で、古典的なマッコンキー寒天培地と同じ欠点さえも提示する。したがって、この現象を回避するために、寒天の濃度を最大5％まで上げることができます。.

索引

  • 1財団
    • 1.1選択的
    • 1.2差動
  • 2準備
  • 3つの用途
  • 4品質管理
  • 5最後の検討事項
  • 6参考文献

財団

選択的

EMB寒天培地は、阻害剤として作用するアニリン染料（エオシンとメチレンブルー）を含み、ほとんどのグラム陽性菌と一部の要求の厳しいグラム陰性菌の増殖を防ぐため、微妙に選択的です。.

しかしながら、この寒天はグラム陽性菌の中には阻害物質の存在に抵抗し、小さな無色の点状のコロニー、例えば エンテロコッカス・フェカリス そしていくつか ブドウ球菌.

次のような特定の酵母を栽培することもできます。 カンジダアルビカンスコンプレックス, それは非常に小さなピンク色のコロニーを与えるでしょう。サンプルが深さで播かれるならば、クラミド胞子でさえこの酵母から発生することができます.

差動

他方、ＥＭＢ寒天はまた、これらの染料（エオシンおよびメチレンブルー）が一緒になって酸性ｐＨで沈殿物を形成するという性質を有するので示差培地でもあり、したがってそれらはそれらの生産の指標として役立つ。.

したがって、弱発酵のラクトースまたはスクロース細菌は、24〜48時間で紫色のコロニーを形成します。例えば、クレブシエラ属、エンテロバクター属、セラチア属.

以下のような、ラクトースを強く発酵させる細菌 大腸菌, として、またはスクロース エルシニア・エンテロコリチカ ○ プロテウスペネリ, 緑がかった黒い沈殿物を形成し、これらの種に特徴的な金属光沢を与える.

EMB levine mediumを使用する場合（スクロースなし）, エルシニア・エンテロコリチカ そして プロテウスペネリ 彼らは透明なコロニーを作ります.

ラクトースまたはスクロースを発酵させない細菌は、ペプトンの存在によって栄養を与えられます。ペプトンは細菌の発生に必要なアミノ酸と窒素を供給し、透明なコロニーを作ります。例えば、サルモネラ属や赤痢菌属など.

同様に、アシネトバクター属はラクトースの発酵槽でもスクロースでもないにもかかわらずラベンダーブルーのコロニーを提示することができるが、それらはその細胞壁にメチレンブルーを固定するという性質を有することに注目することは重要である。これは他の酸化細菌でも起こり得る.

準備

元の脱水媒体はライトベージュです.

この培地を調製するために、３６グラムの脱水培地を秤量し、１リットルの蒸留水を含むバイアルに懸濁するべきである。.

混合物を５分間静置した後、それを沸騰させそしてそれが完全に溶解するまで激しくそして絶えず混合しながら、熱源にフィオラを持って来る。.

続いて、溶解した培地をオートクレーブを用いて121℃で15分間滅菌しなければならない。.

時間の終わりに、それはオートクレーブから取除かれ、そしてしばらく休むために放置される。その後、各滅菌ペトリ皿に15〜20 mlの寒天を入れて（45〜50℃）温めてください。媒体は青いリトマスでなければなりません.

供給後、寒天が少し冷えるまでプレートを少し覆いをしないままにする。それからそれらは覆われ完全に固まるのを許される。その後、それらは逆プラークホルダーに注文され、使用されるまで冷蔵庫（8℃）に保存されます。.

この手順は、層流フード内またはブンゼンバーナーの前で汚染を避けるために行われるのが好ましい。.

各商業家は、培地を調製するために秤量する量を示すことに留意することが重要です。.

培地の最終pHは7.2±0.2であるべきです

用途

この培地は、特にこの培地中で非常によく増殖する腸内細菌科に属する桿菌のような、要求のないグラム陰性桿菌の存在が疑われる場合に、尿および糞便またはあらゆる種類の臨床試料を播種するために使用される。.

Shigella属およびSalmonella属の腸内病原性細菌は、それらの無色またはわずかに琥珀色のコロニーによって区別される.

とりわけ、アエロモナス、シュードモナス、アシネトバクターなどの他の非発酵ラクトース桿菌も増殖する。.

同様に、この培地は、大腸菌群の決定の完全な確認段階に理想的であるため、すなわち食物と水の微生物学的分析に非常に有用です。 大腸菌 最も可能性の高い数のテクニック（NMP）から、濁ったECブロスから.

品質管理

新しく培養した培地がうまく機能することを確認するために、コロニーの特徴を観察し、それらが期待通りに与えることを確認するために対照株を植えることができる。.

このために、ATCC株またはよく同定されている株 大腸菌, Enterobacter aerogenes, クレブシエラsp, ネズミチフス菌, シゲラフレックスネリ, 緑膿菌 そしていくつかのグラム陽性菌、 黄色ブドウ球菌.

それが期待されている 大腸菌 緑色の金属光沢を持つ、よく発達した青みがかった黒色のコロニーを生成します。限り, Enterobacter aerogenes そして クレブシエラsp 彼らはよく発達した粘液コロニーを青みがかった黒にしなければ.

その部分について, サルモネラ菌 Typhimurium そして シゲラフレックスネリ, 無色またはわずかに琥珀色の大きなコロニーを形成しなければならない.

ついにジャンル 緑膿菌 それは不規則な大きさの無色のコロニーとして成長しますが、グラム陽性菌は完全に抑制されるか、非常に小さなコロニーでは控えめに成長するはずです。.

最終検討事項

時々、滅菌によってメチレンブルーが減少し、オレンジ色の培地が観察されます。メチレンブルーが酸化して紫色が回復するには、色が回復するまで穏やかに混ぜ合わせる必要があります。.

また、滅菌後に染料が沈殿する可能性があるので、ペトリ皿に仕える前によく混ぜる必要があります。.

参考文献

  1. Camacho A、Giles M、OrtegónA、Palao M、Serrano BおよびVelázquezO.2009。食品の微生物学的分析のための技術。第2版UNAMケミカル学部メキシコ.
  2. カランザC、レオンR、ファルコンN、ノイマンA、クロムC。 大腸菌 ペルーの養鶏場からのチキンブロイラーの潜在的病原性分離株牧師調査。獣医Ｐｅｒｕ ２０１２ ２３（２）：２０９−２１９。 scielo.orgから入手できます。.
  3. ラボラトリーズコンダ社エオシン寒天とメチレンブルー。 2010.から入手可能：condalab.com
  4. 研究所ブリタニア。 Levine E.M.B（エオシンとメチレンブルーを含む）2011.入手可能：britanialab.com
  5. BDラボラトリーズＢＤ ＥＭＢ寒天培地（エオシンメチレンブルー寒天培地）、改良型。 2013年に入手可能：bd.com
  6. Koneman E、Allen S、Janda W、Schreckenberger P、Winn W（2004）。微生物学的診断（第5版）。アルゼンチン、編集Panamericana S.A..
  7. Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.2009。Bailey＆Scottの微生物学的診断。 12編アルゼンチンパナメリカーナS.A