生物学 - ページ 155
寒天サルモネラ - 赤痢菌の基礎、調製および使用
の サルモネラ・シゲラ寒天 SS寒天としても知られている、環境および臨床サンプルの両方から、Salmonella属およびShigella属の腸内病原性細菌を単離するために特別に設計された、中程度に選択的かつ異なる培地です。.SS寒天は複雑な組成をしています。それは肉抽出物、ペプトン、ラクトース、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸第二鉄、寒天、ニュートラルレッド、鮮緑色および蒸留水からなる。その高い選択性を考えると、豊富な混合植物相でサンプルを植えることが可能です。. 微生物学研究所では、サルモネラ - シゲラ培地が下痢の糞便、下水、飲料水および食品のサンプル中のサルモネラ菌およびシゲラの存在を調べるために広く使用されています。.サルモネラ菌株を回収するために、濃縮前のブロス（ラクトースブロス）と濃縮（亜セレン酸シスチンブロス）の使用が必要な場合があります。.サルモネラ菌の存在が非常に少量であると疑われる場合、または工業生産に典型的なプロセス、主に加工食品によって菌株が誤処理される可能性がある場合、これらのステップが必要です。抗生物質で治療された患者の便検体を濃縮することもお勧めです。.続いて、濃縮ブロスをサルモネラ - シゲラ寒天およびキシロース寒天、デオキシシロキサンリシン（XLD）および腸溶性ヘクテン寒天（HE）のような他の同様の培地に播種することができる。.索引1財団1.1栄養力1.2一貫性1.3選択的1.4差動2準備3使用 4制限5品質管理6参考文献財団Salmonella-Shigella培地の各成分は特定の機能を持ち、混合物全体としてそれを特徴付ける特性を与えます。.栄養価肉抽出物とペプトン（消化されたカゼインと動物組織）は、残りの成分に耐えることができる微生物の開発に必要な栄養素（窒素、炭素とビタミン）を供給します。. 一貫性寒天は培地に堅実な粘稠度を提供する責任があります。.選択的この培地は、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、および鮮やかな緑色を含んでいるので、非常に選択的です。したがって、それはすべてのグラム陽性菌およびいくつかの大腸菌群を含むグラム陰性菌の大部分の増殖を阻害する。.サルモネラ属の細菌およびいくつかの赤痢菌の菌株はこれらの化合物を支持するが.主に、サルモネラ属は胆汁酸塩に対して非常に耐性があるので、それらは糞便を通して細菌を絶えず排出する何人かの保因者患者の胆嚢に住むことができます。.差動ラクトースは、ラクトース発酵株と非発酵株を区別するのに役立つ発酵性炭水化物です。この特性は、この媒体中でフェノールレッドであるpH指示薬の存在によって証明される.ラクトース発酵株は赤色のコロニーを与え、非発酵株は無色です。サルモネラ菌と赤痢菌は乳糖を発酵させないため、この特性は重要です。.一方、この培地は、硫黄源としてチオ硫酸ナトリウムおよび鉄源としてクエン酸第二鉄を含有する。両化合物は、硫化水素を生成することができる細菌を識別することができる。これらは反応して、不溶性かつ可視の硫化鉄の黒色沈殿物を形成する。.この特性は、サルモネラ属のいくつかの株を有する。通常、それらのコロニーは無色の平らで、中心に黒い点があります。サルモネラの残りの部分はHを産生しない2無色コロニーとしてSおよび発達する.一方、シゲラ属のコロニーは黒色化することなく無色の平らである。.準備これは準備がとても簡単なことを意味します.63グラムの脱水した市販の培地を量り、1リットルの蒸留水に溶かします。溶液を加熱してかき混ぜる。混合物は数分間沸騰する可能性があります.この培地はオートクレーブにかけないでください。溶解後、シングルまたはダブルの滅菌プレートに直接供給されます。.固化するとき、それらはプラークメーカーの中で逆さに配置され、それらが使用されるまで冷蔵庫（２〜８℃）に貯蔵される。.調製後の培地はpH 7.2±0.2でオレンジレッドになるはずです.サンプルを蒔く前にプレートを焼き戻しできるようにすることが重要です。元のサンプルに直接播種して寒天の一部に材料を排出し、そこから枯渇によってストリートを得る.濃縮ブロスを使用する場合は、亜セレン酸ブロスの一部を通過させてdrigalskiスパチュラで播種する。.好気中で37℃で24時間インキュベートする. 重さを量るグラムの量と培地の最終的なpHは、商業施設によって異なります。培地のベースプレートは常にその準備のための徴候をもたらします.使用する それは頻繁に便の文化の分析でそして残留水サンプル、飲料水および食糧の微生物学的研究で使用されます.しばしば二重プレートが調製され、一方の側にサルモネラ - シゲラ寒天が配置され、他方の側にXLD寒天が配置される。.