テトラチオネートブロスの基礎、調製および使用

の 四リン酸ブロス またはTTブロスは、サルモネラ菌株の濃縮および回収のための選択的液体培地です。それはMüellerによって作成され、後にKauffmannによって修正されました。.

元の培地は、プロテオースペプトン、炭酸カルシウムおよびチオ硫酸ナトリウムを含んでいた。カウフマンは胆汁酸塩を加えて、明るい緑色でもう一つの様式を作り出しました。これらの物質は大腸菌群の増殖を阻害し、病原菌、この場合はサルモネラ菌の発生のための遊離培地を残す.

それは培地の感度を有意に増加させたので、この改変は非常に成功した。したがって、現在のところ、あらゆる種類のサンプル、特に固形または液体の糞便および食品中のサルモネラ菌の検索に役立ちます。.

その準備は2つの段階から成ります。市販の培地はテトラチオネートブロスを調製するための塩基であり、続いて形成されるテトラチオネートのために、培地を完成するためにヨウ素化ヨウ素溶液が添加される。.

アメリカ公衆衛生協会（APHA）は、サルモネラ菌を検索する際のサンプル濃縮のために、鮮緑色を添加したテチオネートブロスの使用を推奨しています。.

一般的に、テトラチオネートブロスは、サルモネラ属の細菌が少量であると疑われる場合、または阻害物質への曝露によって、あるいはそれらの生存率を最小限に抑える工業プロセスによって乱用される場合に理想的です。.

索引

1財団
2準備
- 2.1 - テトラチオネート
- 鮮やかな緑色の2.2-バリアンテテトラチオネートスープ
3使用
4品質管理
5おすすめ
6参考文献

財団

本ペプトンは、カゼイン膵臓消化および動物組織の消化消化に対応する。これらは細菌の成長のために一般に炭素、窒素および栄養素の源を提供します.

その一部として、チオ硫酸ナトリウムはヨウ素化溶液と反応してテトラチオネートを形成する。これは大腸菌群の増殖を阻害し、酵素テトラチオネートレダクターゼを含有する細菌の開発を促進し、それらの中にはサルモネラ属だけでなくプロテウスも含まれる。.

胆汁酸塩は、ほとんどのグラム陽性菌および一部のグラム陰性菌（大腸菌群）の抑制物質としても作用します。.

炭酸カルシウムは、硫酸を形成するテトラチオネートの分解によって生成された有害物質を吸収します。この意味で、炭酸カルシウムは安定性培地のpHを維持しながら酸性度を中和する.

明るい緑色の様相の場合には、この物質はサルモネラ属以外の他の微生物を阻害することによりテトラチオネートブロスの選択能を増大させる。.

準備

-テトラブロスブロス

ヨウ素ヨウ素溶液

重さ：

ヨウ素6グラム.
ヨウ化カリウム5グラム.

ヨウ化カリウムを約５ｍｌの滅菌蒸留水に溶解し、次いで混合物を加熱しながらヨウ素を少しずつ添加する。それが完全に溶解した後、それが２０ｍｌの最終容量に達するまでそれを滅菌蒸留水で満たす。.

テトラチオネートブロス用ハーフベース

46グラムの脱水培地を量り、1リットルの滅菌蒸留水に懸濁する。完全に溶けるまで混合して加熱すると、ほんの数分で沸騰することがあります。オートクレーブで滅菌しないでください。培地の塩基を約４５℃に冷却させ、その時点で２０ｍｌのヨウ素化溶液を添加する。.

溶液ioduradaを培地に添加した後、直ちに使用するべきである。混合物全体を使用したくない場合は、以下の手順に従ってください。

１０ｍｌの基礎培地をチューブに分配し、そして０．２ｍｌのヨウ素化溶液のみをサンプルを接種するために添加する。.

使用されないものはまだ冷蔵庫に保存することができますが、培地は滅菌されていないため、理想は必要な量を正確に準備することです。.

ヨウ素化ヨウ素溶液を添加する前の媒体の色は、白色沈殿物を有する乳白色であり、添加後、濃い沈殿物を有する褐色である。観察された沈殿物は正常であり、溶解しない炭酸カルシウムに対応する。培地の最終ｐＨは８．４±０．２である。.

-明るい緑色のテトラチオネートブロスバリアント

明るい緑色のテトラチオネートブロスを調製するために、上記の全ての工程を実施するが、さらに、０．１％に調製した１０ｍｌの明るい緑色溶液を混合物に添加する。.

明るい緑

この溶液は以下のように調製される。

鮮緑色０．１ｇを量り、１００ｍｌの蒸留水に懸濁する。完全に溶解するまで沸騰するまで加熱する。琥珀色の瓶に保存.

使用する

便試料（便培養）については、プロトコルは以下の通りである。

10 mlのすぐに使えるテトラチオネートブロスを含むチューブに1 gの固形便または1 mlの液体便を接種する。激しく振とうし、6〜24時間43℃でエアロビシスでインキュベートする.

続いて、10〜20μlのブロスのアリコートを取り、それをとりわけSS寒天、XLD寒天、鮮緑寒天、Hektoen腸溶性寒天などのサルモネラ菌に対して選択的な培地中で継代培養する。.

並行して、サルモネラ菌の選択培地には、濃縮せずに直接サンプル（糞）を接種します。直腸スワブのサンプルについては、チューブに集められた材料をダウンロードして、上記のように進めてください.

食品サンプルの場合は、10 gの固形食品または10 mlの液体食品を計量し、すぐに使える100 mlのテトラチオネートブロスをボトルに接種します。上記と同じ方法で進めますが、37℃でインキュベートします.

見てわかるように、サンプルとブロスの関係は常に1:10になります.

品質管理

培地を試験するために、既知の対照株を使用することができる。最も一般的に使用されているのはATCC認証株です.

使用される株は ネズミチフス菌 ATCC 14028, サルモネラアボニー DSM 4224, Salmonella enteritidis ATCC 13076, 大腸菌 ATCC 25922, エンテロコッカス・フェカリス ATCC 19433と 黄色ブドウ球菌 ATCC 25923.

サルモネラ菌株では優れた開発が期待されていますが 大腸菌 弱いまたは定期的な開発を持っている可能性があり、グラム陽性株（EnterococcusとStaphylococcus）が部分的または全体的に抑制されている.

参考文献

コンダプロナディサ研究所。 Müeller-Kauffmannによるテトラチオネートブロスベース。で利用可能：
BDラボラトリーズテトラチオネートブロスベース。で利用可能：
研究所ブリタニア。 Tethionateブロスベース。で利用可能：
メディアBBL 2005.サルモネラ種の栽培のための管の準備.
Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.（2009）。ベイリー＆スコットの微生物学的診断12編社説Panamericana S.A.アルゼンチン.
Flores-Abuxapqui J、Puc-Franco M、Heredia-Navarrete M、Vivas-Rosel M、Franco-MonsrealJ。亜セレン酸ナトリウムとテトラチオン酸ナトリウムの培養液の比較。の孤立 サルモネラ種 キャリアスツールの. Rev Biomed 2003年14（4）：215〜220

生物学

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