マッコンキー寒天の基礎、調製および使用



の マッコンキー寒天 グラム陰性桿菌の独占的な分離を可能にするのは固体培地です。この理由のためにそれは選択培地でありそしてそれを示差培地とするラクトースの発酵および非発酵細菌の間の区別も可能にする。それは微生物学研究室で最も広く使われている培地の一つです。.

この培地は、主に家族に属するグラム陰性桿菌の分離に使用されます。 腸内細菌科, 日和見的および腸病原性種を含む.

それはまた胃腸管に住むが、に属していない他の腸内桿菌を分離するのに使用することができます 腸内細菌科, のように アエロモナス属、プレシオモナス属, とりわけ.

最後に、それは環境、水または土壌に見られるが、時には日和見病原菌などのグラム陰性非発酵グルコース桿菌を単離することができる。 シュードモナスsp, アシネトバクター属、アルカリ属、クロモバクテリウム・ビオラセアム、Stenotrophomonas maltophilia, とりわけ.

索引

  • 1財団
    • 1.1 MacConkeyの寒天
  • 2準備
  • 従来のMacConkey寒天の3つの用途
  • 4 MacConkey寒天の他の亜種
    • 4.1ソルビトールを含むMacConkey寒天
    • 4.2クリスタルバイオレットまたは塩を含まないMacConkey寒天
    • 4.3マッコンキー寒天とセフォペラゾン
    • 4.4 10％の海水で調製されたMacConkey寒天v / v
  • 5参考文献

財団

マッコンキー寒天

それぞれがそれの特性を決定する目的を持っているので、この媒体の基礎はその構成要素の記述を通して説明することができます.

胆汁酸塩とバイオレットクリスタル

この意味で、マッコンキー寒天は複雑な組成をしています。まず第一に、それは胆汁酸塩と紫色の結晶を含みます.

これらの要素は、グラム陽性菌および一部の要求の厳しいグラム陰性菌の増殖を抑制することを担います。それは今度はこれらの物質によって影響されないグラム陰性桿菌の開発に有利に働きます。それが選択的媒体である理由です.

それはまたグラム陽性菌そしてまたほとんどのグラム陰性菌の成長を抑制する他の媒体と比較してわずかに選択的であると言われています.

それはのためのTCBS寒天のような特定の属のために非常に選択的です コレラ菌 および他の類似の好塩性および好アルカリ性種.

ペプトン、ポリペクトンおよびラクトース

ペプトン、ポリペクトン、ラクトースなど、この培地で発生する微生物に必要な栄養素を提供する物質が含まれています.

ラクトースを発酵させる能力を持つ微生物は強いピンク色のコロニーを形成するため、ラクトースは培地をディファレンシャル培地にするための重要なポイントです。.

一部の細菌は、乳糖をゆっくりまたは弱く発酵させ、淡いピンク色のコロニーを形成し、陽性乳糖を維持します。.

ラクトースを発酵させないものはエネルギー源としてペプトンを使用し、アンモニアを生成し、培地をアルカリ化します。したがって、由来するコロニーは無色または透明です。.

PHインジケーター

色の変化は、マッコンキー寒天を含む別の必須化合物を通して達成されます。この化合物はpH指示薬で、この場合はニュートラルレッドです。.

ラクトースの発酵は混酸の生産を生み出します。それらは6.8未満のpHで培地を酸性化する。.

これにより、pHインジケーターは濃いピンク色の色相に変わります。色の濃さは、最終的なpHによって異なります。.

蒸留水、塩化ナトリウム、寒天

他方、それは媒体に水和および浸透平衡を与える蒸留水および塩化ナトリウムを含む。最後に、培地は寒天を含み、それは固体培地のコンシステンシーを提供する基礎である。.

調製したマッコンキー寒天培地は、最終ｐＨが７．１±０．２に調整されていなければならない。.

準備

１リットルのマッコンキー寒天培地については、５０ｇの脱水培地を秤量し、次いでフィラに入れ、１リットルの蒸留水に溶解する。 10分の休息の後、それは1分間沸騰するまで絶えず混合することによって加熱されます.