制限事項-赤痢菌のいくつかの株はこの培地では増殖しない。したがって、この属の一次単離には推奨されません。.-黒い中心を持つすべての明確なコロニーがサルモネラ菌を示すわけではありません。プロテウスのいくつかの株のコロニーはサルモネラ菌のコロニーと区別がつかないので、生化学的試験は正しい同定をするために行われなければならない。.-脱水媒体は吸湿性が高いので、環境への暴露には注意が必要です。したがって、それは乾燥した密閉された環境に保たれなければならない。ごく短期間営業.-時間が経つにつれて培地中の胆汁酸塩が沈殿し、寒天内でつや消しに似た画像を形成することがありますが、これは結果に影響を与えません.-赤痢菌のいくつかの株はゆっくりとラクトースを発酵することができる.品質管理培地が正しく機能していることを証明するために、既知または認証された対照株を植えて、成長が予想される特性を満たすかどうかを観察することをお勧めします。. この目的のために、 大腸菌、エンテロバクターsp、肺炎桿菌、flexleri赤痢菌、ネズミチフス菌 ○ エンテロコッカス・フェカリス. 期待される結果は以下のとおりです。大腸菌...
寒天塩およびマニトールの基礎、調製および使用
の 塩寒天とマンニトール または塩味のマンニトールは、固体の、選択的かつ異なる培地である。特にChapmanによって病原性グラム陽性球菌の単離のために作成されました。 黄色ブドウ球菌.ただし、分離することも有用です。 表皮ブドウ球菌, それは時に日和見病原体として存在する可能性があり、 Staphylococcus saprophyticus, 他の種の中でも、認識された尿中病原体. 一部のEnterococcusは、この培地、および特定のグラム陽性芽胞形成桿菌で増殖することができます。.この媒体は、臨床サンプルの分析に非常に役立ちますが、食品の微生物学的研究や、とりわけ化粧品、医薬品などの工業製品の品質管理にも使用されます。.塩漬けマンニトール寒天は、牛肉、トリプテン、マンニトール、塩化ナトリウム、フェノールレッド、寒天の抽出物とペプトンで構成されています。.索引1財団2準備3つの用途4品質管理5最後の検討事項6参考文献 財団マンニトール寒天はそれが持っている塩の高濃度のおかげで選択的です。塩分は抑制物質として働き、グラム陰性菌の増殖を防ぎます。.それはまたマンニトール炭水化物およびフェノールレッドpH指示薬の存在による差もあります。これから、マンニトールを発酵させることができるバクテリアは酸を作り出し、培地を酸性化し、コロニーと培地を黄色に変える。. 一方、マンニトールを発酵させないコロニーは、肉やトリプテイナの抽出物やペプトナによって提供される栄養素を利用して培地中で成長します。そこからバクテリアは成長に必要な炭素、窒素、ビタミンそしてミネラルを抽出します。.この場合のコロニーは弱いまたは強いピンク色であり得、そして培地は同じ色のままであるかまたはフクシアに変化する。.寒天は媒体に一貫性を提供する物質です.準備１リットルの塩味マンニトール寒天を調製するために、１１１ｇの好ましい商業用ハウスの脱水培地を秤量し、そしてフィオラを用いて１０００ｍｌの蒸留水に溶解する。.溶解プロセスを改善するために媒体を頻繁に除去することによって熱が加えられる。ちょっと沸かしましょう.15分間121℃でオートクレーブにフィオラを置きます.時間の終わりに、フィオラをオートクレーブから取り出し、放置し、温度が約50〜55℃になったときに滅菌ペトリ皿の上に15〜20ml入れる。.それは凝固することが許されており、プラケロの中で逆さにした形で注文しそしてそれが使用されるまで冷蔵庫の中に保管する。サンプルを植える前に、プレートが環境の温度になるのを待つ必要があります.プレートは線条またはドリガルスキースパチュラで表面に播種することによって播種されています。調製培地の最終ｐＨは７．４±０．２であるべきである。脱水培地の色はライトベージュであり、調製培地の色はオレンジレッドである。.用途その高い選択性のために、この培地は人の存在を探したい混合植物相を持つサンプルを植えるのに理想的です。 黄色ブドウ球菌, この属の主な病原体として.この意味で、最も頻繁に使用される用途の1つは、特に無症状の保菌者を検出するための、咽頭滲出液と鼻汁のサンプルの微生物分析です。 黄色ブドウ球菌.いくつかの国では、フードベンダーとして働きたい人々のための必須要件としてこの分析を実施しました.このコントロールは、のキャリアである人々の雇用を防ぎます 黄色ブドウ球菌, このように大規模な食中毒を避ける, ブドウ球菌エンテロトキシンで汚染された食品の摂取による.それはまた、とりわけ創傷感染症、血液培養、CSF、気管支肺胞洗浄の播種に含まれ得る。. 塩味マンニトール寒天培地は、グラム陽性菌球菌をクラスター内で明らかにしたCLED寒天培地または血液寒天培地から尿培養のコロニーを再単離するのに有用です。.それは、他の用途の中でも、食品、飲料水、土壌の微生物学的分析においても有効です。.品質管理塩味のマンニトール寒天培地を含むプレートのバッチを調製したら、品質管理を実施することをお勧めします。増殖があるかどうかを示すために対照株を蒔く.ポジティブコントロールとして、既知の株 黄色ブドウ球菌. それは黄色のコロニーを発達させることによって十分に成長しなければならず、そして培地も同じ色になる.同様に、既知の株を含むことは便利である。...
