ペプトンウォーターファンデーション、調製および使用



の ペプトナダ水 それは主に食品サンプルまたは他の材料用の希釈剤として使用される非選択的液体濃縮媒体です。これは化学的観点から非常に単純であることを意味し、肉のペプトン、塩化ナトリウムおよび水を含みます.

それはサンプルを豊かにすることを可能にする、一定の栄養価を有する。虐待を受けた細菌がある場合、この手段は生存能力を修復する力を持っています。それは、腸内細菌科に属する細菌の回収に特に有用である。.

サルモネラの回復の場合には、緩衝化ペプトナダ水変種の使用が推奨されます。これは試料の予備濃縮の手段として役立ち、この場合それはリン酸二ナトリウムおよびリン酸二カリウムのような他の元素を含む。.

通常、ペプトナダ水は中性のpHで調製されますが、分離する細菌はアルカリ性であるため、pHを8.5±0.2（アルカリ性）にする必要がある他の方法があります。 コレラ菌.

一方、この培地は炭水化物発酵試験の基本培地として使用できます。.

索引

  • 1財団
  • 2準備
    • 2.1住宅準備（非営利）
    • 2.2市販培地を用いた調製
    • 2.3発酵試験の準備
    • 2.4 peptonada waterの他の亜種
  • 3使用
    • 3.1便サンプル
    • 3.2食品サンプル
  • 4品質管理
  • 5制限
  • 6参考文献

財団

ペプトンは細菌の発育に必要な栄養素、特に窒素と短鎖アミノ酸を提供し、塩化ナトリウムは浸透圧バランスを維持します。.

さらに、この培地は、工業的プロセスによって損傷を受けた細菌細胞を分散させ、均質化しそして修復することを可能にする。.

希釈剤としては、生理的溶液（SSF）またはリン酸緩衝液（PBS）を効果的に置き換えることが理想的です。.

細菌の増殖は濁度を観察することで明らかになります.

準備

自家製調味料（非市販）

1 gのペプトンと8.5 gの塩化ナトリウムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。 pHは7.0に調整する必要があります。これには1 N塩化ナトリウムを使用できます.

市販培地を用いた調製

脱水媒体15グラムを量り、蒸留水1リットルに溶かします。混合物を均質化する。必要ならば、混合物を１分間煮沸して完全に溶解させる。必要に応じて100 mlバイアルまたは10 mlチューブに入れる。 121℃で15分間オートクレーブ.

冷やして使用するか、冷蔵庫で保管してください。培地の最終ｐＨは７．２±０．２である。.

脱水された媒体の色は薄いベージュ色で、準備された薄い琥珀色です。.

発酵試験の準備

前の準備に - 殺菌する前に - 炭水化物は1％の最終濃度に加えてAndrade指示薬（アシッドフクシン）またはフェノールレッド（0.018 g / L）を加えるべきです。ガスの形成を観察するためのダラムベルを管の上に置く.

その他のpeptonada waterの亜種

-ペプトン水緩衝または緩衝

それはカゼイン酵素加水分解物、塩化ナトリウム、リン酸二水素カリウムおよびリン酸水素ナトリウム十二水和物を含む。最終ｐＨは７．０±０．２である。.

その調製のために、２０ｇの脱水媒体を秤量し、そして１リットルの蒸留水に溶解する。約5分間放置してください。完全に溶解するまで1分間加熱する.

必要に応じて適切なボトルに注ぎます。オートクレーブを用いて121℃で15分間滅菌する.

-アルカリペプトン水

脱水媒体25 gを量り、1リットルの水に溶かす。上記のように進めてください。 pHは8.3から8.7の範囲です.

使用する

接種はサンプルを直接置くことによって行われます.

特に細菌が損傷している可能性があると疑われる場合は、サンプルの希釈に使用されます。通常希釈は1:10と1：100です.

35〜37℃のエアロビオシスで24時間インキュベートする.

便サンプル

サルモネラ菌を探す便試料の場合は、濃縮前の培地として緩衝液または緩衝水を使用することをお勧めします。.

これを行うには、以下の手順に従ってください。

便が形成されたら、サンプルを1 g取ります。液体の場合は、1 mlの便を取り、10 mlの緩衝ペプトン添加水でチューブに懸濁します。直腸スワブの場合は、スワブに含まれている物質を緩衝ペプトナート水でチューブに排出します。.

全ての場合において、サンプルを非常によく混合し均質化する。.

37℃で18〜24時間インキュベートする。その後、亜セレン酸シスチンブロスまたはテトラチオネートブロスなどの濃縮ブロス中で、３７℃で１８〜２４時間継代培養する。 SS寒天培地、XLD寒天培地、Hektoen寒天培地などのサルモネラ菌の選択培地で最後に培養する。.

食品サンプル

ペプトン水は、濃縮媒体または単純な希釈剤として使用されますが、サルモネラ種が求められる場合は、すでに説明したように、事前濃縮媒体として使用されます。.

食品では、次のように進めます。

固形食品の場合は25 gのサンプルを計量し、液体食品の場合は25 mlを計量する。前記部分を２２５ｍｌのペプトン化水を含むフラスコに入れる。サンプルを混合して均質化する.

微生物負荷が高い段階希釈であると疑われる場合、またはコロニー形成単位（CFU）のカウントを容易にするために小数を作成することができます.

希釈の数はサンプルの種類と分析経験によって異なります.

反対に、微生物負荷が非常に低いと疑われる場合は、希釈する必要はありません。その後、選択培地で継代培養する.

特に海産物、魚介類、魚などの食べ物の場合は、 コレラ菌 または他のビブリオ種、pH 8.5に調整されたペプトン水（アルカリペプトン水）を使用する必要があります.

品質管理

調製した各バッチから、1〜2本のチューブを接種なしで24時間、37℃のエアロビオシスでインキュベートする。時間の終わりに、濁りまたは色の変化は観察されるべきではありません.

また、よく知られている対照株を使用してその有効性を評価することができます。

このために、以下の細菌株を使用することができる。 大腸菌 ATCC 25922, 大腸菌 ATCC 8927, 黄色ブドウ球菌 ATCC 6538, 緑膿菌 ATCC 9027, ネズミチフス菌 ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

全ての場合において、満足のいく微生物発生が予想され、それは培地の濁度によって観察される。.

制限事項

-脱水された媒体は非常に吸湿性である、それでそれは湿気から保たれるべきです.

-何らかの劣化が見られる場合は、培地を使用しないでください。.

-脱水培地は10〜35℃で保存してください

-調製した培地は冷蔵保存（2〜8℃）してください.

参考文献

  1. Camacho A、Giles M、OrtegónA、Palao M、Serrano B、およびVelázquezO。食品の微生物分析のためのテクニック。 2009年、第2版。 UNAMケミカル学部メキシコUNAM 1の化学学部のマニュアルおよび文書の管理者向けバージョン（AMyD）。http://depa.fquim.unam.mxで入手可能
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  3. ネオゲン研究所ペプトン水。 Foodafety.neogen.comで入手可能です。
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