大豆寒天トリプチカーゼの基礎、調製および使用



の トリプチカゼイン大豆寒天 またはトリプチケースソイ寒天培地は、固体の非選択的かつ栄養価の高い培地です。これは、英語のトリプチケース・ソイ寒天の頭字語でTSAという文字で表されています。それはトリピン、大豆ペプトン、塩化ナトリウムおよび寒天から成っています.

その高い栄養力のために、それは適度に要求と非要求の微生物の栽培に理想的です。追加のサプリメントを含まない培地は初代培養にはお勧めできませんが、純菌株を継代培養し、それらを生存可能な状態に保つために非常に役立ちます。.

また、特に寒天の診断に必要な溶血のパターンを観察し、オプトキンとバシトラシンの分類群をマウントする必要がある場合、この寒天は血液寒天などの濃縮培地の調製の基礎として機能します。 肺炎球菌 そして 化膿連鎖球菌 それぞれ.

他方、抗生物質と組み合わせると、混合フローラを有する試料から臨床的に重要な通性的かつ厳密な嫌気性微生物を単離するのに有用である。.

最後に、トリプチカゼイン大豆寒天の組成とその性能は、さまざまな薬局方（ヨーロッパ、日本、北米）によって確立された要件を満たしています。.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1トリプチカゼイン大豆寒天プレート
    • 2.2血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート
    • 2.3加熱血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート
    • 2.4トリプチカゼイン大豆寒天のくさび
  • 3つの用途
  • 4シード
  • 5品質管理
    • 5.1無菌管理
    • 5.2成長管理
    • ５．３血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天培地の増殖制御および溶血パターン
  • 6参考文献

財団

細菌の適切な発達のためには、アミノ酸、ビタミン、プリン塩基、ピリミジン酸などのエネルギー寄与の存在が必要です。.

この意味で、トリプテンと大豆ペプトンはこれらの栄養素を微生物に供給し、それによってそれらの完全な発達を可能にします。しかし、要求の厳しい細菌のためには、その濃縮度を高めるために、この寒天に脱繊維血または加熱血を補給する必要があります。.

一方、抗生物質が培地に添加されると、それは選択培地になる。シスチンテルライトを加えながら、リステリア属の種の単離を促進するために0.6％酵母エキスを加えることもできます。 そして 子羊の血液は理想的です コリネバクテリウム・ジフテリア.

最後に、塩化ナトリウムは培地に浸透圧バランスを与え、寒天は固体のコンシステンシーを与える。.

準備

トリプチカゼイン寒天プレート

トリプチカゼイン大豆寒天を調製するために、40グラムの脱水された市販の培地をデジタルスケールで秤量する必要があります。フィオラに含まれる蒸留水1リットルに溶けます.

混合物を５分間放置し、次に媒体の溶解を助けるために熱源に持って行く。それは頻繁にかき混ぜられ、1または2分間煮沸するために放置されるべきです。続いて、培地をオートクレーブ内で１２１℃で１５分間滅菌する。.

50℃に冷却し、滅菌ペトリ皿に分配する。固め、ひっくり返し、プラークに並べ、冷蔵庫に保管しましょう.

培地の最終pHは7.3±0.2であるべきです.

脱水培地の色は薄いベージュ色で、乾燥した場所で10〜35℃に保存する必要があることを考慮に入れる必要があります。.

その部分のために、準備された寒天は薄琥珀色です。調製したプレートは使用するまで冷蔵庫（2〜8℃）に保存してください.

プレートは使用前に室温に達している必要があります.

血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート

血液寒天は、トリプチカゼイン大豆寒天を５０℃に冷却する際に５％の脱繊維化血液を添加することによって調製される。混合物を穏やかな動きで回転させることによって均質化する。.

滅菌ペトリ皿に入れてください。媒体の色はチェリーレッドであるべきです.

加熱血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート

ＴＳＡベースの血液寒天を調製するために、上記の手順は同じであるが、オートクレーブを出るとき、それは培地の温度が約５６〜７０℃の間になるまで放置される。その時に血液が入れられ、培地が茶色に変わるまで混合される.