寒天サブローの基礎、準備および使用
の サブロー寒天培地, サブローデキストロース寒天としても知られている、それは特に酵母、カビおよび皮膚糸状菌のような真菌の単離および発生のために濃縮された固体培地である。.したがって、臨床的または非臨床的サンプルのいずれかから、病原菌または日和見真菌の存在を調査するための微生物学実験室では、この手段を欠くことはできない。同様に、StreptomycesやNocardiaなどの糸状菌の増殖にも理想的です。その使用は非常に広いです、それは人間、動物、植物そして産業の真菌学で使用することができます. この媒体は、主に皮膚藻類に起因する頭皮の疾患の世界的に有名な専門家となった有名な皮膚科医Raimond Sabouraudによって1896年に作成されました。.その作成はそれ以来ずっと使われてきたので重要で、今日も続けられています。.これは真菌にとって特殊であるが、この培地では細菌が増殖する可能性があるので、混合フローラを有するサンプルについてはそれらの調製に抗生物質を含める必要があり、したがって存在し得る細菌フローラの増殖を抑制する。.抗生物質の選択は注意深くそしてあなたが回復したい真菌の種類を考慮してなされるべきです。.索引1財団 1.1 Sabouraudブドウ糖寒天と抗生物質の最もよく使われる組み合わせ2準備2.1ブドウ糖サブロー寒天培地 2.2サブローデキストロース寒天培地（エモンの改変）クロラムフェニコールを含むサブローデキストロース寒天培地（エモンズの変法） 2.4シクロヘキシミドを含む2.4ブドウ糖サブローエモン寒天培地2.5デキストロースサブロー寒天培地（エモンズ）とクロラムフェニコールおよびシクロヘキシミド 2.6追加できる他の抗生物質3特別な考慮事項 4品質管理 5つの用途5.1一次栽培5.2胞子形成5.3保存5.4マイクロカルチャー5.5人間の真菌学において5.6動物真菌学5.7環境菌学5.8産業菌学5.9植物菌学6参考文献財団 サブローデキストロース寒天培地は、その元の製剤では5.6±0.2の酸性pHのために選択性が弱い培地ですが、主に長期間のインキュベーションではまだ細菌が発生する可能性があります.培地はカゼインペプトンと膵臓で消化された動物組織を含み、微生物の発生のための炭素源と窒素源を提供します。.それはまた高濃度のグルコースを含み、それはエネルギー源として働き、バクテリアよりも真菌の増殖を促進する。すべて寒天と混ぜ合わせます。これは正しいコンシステンシーを提供する成分です。.一方、抗生物質が添加されている場合、サブローデキストロース寒天は選択的かもしれません.抗生物質と一緒にそれは傷のサンプル、開いた潰瘍または大きい細菌汚染が疑われるあらゆるサンプルで特に有用です.Sabouraudブドウ糖寒天と抗生物質の最もよく使われる組み合わせ-クロラムフェニコールを含むサブロー寒天培地：酵母および糸状菌の回収に最適.-ゲンタマイシンとクロラムフェニコールを含むサブロー寒天培地：この培地では、ほぼすべての糸状菌と酵母が増殖し、腸内細菌、シュードモナス、スタフィロコッカスを含む多数の細菌を抑制します。.-シクロヘキシミドを含むサブロー寒天培地：疑いが二型性真菌である限り、皮膚または気道からのサンプルに特に有用です。.シクロヘキシミドは慎重に使用する必要があります。サンプル中に汚染物質として存在する可能性のある非病原性または環境性の真菌および酵母の増殖を抑制するために使用されますが、それはまたいくつかの真菌の増殖を抑制します。 クリプトコッカスネオフォルマンス, Aspergillus fumigatus、Allescheria boydii、Penicillium spおよび その他の日和見菌.-クロラムフェニコール＋シクロヘキシミドを含むサブロー寒天培地：主に二形性皮膚糸状菌および真菌を単離するために使用される。それはそれがとして日和見真菌のいくつかの種を阻害するという欠点があります。 カンジダのアルビカンス, Aspergillus、ZygomycetesまたはC. ネオフォルマンス. -クロラムフェニコール、ストレプトマイシン、ペニシリンG、およびシクロヘキシミドを含むサブロー寒天培地：細菌や腐生性真菌に非常に汚染されているサンプルには理想的ですが、増殖が阻害されるという欠点があります。...
