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ネガティブ染色の基礎、テクニック、長所と短所
の ネガティブ染色 それはいくつかの微生物のカプセルの存在を強調するための特別な着色方法です - 主に 肺炎球菌、肺炎桿菌 そして クリプトコッカスネオフォルマンス-, 臨床サンプルまたは純粋培養から.
ネガティブ染色を適用するために一般的に使用される直接サンプルは脳脊髄液です。この技術は、特に髄膜炎の推定診断のための迅速な代替法を表します。 クリプトコッカスネオフォルマンス.
同様に、この染色剤は、一般に痰および無菌液体、ならびに若い純粋培養から得られた株に塗布することができる。このテクニックは、その実行にニグロシンまたは中国のインクを使います。したがって、短期間で優れた診断価値のある情報を提供することは、適用するのが非常に単純で経済的な方法論です。.
この意味では、どの実験室でもこの着色を行うことができます。もちろん、実験室には、酵母菌を認識することができる有能なスタッフがいなければなりません。 クリプトコッカスネオフォルマンス サンプルが存在する可能性がある白血球および人工物からそれらを分離または出芽および識別.
索引
- 1財団
- 2テクニック
- 2.1材料
- 2.2サンプリング仕様
- 2.3直接サンプルを使ったテクニックの実行
- 2.4培養株からの手法の実行
- 2.5顕微鏡で観察する
- 3つの利点
- 4デメリット
- 5インディアンインクによる組織染色
- 6参考文献
財団
ニグロシンとインドのインクは同じように作用します。したがって、2つの物質のどちらかを互換的に使用することができます。.
このテクニックは、他のカラーテクニックとは逆に作用するため、ネガティブ染色と呼ばれます。この中で染色されていないのは、求められている、あるいはあなたが見たいと思う構造です。つまり、微生物.
したがって、着色は塗抹標本の底を濃い色で染色することに基づいています。このシナリオでは、キャップされた構造は明るい色または無色で強調表示されます。.
一般に、酵母は、カプセルに対応する透明なハローに囲まれて、屈折するように観察される。これは、墨とニグロシンが生きている微生物のカプセルを形成する多糖を浸透することができない物質であるために起こります.
白血球や赤血球など、直接サンプルに存在する可能性のある他の構造が浸透しないことは注目に値します。.
今、微生物が死んでいる場合は、この染色は微生物の生存率を評価するためにも有用であるような方法で、チンキ剤はそれらの内部に浸透することができます.
テクニック
材料
ニグロシン
ニグロシンはその名前が持っている黒い色に由来します。ニトロベンジン、アニリンおよびアニリン塩酸塩のような有機化合物の混合物を前記反応において触媒（鉄または銅）を用いて加熱することによって得られる合成物質である。.
墨
墨は、主にアジアの人々によって書かれ、芸術作品やモノクロ絵画のために使用される物質です。中国文化でとても人気があります.
それは微粉炭と混合されたイカインキ、小さな樹脂の木の燃焼の産物から得られる.
炭化水素（植物油）の焼却の煤煙から、炭素粒子の沈殿を防ぐのに適切な粘稠度を与えるタンパク質ゼラチンと共に調製することも可能です。.
サンプリング仕様
- 断食は必要ありません.
- CSF、痰または無菌液体のサンプルは少なくとも1 mlの容量を含まなければならず、直ちに実験室で室温に移しなければならない.
- CSFおよび無菌液体サンプルは専門の医者によって取られるべきです.
- それはまた、前述の病原体に関連する疑わしい株の純粋培養物であり得る。.
直接サンプルを用いた手法の実行
- サンプルを遠心分離し、上清を捨てて沈殿物を採取します。.
- 一滴の遠心分離した材料（沈降物）および一滴の墨またはニグロシンをきれいなスライド上に置く。.
- それはよく混ぜられ、カバーガラスで覆われていて、液滴が縁を超えずに薄いフィルムのように広がることを可能にします.
- その後、標本は顕微鏡にマウントされます.
- 準備が暗すぎる場合は、水で希釈することができます.
培養株からの手法の実行
- 若い作物のごく一部を播種針で取り、以前にきれいなスライド上に置いた一滴の墨に溶かした.
- カバーガラスを上に置きます.
- それは顕微鏡で１０倍、次いで４０倍で観察される。.
コロニーの一部を蒸留水に溶かすこともできます。そこから液滴を取り、インクと混ぜ合わせます。このようにして調製物はそれほど厚くならず、構造を単独で観察することを可能にする。凝集があると、それはよく観察されません.
別の方法は次のとおりです。
- スライドの一方の端に浮遊状態の培養液を一滴入れる.
- 同じ端にニグロシンを一滴入れて混ぜる.
- 別のスライドを使用して、あたかも血液塗抹標本を作製しているかのようにサンプルを伸ばします。.
- 乾燥させて顕微鏡で観察する.
顕微鏡観察
最初にあなたは分野の広い視野を持つために10倍の対物レンズに焦点を合わせなければなりません。その後、スペースがあるかどうかを検索する必要があります。ある場合は、40倍速で詳細を確認してください。.
利点
- 実行が簡単.
- 経済的なテクニックです.
- この方法では、塗抹標本を熱や化学薬品に固定する必要はありません。したがって、微生物は歪みなく観察されます。.
- 新鮮な調製物は乾燥する必要がないのですぐに観察することができ、すぐに結果が出ます.
デメリット
一旦組み立てられると、新鮮な調製物は直ちに観察されるべきです。彼らが乾くことが許されるならば、それはそれらを観察することはもはや不可能であり、そして新しい.
インディアンインクによる組織染色
中国のインクが果たすことができるもう一つの機能は病理検査室にあります。これは、外科的に切除された組織サンプルに適用され、腫瘍切除のマージンを示します。.
印を付けた組織に酢酸を噴霧する。これは媒染剤として作用し、そして組織が生検調製物のための日常的な処理に供されるときにインキが外れるのを防ぐ.
この手順は、組織をアルコールとキシレンに浸した後、パラフィンワックスに浸します。このマーキングは、組織を観察するときに病理学者を導き、外科的切除のマージンまたは他の関心点がどこにあるかを示します。.
参考文献
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