寒天遠藤の基礎、調製および使用



の 遠藤寒天 または培地Endoは、ある程度の選択性を有する固体の示差培養培地です。元の製法は乳糖発酵性細菌と非発酵性細菌を区別するために1904年に遠藤によって作成されました。初めはそれはの分離のために設計されました サルモネラ菌, しかし後にメディアの目的は大腸菌群の検索に向いた.

遠藤寒天の原理は維持されていますが、その配合は長年にわたって無数の変化を遂げてきました。現在、培地はペプチドで消化された動物組織、ラクトース、リン酸水素二カリウム、亜硫酸ナトリウム、塩基性フクシンおよび寒天で構成されています。.

この培地の主な用途は、腸内細菌科に属するグラム陰性桿菌および近隣の他の科に属するグラム陰性桿菌の単離および識別に関連している。.

長い間、それは水、乳製品および食品サンプル中の大腸菌群の検出に使用されていたが、今日ではこの媒体の使用は他の同様の機能によって置き換えられてきた。しかしながら、いくつかの微生物学研究所は臨床起源のサンプルから腸内細菌科の単離のためにこの寒天を使用する.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1遠藤寒天
    • 2.2寒天m-Endoの変種
  • 3使用
  • 4品質管理
  • 5制限
  • 6参考文献

財団

Endo agarには、必須ではない微生物の増殖に必要なアミノ酸、窒素、炭素、エネルギーの供給源となるペプトンが含まれています.

他方、寒天のわずかに選択的な特徴は亜硫酸ナトリウムと塩基性フクシンの添加によって提供される。両方の成分が部分的または全体的にほとんどのグラム陽性菌の発育を阻害します.

異なる特徴は、この場合はラクトースおよび塩基性フクシンである発酵性炭水化物の存在によって与えられ、これはpHの指標としても役立つ。.

この寒天上で成長し、ラクトースを発酵させることができるグラム陰性菌は、強いピンク色のコロニーを形成します。の病原性 大腸菌 緑色の金属光沢がある虹色の暗赤色のコロニーの形成。これは炭水化物の発酵からの酸の高生産のためです.

コロニー周辺の培地も濃いピンク色に変わることに注意してください。ラクトースを含まない、発酵していないグラム陰性桿菌は、中程度または無色に似た薄いピンク色のコロニーを形成.

リン酸水素二カリウムは培地のpHのバランスをとり、寒天は固体の粘稠度を提供する成分です。.

準備

遠藤寒天

脱水媒体41.5グラムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。媒体が完全に溶解するまで頻繁に撹拌して混合物を加熱する。オートクレーブで121℃、15ポンドの圧力で15分間滅菌する。.

オートクレーブから取り出すときは、約45〜50℃の温度に冷却し、混合する前に混合物を振ってホモジナイズします。滅菌ペトリ皿に20mlを注ぐ.

プレートを固化させ、反転させて箱に入れるか、または暗い紙で包んでから冷蔵庫に入れます。直接光から準備された媒体を保護することは非常に重要です。推奨される方法は、必要となる正確な量を準備することです。.

冷蔵庫に保管されている場合は、使用前にプレートを焼き戻す必要があります。.

培地のpHは7.2から7.6の間でなければならず、調製された培地の色は薄いピンク色です。.

バリアント寒天m-Endo

McCarthy、Delaney、Grassoの処方に従ったEndo agar（m-Endo）のもう1つのバージョンがあります。.

この変異種は含まれています：ラクトース、トリプトース、カゼインの酵素消化、動物組織の酵素消化、塩化ナトリウム、二塩基性リン酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、酵母エキス、リン酸一カリウム、塩基性フクシン、デオキシコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウムと寒天.

この場合、51 gの脱水媒体を秤量し、20 mlのエタノールを含む1リットルの蒸留水に懸濁します。.

媒体が完全に溶解するまで撹拌しながらわずかに加熱する。過熱したり、オートクレーブで滅菌したりしないでください。混合物が均質になったら、滅菌ペトリ皿に入れて固化させる。.

使用する

いくつかの国では、それはまだ水や食品サンプル中の総および糞便性大腸菌群の計数に使用されています。 大腸菌 糞便汚染の主な指標として.

M-Endo寒天培地は、消毒および排水処理プログラムのモニタリングおよび管理、ならびに飲料水の水質の評価において、米国公衆衛生協会（APHA）によって推奨されています。.

最も使用されている方法は、サンプルをラウリル硫酸ブロスで2〜4時間濃縮した後の膜ろ過です。.

それはまた最も確からしい数の技術（NMP）による食糧および水の微生物学的分析において、特に寒天の存在を確証するための完全な確認段階において、EMB寒天培地の代わりとして使用することができます。 大腸菌 濁ったECブロスから.

品質管理

調製した遠藤寒天バッチの品質を評価するために、既知のまたは認証された対照株を播種する。.

この目的のために使用することができる株の中には、次のとおりです。 大腸菌 ATCC 25922, 大腸菌 ATCC 11775, Enterobacter cloacae ATCC 13047, 肺炎桿菌 ATCC 13883, ネズミチフス菌 ATCC 14028, シゲラフレックスネリ ATCC 12022, プロテウスミラビリス ATCC 14153と エンテロコッカス・フェカリス ATCC 11700.

菌株を枯渇により播種し、好気性生菌中で３７℃で２４時間インキュベートする。.

期待される結果は以下のとおりです。

  • に 大腸菌： 金属の輝きを持つ強い赤のコロニー.
  • に E.クロアカエ そして 肺炎桿菌 コロニーはピンクムコイドであるべきです.
  • Sの場合. ネズミチフス菌、S. flexneriおよびP. mirabilis コロニーは通常薄いピンク色または無色です。.
  • 最後に, E.フェカリス それは部分的に阻害されると予想され、それ故にその成長は強いピンク色の非常に小さなコロニーでは貧弱であるべき.

制限事項

-Endo培地は選択力が低いため、Staphylococcus、Enterococcus、さらには酵母などのグラム陽性微生物も増殖する可能性があります。.

-腸内細菌科に属さない他の桿菌は、例えば以下のようにこの培地中で発育することができる。 シュードモナスsp そして アエロモナスsp. これらの株の特徴は無色の不規則なコロニーです.

-この培地は光に非常に敏感であるため、これに長時間さらされるとインジケータシステムが劣化し、不可逆的に培地にダメージを与えます。.

-培地の成分は発がん性があると考えられているため、直接の接触は避けてください.

-脱水媒体は非常に吸湿性であり、元の容器に入れて室温で密閉し乾燥した環境に保たれるべきです。.

参考文献

  1. BDラボラトリーズ遠藤寒天。 2013年に入手可能：bd.com
  2. ネオゲン研究所M遠藤寒天。 Foodafety.neogen.comで入手可能です。
  3. 「寒天遠藤」 ウィキペディア、フリー百科事典. 2017年9月7日、08：27 UTC。 2019年2月28日22時55分。利用可能な場所：en.wikipedia.
  4. メルク研究所遠藤寒天2019年から入手可能：merckmillipore.com
  5. ラボラトリーズテクニカルシート。 M - 寒天LESを終了します。 2015年から入手可能：liofilchem.net