パパデキストロースの基礎、調製および使用
の パパデキストロース寒天 それは固体の、非選択的な栄養価の高い培地です。それは細菌種および真菌種を成長させることができるが、その使用は特に糸状菌および酵母の単離のために示される。それはまた英語の表現Potato Dextrose AgarによってPDA培地として知られています.それは植物病原性真菌、すなわち植物に影響を与えるものの単離に特に有用である。感染した植物からサンプルを植えるために、サブロー寒天培地またはマルタ寒天培地のような他の培地を使用することができるが、日常的な使用のためには、より大きな胞子形成のためにポテトデキストロース寒天培地が好ましい。. 化粧品、医薬品、乳製品のサンプル中の真菌コロニーのカウントにも使用されます。同様に、この培地中で非常によく成長し、それらの特徴的な色素を発達させる皮膚糸状菌を探して皮膚掻爬のサンプルを植えることは有益である。.ポテトデキストロース培地は、実験室で調製するのが非常に簡単で簡単です。それは名前が示すように、ジャガイモ注入、ブドウ糖および寒天を含んでいます。バクテリアの成長を防ぎ、真菌種に対する選択性を高めるために、追加の抑制物質を加えることができます。.索引1財団2準備2.1 - パパデキストロース寒天の自家製（非市販）調製2.2 - パパデキストロース寒天の市販品3つの用途3.1ジャガイモデキストロース寒天上に植物サンプルを植えるためのプロセス3.2パパデキストロース寒天上に皮膚、髪の毛または爪の鱗片のサンプルを植えるためのプロセス3.3識別手順3.4コロニー数3.5菌株のメンテナンス4品質管理5参考文献財団パパデキストロース寒天培地は、糸状菌および酵母の発生に必要な栄養素を提供する培地です。.グルコースとポテトの注入の組み合わせは、真菌の満足のいく成長のための完全なエネルギー源を提供します。寒天は環境に安定性を提供するものですが.培地単独では細菌の増殖を阻害しないので、それは非選択的培地である。選択的にするためには酒石酸や抗生物質などの抑制物質を加える必要があります.準備-ポテトデキストロース寒天の自家製（非市販）調製ペトリ皿これは次のようにして準備されます。まず第一に、じゃがいもは非常によく洗われて、彼らが持っている汚れを取り除きます。それらはすべてと殻で薄いスライスに切られます。じゃがいも２００ｇを秤量し、１リットルの蒸留水で３０分間煮沸する。. 時間が濾過された後またはガーゼを通してすべての調製物をこすった後.得られた液体は、それが１リットルに達するまで蒸留水で完成する。この注入液に、２０ｇの寒天 - 寒天および２０ｇのデキストロースを添加し、よく混合しそして１５ポンドの圧力で１５分間１２１℃でオートクレーブにかける。.50℃に冷却し、滅菌ペトリ皿に入れる。調製したプレートは冷蔵庫に保存されています.くさび パパデキストロース寒天ウェッジも用意できます。.この場合、オートクレーブ中で滅菌する前に、１２〜１５ｍｌの培地をチューブに入れ、次いでそれらをオートクレーブにかけ、固化するまでそれらを特別な支持体上に置く。冷蔵庫に保存する.培地のpHは5.6±0.2のままですが、一部の検査室ではバクテリアの増殖を抑えるために10％酒石酸を添加してpHを3.1±0.1に下げています.