滅菌ペトリ皿に入れる。媒体の色はチョコレートブラウンです.

トリプチカゼイン大豆寒天のくさび

寒天を調製するための手順は、ペトリ皿に培地を供給する代わりに、滅菌する前にベークライト蓋をしたチューブに10〜12 mlの間で分配されることを除いて、プレートについて記載したものと同じである.

続いて、チューブを121℃で15分間オートクレーブにかける。去るとき、彼らはサポートの助けを借りて傾いて、彼ら自身が固まるのを許します.

準備されたくさびは表面によって播種され、決められた時間の間、特定の要求の厳しい生存微生物を維持するのに役立ちます.

用途

次のような場合に、トリプチカゼイン大豆寒天が使用されます。

-ほとんどの研究室で日常的に使用されている古典的な血液寒天培地を調製するためのベースとして.

-要求の厳しい細菌の分離.

-溶血パターンの観察.

-診断テストの実行.

-特別な血液寒天培地用の基礎として コリネバクテリウム・ジフテリア, テルルシスチン そして 子羊の血.

-ラム血液寒天培地を調製するための基礎として、特に嫌気性菌の増殖のためのより多くのカナマイシン - バンコマイシン、 バクテロイデスsp.

-非要求株の維持のために（Bacterioteca）.

-水、環境、食品および化粧品サンプルの微生物限界研究における微生物好気性菌数.

播種

サンプルは、血液または他の添加物を補ったトリプチカゼイン大豆寒天の表面に直接播種することができます。枯れによって蒔かれる.

一方、添加物を含まないトリプチカゼイン大豆寒天プレートは、一般に微生物株（細菌または酵母）の継代培養に使用されます。.

品質管理

無菌管理

トリプチカゼイン大豆寒天を用いて調製した異なる培地の無菌性をチェックするために、以下を行うことを推奨する：調製した各バッチから、無菌性を実証するために接種なしで３７℃で２４時間プレートまたはチューブをインキュベートする。すべての場合において、それは成長なしに維持されなければなりません.

汚染が見つかった場合は、ロット全体を廃棄する必要があります。.

成長管理

トリプチカゼイン大豆寒天培地の適切な機能を研究するために、以下の細菌株を使用することができます： 大腸菌 ATCC 8739, 黄色ブドウ球菌 ATCC 6538, 緑膿菌 ATCC 9027と エンテロコッカス・フェカリス ATCC 29212.

菌株を播種し、好気中で37℃で24時間インキュベートする。.

すべての場合において、成長は十分でなければなりません.

キノコを複合体として使用することもできます。 カンジダ・アルビカンス ATCC 10231および アスペルギルスニガー ATCC16404。両株とも良好な成長が見込まれる.

血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天の増殖制御と溶血パターン

この塩基を用いて調製した血液寒天培地の適切な機能を確認するために、以下の株を使用することができる。 化膿連鎖球菌 ATCC 19615, 肺炎球菌 ATCC 6305と 肺炎球菌 ATCC 49619.

それらを播種し、37℃で微好気球菌中で24時間インキュベートする。.

すべての場合において、成長は満足のいくものでなければなりません。 化膿連鎖球菌 β溶血（コロニーの周囲のハローが明瞭）と 肺炎球菌 アルファ溶血（コロニー周囲の緑色がかったハロー）が観察されるはずです.

参考文献

  1. ウィキペディアの貢献者。トリプチカーゼ私は寒天です。ウィキペディア、フリー百科事典。 2018年12月17日15時47分UTC。 https://en.wikipedia.orgから入手できます。
  2. 研究所ブリタニア。トリテインソイ寒天。 2015年に入手可能：britanialab.com
  3. ネオゲン研究所大豆のトリプティク。 Foodafety.neogen.comで入手可能です。
  4. Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリー＆スコットの微生物学的診断12編アルゼンチンパナメリカーナS.A.
  5. BDラボラトリーズトリプチケース私は寒天です。 2014年に入手可能：.bd.com