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フォーゲル - ジョンソン寒天の基礎、調製および使用
の フォーゲル・ジョンソン寒天培地 特に分離用に処方された、固体の、選択的で分化した培地です。 黄色ブドウ球菌. この培地は、1955年にZebovitz、Evans、Nivenによって調合されたグリシンテルライト寒天培地の改良から、1960年にVogel and Johnsonによって作成されました.改変は、培地中に存在するマンニトールの濃度を増加させること、およびｐＨ指示薬を組み込むことからなる。現在の処方は、トリプテン、酵母エキス、マンニトール、リン酸二カリウム、塩化リチウム、グリシン、フェノールレッド、寒天、1％亜テルル酸カリウム溶液および水からなる。. フォーゲル - ジョンソン寒天培地のように、他の手段が単離に選択的であることに注目すべきである。 黄色ブドウ球菌, 塩味のマンニトール寒天およびベアードパーカー寒天のような。この意味で、フォーゲル - ジョンソン寒天培地の基礎は、塩味マンニトール寒天培地とベアードパーカー寒天培地の混合物であると言えるでしょう。.最初の植民地 黄色ブドウ球菌 それらはマンニトールを発酵させそしてｐＨ指示薬を黄色に変えることにより区別される。一方、2番目の 黄色ブドウ球菌 それは亜テルル酸塩をテルルに還元し、灰色から黒色のコロニーを形成することを特徴とする。両方の性質がフォーゲル - ジョンソン寒天において観察される。.この培地は、その対応物と同様に、...
鮮緑寒天の基礎、調製および使用
の 明るい緑色の寒天 それは高度の選択性を有する固体培地である。それはサルモネラ属の系統の分離のためにもっぱら使用されます、しかしこの媒体の中で育たないtyphiおよびparatyphi種のようなある例外があります.サルモネラ属の検索は、糞便、水、食物のサンプルで頻繁に見られます。この意味で、この媒体は非常に便利です。この寒天はKrisffsen、LesterおよびJurgensによって1925年に作成され、後にKauffmannによって修正されました. それは動物組織の消化性消化とカゼインの膵臓消化からのpluripeptonasから成ります、またイーストエキス、塩化ナトリウム、ラクトース、スクロース、フェノールレッド、鮮やかな緑色と寒天を含みます.それはサルモネラ菌の増殖に有利な、ほとんどの細菌にとって非常に不愉快な培地であることを特徴としていますが、いくつかの大腸菌群は弱く発達しながらその中に存在することができます。.この培地ではShigella属は生育せず、どちらも生育しないことを強調することが重要です。 ネズミチフス菌, に サルモネラ菌. したがって、これらの微生物を単離することが望まれる場合、とりわけＸＬＤ寒天のような他の手段が使用されるべきである。.索引1財団1.1ブライトグリーン寒天1.2ブライトグリーン寒天（BGA）の亜種2準備3用途・用途4品質管理5参考文献財団明るい緑色の寒天培地を構成する各成分は、寒天の特性と特性を決定する特定の機能を持っています.プルリペトナと酵母エキスは、微生物がその発生に必要な窒素とミネラルを摂取する場所からの栄養源です。ラクトースとスクロースはそれらを発酵させることができる微生物のエネルギー源です. 明るい緑色はグラム陽性菌と多数のグラム陰性菌の発生を防ぐ抑制物質です。.塩化ナトリウムは培地に浸透安定性を提供する。フェノールレッドはpHの指標ですが、炭水化物の発酵から酸の生成を検出すると色が変わります.ラクトースおよびスクロースの非発酵コロニーは、赤色、背景色がピンク色または透明の白色のこの培地で成長する。例えば、サルモネラ属の細菌.ラクトース発酵細菌またはスクロースはこの培地中で増殖することができるが、それらは黄緑色の背景上に緑黄色または緑黄色のコロニーを発達させる。例えば, 大腸菌および肺炎桿菌.ブライトグリーン寒天（BGA）の変種明るい緑色の寒天の他の変種があります。