これと同じ意味で、他の研究室では抗生物質を添加して真菌の培養に選択的にし、細菌の発生を防ぐことを好む.-ポテトデキストロース寒天の市販品市販の脱水媒体39 gを量り、蒸留水1リットルに溶かします。 5分間そのままにしておく.混合物は、完全に溶解するまで頻繁に撹拌することによって加熱される。続いてオートクレーブ中、121℃で15分間滅菌した。.プレートまたはウェッジを用意することができます。上記のように進めます.ｐＨは５．６±０．２のままである。 3.1のpHが望ましい場合は、プレートに供する前に14mlの20％滅菌酒石酸を添加すべきである。.準備されていない培地の色はベージュ色で、淡い琥珀色で、やや曇りや乳白色の外観をしています。.用途ジャガイモデキストロース寒天に植物サンプルを植える方法-シミのある葉用葉はバラバラに.50％アルコールを入れた50ccのグラスの中に、20〜30秒間表面を消毒するために、葉のかけら（汚れた部分と健康的な部分）を置きます。薄い葉の場合はアルコールを引き、40〜50秒間20％次亜塩素酸ナトリウムを添加し、それが樹皮や丸太の場合は80秒に時間を増やす.次亜塩素酸ナトリウムを引き、消毒した断片を滅菌したクリップで取り、それらを培地の表面に置いてください（最大10個）。日付を入れて20から30℃でインキュベートする.-果物や塊茎のために果実が肉質の場合は、真菌の影響を受けた果実を開き、病気の部分と健康な部分の両方を滅菌メスで細かく刻み、寒天の表面に置きます。.果物がレモンやオレンジのような柑橘類であるならば、あなたは種を開けて蒔くべきです.果物の表面が影響を受けて胞子が観察される場合は、プレート上ですりおろした方法を使用するのが最善です。これは、滅菌して冷却した「L」の形のへらで胞子に触れることからなり、その後寒天上に2〜3回ジグザグ播種を行う。.-穀物用 それらは葉に記述されているように消毒されそれから寒天の上に置かれる. -枝や茎に樹皮の掻き取りが行われ、その後、健康な部分と病気にかかった部分の断片が取り出され、寒天上に直接播種される。.播種したプレートをエアロビオシス中、20〜30℃で72時間インキュベートする。.パパデキストロース寒天上に皮膚、髪の毛または爪の鱗屑のサンプルを植える方法サンプルは、皮膚糸状菌を探して罹患した毛髪、皮膚の薄片、または爪を切るために、メスの刃11番を使用して採取しなければならない。サンプルを採取する前に、70％アルコールで消毒してください。.-皮膚サンプル鱗片状の病変では、真菌を見つける可能性が高いため、病変の端を削り取る必要があります。.滲出性病変では、サンプルは乾いたまたは湿った綿棒で採取されます。ジャガイモデキストロース寒天またはサブロー寒天に直ちに播種する。輸送手段を避ける.サンプリングの別の方法は、MariatとAdan Camposのカーペットスクエアテクニックによるものです。この場合、患部をさらに培養するために滅菌ウールで5回擦ります。.サンプルは培地に直接入れることができます.-髪のサンプル病理によっては、患部は根によって切り取られたり引き裂かれたりすることがあります。サンプルを培地に入れる.-爪サンプルあなたは罹患した爪の特定の部分を削り取るか切断することができます。怪我の種類によって異なります.菌と培養液が接触する可能性を高めるために、播種前にサンプルを1...