その後、フィオラをオートクレーブに入れ、121℃で20分間殺菌します。時間の終わりに、それをオートクレーブから取り出しそして４５℃の温度に冷却させ、次に層流フードの内側またはブンゼンバーナーの前の滅菌ペトリ皿に入れる。.

固化させて、プレートホルダーに入れて反転させ、使用するまで2〜8℃で冷蔵保存する。.

プロテウス属によってもたらされる膨張効果を抑制するマッコンキー寒天培地を得るために、低塩マッコンキー寒天培地が使用される。.

従来のマッコンキー寒天の使用

マッコンキー寒天培地は、実験室で受け取った臨床サンプルの播種用に準備されたすべてのセットの培地に含まれています。食品微生物学や環境微生物学にも有用です。.

この培地で成長する様々なグラム陰性桿菌は、問題の種の推定上の診断を助ける表現型の特徴を表しています。例えば、コロニーの大きさ、色、粘稠度、匂いなどが特徴のひとつです。.

この環境では、 大腸菌, クレブシエラsp そして Enterobacter sp 沈殿した胆汁の領域に囲まれた強いピンク色のコロニーを作り出す.

バクテリアは Citrobacter sp、Providencia sp、Serratia spおよびHafnia sp 24時間後には色なしで表示されるか、24〜48時間後に淡いピンク色に表示されることがあります。.

同様に、プロテウス属、エドワジエラ属、サルモネラ属およびシゲラ属は無色または透明のコロニーを生成する。.

MacConkey寒天の他の亜種

特定の目的を持つMacConkey寒天の他の変種があります。次にそれらが言及されています：

ソルビトールを含むMacConkey寒天

この培地は腸管病原性株（大腸菌 腸管出血性O157：H7）の残りの株 大腸菌.

この培地は、ソルビトールの炭水化物ラクトースを変えます。の株 大腸菌 腸管出血性O157：H7は、ソルビトールを発酵させないため透明なコロニーが得られるという点で他と異なりますが、他の株は 大腸菌 それらがソルビトールを発酵させそしてコロニーが強いピンクであるならば.

クリスタルバイオレットまたは塩を含まないMacConkey寒天

それはクリスタルバイオレットを持っていないので、この寒天は古典的なMacConkey寒天とは大きく異なります、グラム陽性菌は成長することができます.

他方、塩が存在しないと、ある種の腸内細菌によって産生される寒天上での群れの出現が阻害される。 プロテウス, したがって、グラム陽性菌を含む、存在するすべての菌の単離を容易にします。.

セフォペラゾンを含むMacConkey寒天

MacConkey寒天のこの変種は最初に単離するように設計されました ラリバクターホンコンジェンシス そして後で彼らはそれがの分離のために有用であることに気づいた Arcobacter butzleri Aどちらもセフォペラゾンに耐性のあるわずかに湾曲したネガティブグラム桿菌です。.

これらの細菌は、最近、2つの強力な新興病原体として浮上している、アジア人およびヨーロッパ人において獲得された胃腸炎および下痢の原因として関連している。.

抗生物質は胃腸管の細菌叢の付随する細菌叢を抑制することを可能にし、それらは成長するのに72時間を必要とするので、それらが見過ごされるのを防ぎます。.

MacConkey Agarは10％海水v / vで調製

この亜種は、レクリエーション用の塩水（ビーチや湾）の大腸菌群や大腸菌群を含む、糞便汚染の細菌健康指標の評価に役立ちます。.

Cortezら2013は、このようにして調製した培地は、蒸留水を用いて調製したMacConkey寒天の使用と比較して、塩水環境におけるこれらの微生物の回収率を有意に増加させることを示した。.

これは、改変培地が、生理学的に休眠状態にある「生存可能だが培養可能ではない」細菌の増殖を刺激するため、従来の培地では回収できないためである。.

参考文献

  1. ラウSK、ウーPC、ホイWT、等。の選択的分離のためのセフォペラゾンマッコンキー寒天培地の使用 ラリバクターホンコンジェンシス. J Clin Microbiol. 2003年41（10）：4839-41.
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  6. GarcíaP、Paredes F、Fernándezdel Barrio M.（1994）。臨床臨床微生物学カディス大学、第2版。 UCA出版物サービス.