寒天ヘクトーンの基礎、調製および使用



の ヘクトーン寒天 または腸溶性ヘクテン寒天培地は、固体の、選択的かつ異なる培地です。それは、Shigella属およびSalmonella属の腸内病原性細菌を単離するために、KingおよびMetzgerによってHektoen Instituteで作成された。.

培地は、プロテオースペプトン、酵母エキス、胆汁酸塩、ラクトース、スクロース、サリシン、チオ硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸鉄、クエン酸アンモニウム、ブロモチモールブルー、アシッドフクシンおよび寒天からなる。この製剤は、シゲラ属とサルモネラ属をこの培地で増殖することができる残りの細菌と区別することを可能にする。.

Hektoen寒天培地と同じ機能を持つ他の手段がありますが、これは特にShigella種を回収したいときに他の手段と比較してより大きな利点を示します。.

両方の属の種は、汚染された食物の消費のためにヒトにおいて深刻な胃腸の問題を引き起こします。したがって、伝染は糞便です。ヘクトーン寒天培地の使用が主に便や食品サンプルの微生物学的分析に示されるのはそのためです。.

索引

  • 1財団
  • 2準備
  • 3使用
  • 4品質管理
  • 5制限
  • 6参考文献

財団

Hektoen寒天は、栄養源としてペプトンと酵母エキスを含み、微生物開発に不可欠な要素を提供します。.

しかしながら、それはまた、いくつかの細菌、特にグラム陽性菌およびいくつかのグラム陰性菌の増殖を阻害することによって作用する胆汁酸塩も有する。それが選択的媒体と考えられるのはこの理由のためである.

一方、ヘクトーン寒天培地はディファレンシャル培地です。この性質は、ブロモチモールブルーおよび酸性フクシンによって代表されるｐＨ指示薬系と共に、ラクトース、サッカララおよびサリシンなどの発酵性炭水化物の存在によって与えられる。.

サルモネラ属およびシゲラ属に属さない、この培地中で増殖することができる全ての細菌は、プロテウス属を除いて、サーモンまたはオレンジ色のコロニーを発生する。これは、存在する1つまたは複数の炭水化物が発酵して培地が酸性になり、pHインジケーターが変化するためです。.

その部分については、シゲラ属とサルモネラ属は、環境をアルカリ化し、それゆえそのコロニーが青緑色であるエネルギー源としてペプトナのみを使用して、存在する炭水化物のいずれにも発酵することができない。.

また、この培地中には硫化水素（無色の気体）を形成することができる区別される細菌があり得る。チオ硫酸ナトリウムは硫黄源として作用し、クエン酸鉄は顕在化剤です。両化合物は硫化鉄の黒色沈殿物の形成を可能にし、それは反応を証明する。.

コロニーの中心の黒い沈殿物とその周囲の透明なハローは魚眼の外観を与えます。この特徴は、サルモネラ属の存在を示唆している.

最後に、塩化ナトリウムは浸透圧バランスを維持し、寒天は培地に固体の粘稠度を与える。.

準備

７６ｇの脱水媒体を秤量し、１リットルの蒸留水に溶解する。混合物を激しく振とうした後、10〜15分間静置します。それは加熱して煮沸することができ、完全に溶解するまで回転運動を与える。この培地はオートクレーブ処理されていません.

培地が約45℃の温度に達したら、20mlの容量を滅菌ペトリ皿に直接注ぐ。.

寒天を固化させる。その時点で彼らは使用の準備ができています。すぐに使用することをお勧めします。不可能な場合は、使用するまで冷蔵庫に保管してください。.

プレートを植える前に、プレートを冷蔵庫から早く取り出して室温に戻します。.

培地のpHは7.5±0.2でなければなりません。脱水された媒体の色は紫色で、準備は茶色がかった緑色です。.

使用する

Hektoen寒天培地の使用は、糞便および食品サンプル中のShigella属およびSalmonella属の細菌の検索に推奨されます。.

試料が、亜セレン酸ブロス、亜セレン酸シスチンブロス、テトラチオネートブロスなどの特別なブロスで予め濃縮されている場合、これらの細菌を単離する可能性は非常に高まる。.

接種材料は強くなければならず、播種は条縞によって行われる。プレートをエアロビオシス中で３７℃で２４〜４８時間インキュベートする。.

コロニーの特性は、現時点でのそれらの解釈と区別のためにより明確であるため、インキュベーションは48時間推奨されています.

品質管理

この培地の品質管理を実施するために、以下のような公認の細菌株が使用されます。 ネズミチフス菌 ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, シゲラフレックスネリ ATCC 12022および 赤痢菌 ATCC 25931.

予想される結果は次のとおりです。 ネズミチフス菌と  Salmonella enteritidis 彼らは黒い中心の有無にかかわらず青緑色のコロニーを形成しなければならない。赤痢菌の種は青緑色のコロニーとして成長しますが.

の株も含めることができます 大腸菌 ATCC 29212, プロテウスミラビリス, 肺炎桿菌 ATCC 700603, エンテロコッカス・フェカリス ATCC 29212と 黄色ブドウ球菌 ATCC 25923.

これらの場合、観察された特性は次のとおりです。 大腸菌 そして 肺炎桿菌 この培地では、彼らは彼らの周りに同じ色の沈殿物で、サケからオレンジ色のコロニーを発達させるでしょう。その間、Proteusは黒い中心の有無にかかわらず青緑色のコロニーを開発する.

しながら 黄色ブドウ球菌 そして  E.フェカリス 時々、禁止されるべきです E.フェカリス 黄色のコロニーとして成長し、非常に小さい.

一方、この培地はオートクレーブで滅菌されていないため、培地の無菌性を評価することが重要です。したがって、調製された各バッチは、エアロビオシス中で24時間、37℃で接種することなく、1〜2枚のプレートでインキュベートされるべきです。.

明らかにそれはプレート上にいかなる種類の成長もないことが予想される.

制限事項

-プロテウス種はこの環境で発生する可能性があり、それらのコロニーの特徴はサルモネラ属または赤痢菌種と混同される可能性があります。このため、生化学検査で疑わしいコロニーを確認する必要があります。.

-目的の微生物が低濃度で見つかった場合、この培地では発生しない可能性があるため、この培地の使用には他の選択性の低い寒天培地を併用する必要があります。.

-過度の熱は培地の組成を変えるので、その調製中に過熱しないでください。.

-異常にラクトース発酵性のサルモネラ菌コロニーは気付かれないように見えるかもしれません.

参考文献

  1. ウィキペディアの貢献者。 Hektoen腸寒天培地。ウィキペディア、フリー百科事典。 2019年3月13日、23：38 UTC。利用可能な場所：.wikipedia.org / 2019年3月16日アクセス.
  2. BDラボラトリーズBD Hektoen Enteric Agar（HE寒天）。 2013年に入手可能：bd.com
  3. 研究所ブリタニア。 Hektoen Enteric Agar 2015年に入手可能：britanialab.com
  4. ディフコフランシスコソリアメルギゾラボラトリーズ。寒天ヘクトーン寒天。 f-soria.esで入手可能
  5. Difco＆BBLマニュアル、Hektoen Enteric Agar。第2版利用可能な場所：bd.com/europe