栄養価の高い寒天の基礎、準備および使用
の 栄養価の高い寒天 それは非選択的かつ非分化的な固体培地です。この環境で栄養の観点から要求しないあらゆる種類の細菌を育てなさい.それは簡単な手段であり、そしてその名前にもかかわらず、ブレインハートインフュージョン寒天培地またはトリプチケースソイ寒天培地のような他の類似の培地と比較して低い栄養価を含む。. 実験室でのその有用性は非常に多様です。血液寒天を調製するための基礎として、種の継代培養、株の維持、コロニーの計数などに主に使用されます。.同様に、その淡いベージュ色のために、いくつかの細菌株によって生成される色素の生成、例えば 緑膿菌, によって生成された赤レンガ色の顔料 セラチア・マルセッセンス 室温で、の黄金色の顔料 黄色ブドウ球菌, とりわけ.また、市場で最も経済的に成長しているメディアの1つです。.索引1財団2構図3準備4つの用途4.1血液寒天培地の調製の基礎として4.2胞子形成細菌の胞子形成を刺激する4.3ひずみメンテナンス 4.4コロニーカウンティング4.5診断テストの実行4.6中温性好気性娯楽用塩水の回収（ビーチ）5参考文献財団すでに述べたように、それは制限なしでそして解釈するための複雑な反応なしで細菌増殖のための栄養物質を提供することに基づいている非常に単純な手段です。.培地は半透明なので、深さで播種する方法でコロニーを数えるのに理想的です。.構成それは主に肉抽出物または酵母エキス、ペプトンまたは膵臓ゼラチン消化物、寒天、塩化ナトリウムおよび蒸留水から構成されています。. 肉や酵母やペプトンの抽出物は、エネルギー源や成長因子としてバクテリアによって使われることになる炭素と必須ミネラル（窒素、リンと硫黄）の源を表します。.同様に、寒天はすべての固形成長培地の基礎であり、ゼラチンに代わるものであり、これはRobert Kochが彼の培地に固体の粘稠度を与えるために使用した最初の基本化合物であった。.寒天はガラクトース、ガラクトマンナン、アガロースおよびアガロペクチンからなる多糖類です。 40℃に設定され、100℃近くで溶けます.その一部として、塩化ナトリウムは培地に細菌発生に必要な浸透圧を与える。.最後に、水は凍結乾燥化合物を水和しそして溶解するのに役立つ。中性pHに調整した蒸留水を使用する必要があります。水道水はカルシウムとマグネシウムを含んでいるため使用しないでください。カルシウムとマグネシウムは培地中のリン酸塩と反応して不溶性塩を形成する可能性があります。.準備1リットルの栄養寒天の場合、31 gの脱水培地を量ります。それをフィラに入れ、１リットルの蒸留水に溶解する。 5分の休息の後、熱源の上で加熱し、それが1または2分間沸騰するまで絶えず混ぜる. それから、そのフィオラをオートクレーブに入れて、121℃で20分間殺菌します。. 時間の終わりに、それをオートクレーブから取り出し、層流フードまたはブンゼンバーナーを使用して滅菌ペトリ皿に入れる。.ペトリ皿が使い捨て（プラスチック）の場合、寒天の温度が約50℃になったときに培地を分配して、過度の熱によって変形しないようにします。.固化させて、プレートホルダーに入れて反転させ、使用まで2〜8℃で冷蔵保存する。.プレートは播種する前に調質する必要があります。栄養寒天プレートは、汚染または脱水されている場合は使用しないでください。.調製培地のpHは7.3±0.2に調整する必要があります.用途それは微生物学研究室で使用される最も簡単な培地です。その処方は、要求のないバクテリアの成長に優れています.その主な用途は以下のとおりです。血液寒天調製用のベースとしてこの培地は血液寒天培地を調製するためのベースとして使用されることがありますが、最も一般的に使用されるベースではありません. 胞子形成細菌の胞子形成を刺激するこの培地は、胞子形成細菌などの胞子形成を刺激するのに特に役立ちます。 バチルス種.これをするために、属の種は蒔かれます...
寒天ミューラーヒントン基礎、準備および使用
の ミュラーヒントン寒天培地 それは、肉注入、カゼイン酸ペプトン、デンプン、寒天および蒸留水からなる固体の非選択的栄養培地です。この培地は、最も急速に増殖している細菌の優れた微生物開発を可能にします。.それはもともとそのような栄養的に要求の厳しい細菌を分離するためにジョンハワードミューラーとジェーンヒントンによって作成されました。 淋菌 そして 髄膜炎菌. しかしながら、その特徴のために、それは抗生物質に対する感受性の研究に理想的であり、信頼でき再現可能な結果を提供することがわかった。. このため、MüellerHinton寒天培地は、Kirbyディスク拡散法による抗菌剤感受性試験の実施のために、臨床検査規格協会（CLSI）および欧州抗菌剤感受性試験委員会によって承認された培地である。バウアー.索引1財団2準備3つの用途3.1抗菌技術3.2MüellerHinton寒天培地へのディスクの戦略的配置4誤った結果の原因 5制限6品質管理7参考文献財団それは非選択的な栄養培地であるため、それはほとんどの病原菌の増殖に優れています.一方、その単純な組成は物質をその上に容易に拡散させるので、ディスク拡散法による感受性試験にとって本質的な特徴である。.その特徴のもう一つは、それがスルホンアミド、トリメトプリムとテトラサイクリンを効果的に評価することを可能にする少量の抑制剤を含むということです。.ただし、以下のような適切な機能を保証するためには、培地が一定の条件を満たさなければならないことに留意する必要があります。PH調整、寒天の深さおよび適切な濃度のチミン、チミジン、Ca++, Mg++ とZn++.方法論が標準化されているので、次のようなすべてのパラメーターを満たす必要があることも知っておく必要があります。接種材料の濃度、抗生物質ディスクの濃度および保存、寒天上の適切な数のディスクの配置、ディスク間の距離、特定の抗生物質の戦略的配置、雰囲気、温度および時間インキュベーション.準備脱水ミュラーヒントン培地37グラムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。それを溶解するのを助けるためにかき混ぜながら媒体を加熱する。 1分間煮ましょう. オートクレーブを取り、121℃で15分間殺菌します。オートクレーブから取り出すときは、フィオラを50℃のウォーターバスに入れて冷却します。直径10 cmの滅菌ペトリ皿に25から30 mlを注ぐ.プレートの厚さは平均4 mm（理想）で、3〜5 mmの範囲が許容されます。.MüellerHinton寒天ベースを使用して血液寒天を調製することが望ましい場合は、プレートに供する前に5％滅菌脱繊維子羊の血液を注ぐ。.培地の最終pHは7.2から7.4の間でなければなりません.使用するまで、冷蔵庫に投資して保管してください。使用前にプレートを室温にする.調製した培地の色はライトベージュです。.用途それはほとんどの急速に成長していない病原体に対するアンチビオグラムまたは抗生物質感受性テストを実行するために使用されます.寒天に血液が補充されている場合は、次のような要求の厳しい微生物のアンチビオグラムを実行するのに役立ちます。 肺炎球菌, ヘモフィルス種、髄膜炎菌, とりわけ。それはまた隔離するのに使用されていました レジオネラ・ニューモフィラ.アンチバイオグラム法アンチビオグラムを実行する前に、1.5 x 10に相当するバクテリア溶液を調製しなければなりません8...
マッコンキー寒天の基礎、調製および使用
の マッコンキー寒天 グラム陰性桿菌の独占的な分離を可能にするのは固体培地です。この理由のためにそれは選択培地でありそしてそれを示差培地とするラクトースの発酵および非発酵細菌の間の区別も可能にする。それは微生物学研究室で最も広く使われている培地の一つです。.この培地は、主に家族に属するグラム陰性桿菌の分離に使用されます。 腸内細菌科, 日和見的および腸病原性種を含む. それはまた胃腸管に住むが、に属していない他の腸内桿菌を分離するのに使用することができます 腸内細菌科, のように アエロモナス属、プレシオモナス属, とりわけ.最後に、それは環境、水または土壌に見られるが、時には日和見病原菌などのグラム陰性非発酵グルコース桿菌を単離することができる。 シュードモナスsp, アシネトバクター属、アルカリ属、クロモバクテリウム・ビオラセアム、Stenotrophomonas maltophilia, とりわけ.索引1財団1.1 MacConkeyの寒天 2準備 従来のMacConkey寒天の3つの用途4 MacConkey寒天の他の亜種4.1ソルビトールを含むMacConkey寒天4.2クリスタルバイオレットまたは塩を含まないMacConkey寒天4.3マッコンキー寒天とセフォペラゾン4.4 10％の海水で調製されたMacConkey寒天v / v5参考文献財団マッコンキー寒天...
寒天M.R.Sの基礎、準備および使用
の 寒天Ｍ．. は、乳酸菌、特にラクトバチルス属の乳酸菌の単離と計数に使用される選択的固体培地です。この寒天は1960年にMan、RogosaおよびSharpeによって作成されましたが、真ん中に同じ名前が付いていますが、その複雑さのために省略形のM.R.Sがよく使用されます。.それは、プロテオースペプトン、肉エキス、酵母エキス、グルコース、ソルビタンモノオレエート、リン酸二カリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸アンモニウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガンおよび寒天からなる。. この組成物は、糞便、膣分泌物、経口サンプルおよび母乳、ならびに乳製品および肉食品などの臨床サンプルからの乳酸菌の適切な開発を可能にする。.乳酸菌が病理学的プロセスに関与することはめったにないため、臨床検査室では日常的には使用されていません。しかしながら、Ｍ．Ｓ．寒天の使用は食品微生物学の分野においてより頻繁に行われている。.一方、この培地は、乳酸菌の研究を目的とするいくつかの研究センターで使用されています。.索引1財団2準備3つの用途3.1コロニーの特徴3.2乳酸菌の単離3.3乳酸菌のカウント3.4研究レベルで4品質管理5参考文献財団寒天のMan、Rogosa、Sharpeはかなり複雑な構成をしています。各コンポーネントが果たす機能を細かくすることで、その基礎を説明することができます。.プロテオースペプトン、肉エキス、酵母エキスおよびグルコースは、バクテリアの成長に必要な炭素、窒素、ビタミンおよびミネラルの供給源を提供する栄養素です。さらに、グルコースはほとんどの培地で使用されている普遍的なエネルギー源です。.他方、乳酸菌の増殖を促進するためには、乳酸桿菌および関連細菌の代謝に不可欠な補因子（カチオン）の存在が必要である。これらの化合物はナトリウム、マグネシウムおよびマンガンの塩です. 同様に、ソルビタンモノオレエートまたはポリソルベート80は、栄養素として吸収されたときに重要な脂肪酸の供給源です。.さらに、ソルビタンモノオレエートおよびクエン酸アンモニウムは、付随する植物相、特にグラム陰性菌の発生を抑制することによって作用し、この寒天の選択的性質を提供する。.最後に、寒天は培地に固体の粘稠度を与えるものです。.Man Rogosa Sharpe agarの他の亜種があります。それらのうちの１つは、他の微生物の中でもとりわけ、ビフィズス菌の単離に非常に有用なシステイン（Ｍ．Ｒ．Ｃ．）を補給されたものである。他方、特に乳製品中のビフィズス菌の選択的計数のために、ネオマイシン、パロモマイシン、ナリジクス酸および塩化リチウムを添加したＭＲＳ培地がある。.準備68.25グラムの脱水媒体を量り、1リットルの蒸留水に溶かします。 5分間放置してください。全体を溶かすには、熱源に頻繁にかき混ぜながら1〜2分間沸騰させます。オートクレーブで121℃で15分間滅菌する.オートクレーブを離れるときは数分間放置して滅菌ペトリ皿に熱いままで分配する.プレートを固化させ、ひっくり返し、プラッカーを注文し、そして使用するまで冷蔵庫に保管する。プレートを使用する前にプレートを室温にする.培地のpHは6.4±0.2です。いくつかの商業住宅は5.5から5.9の間のpHを推奨しています.脱水媒体はベージュ色で、調製は濃い琥珀色です。.脱水培地と調製したプレートの両方を2〜8℃で保存する必要があります.用途寒天プレートＭ．それらは表面に播種することができます（枯渇またはドリガルスキーのへらで）。それはまた深さによって播種することができます。プレートは微好気性（4％O）で37℃でインキュベートする必要があります2 そして5-10％のCO2）24〜72時間.播種方法は、目的に応じて選択されます（分離またはカウント）。.コロニーの特徴Lactobacillusの推定コロニーは白っぽく成長し、この寒天上で粘液様またはクリーミーな外観を呈する。それから彼らは識別しなければなりません.乳酸菌の単離この目的のために、表面による植栽が使用されます。植えるサンプルには事前の手順が必要です。. 母乳サンプルの場合、脂肪層を除去するために、サンプル1 mlを14,000 rpmで10分間遠心することをお勧めします。 ９００μｌを廃棄し、残りの１００μｌ中に沈殿物を懸濁してＭ．それからそれはDrigalskiのへらで均等に配られなければなりません.便試料の場合、１グラムの糞便を秤量し、１ ／ １０希釈に相当する９ｍＬの０．１％滅菌ペプトン化水中にホモジナイズする。その後、10の最終希釈が得られるまで、連続希釈を行う。-4. 最後に、100μlの希釈液10を採取する。-2, 10年-3 そして10-4 そして各希釈液をMRS寒天上に播種し、Drigalskiスパチュラで均一に分配する。.乳酸菌のカウントこの場合、播種は深さによって行われます.母乳のサンプルの場合は、1 mLを取り、滅菌円錐プラスチックチューブに入れます。 ＭＲＳ寒天を約４０℃の温度で２５ｍＬの最終容量まで添加し、均質な混合物を得る。その後、それを均一な方法で滅菌ペトリ皿に注ぎ、それが重合するまで放置する。.上記のように、便試料について希釈を行う。各希釈液1...