ノボビオシンアガーブライトグリーングリセロールラクトース（NBGL）.ノボビオシン寒天明緑色グルコース （NBG）トリプチケース・ソイ寒天、クエン酸第二鉄アンモニウム、チオ硫酸ナトリウム五水和物、フェノールレッド、グルコース、ブライトグリーン、ノボビオシン、蒸留水を含む.便検体からサルモネラ菌コロニーを分離するのに役立ちます.この場合、明るい緑色とノボビオシンはグラム陽性菌といくつかのグラム陰性菌の増殖を防ぐ阻害物質です。.チオ硫酸ナトリウムは硫黄源であり、クエン酸第二鉄は鉄源であり、両方とも硫化第二鉄の黒色沈殿物の形成を通して硫化水素の生成を明らかにするために必要である。.グルコースは発酵性炭水化物で、フェノールレッドはpH指示薬です。.この培地では、サルモネラ菌コロニーが大きく発達し、黒い中心が赤みを帯びたハローに囲まれ、その後にはっきりと見える領域が続きます。のいくつかの株 Citrobacter freundii サルモネラ菌と同一のコロニーを生成する.鮮緑色のノボビオシン寒天グリセロールラクトース（NBGL）この培地には、トリプチケース・ソイ寒天培地、クエン酸第二鉄アンモニウム、チオ硫酸ナトリウム、ラクトース、グリセロール、ブライトグリーン、ノボビオシンおよび蒸留水が含まれています。.この培地と前の培地との違いは、グルコースがラクトースとグリセロールに置き換えられ、フェノールレッドが使用されていないことです。.この培地はサルモネラ種を単離するのにも使用され、コロニーは硫化水素の生成によって黒くなります。.グリセロールまたはラクトースから酸を生産しないコロニーのみがH生産を達成する2pHが低いとHの生成が妨げられるので十分です。2S.これは、ほとんどのプロテウス種およびシトロバクター種にとって無色のコロニーをもたらす。. 準備-市販の脱水媒体５８グラムを量る。再蒸留水1リットルに入れてください。混合し、数分間放置して、それが完全に溶解するまで調製物を熱源に提出する。.-121℃で15分間オートクレーブします。滅菌時間を超えないでください。.-無菌のペトリ皿に入れて温めても召し上がれ最終pHは6.9±0.2であるべきです.-固化させ、使用するまで冷蔵庫に保管してください。プレートを植える前に室温にする必要があります.-粉末媒体は緑色であり、pHおよび商業住宅に応じてオレンジ - 茶色または赤緑色を帯びるように準備されている。非常に茶色い色は寒天が過熱されたことを示しています.-寒天が固まったら、培地が劣化するので、作り直すことはお勧めできません。.用途・アプリケーションこの培地は、とりわけ、便試料および乳製品からサルモネラ属の株の検索に使用される。.それはかなり不愉快な環境であるので、直接サンプルが使用されるならばそれは豊富な接種物を植えることが賢明です。そうでなければ、標本の事前濃縮と濃縮は、この培地に植える前に行われるべきです. サルモネラ菌のいくつかの菌株は阻害されたり成長が困難であるため、この培地にサルモネラ菌用の他の選択的寒天培地を添加することをお勧めします。.特徴的なサルモネラ菌を含むすべてのコロニーは、最終的な同定のために生化学的試験を受けなければなりません.品質管理明緑色寒天培地の良好な機能を試験するために、ATCC株を用いてその上での同じものの発生を観察することができる。.品質管理に使用される最も頻繁な株は以下のとおりです。 Salmonella enteritidis ATCC 13076,...
寒天TSIの基礎、準備および使用
の TSI寒天 または鉄の三糖寒天培地はグラム陰性桿菌の最初の同定を導く生化学的試験として役立つ固体培地です。それは存在する糖の発酵、および硫化水素とガスの生産を証明することに基づいています.その組成と基礎はクリグラー鉄テストと非常に似ていますが、後者はグルコースとラクトースのみを含んでいるという違いがあります。その代わりに、その名が示すように、三重鉄鉄は三つの発酵性炭水化物を含んでいます：グルコース、ラクトースおよびスクロース。. さらに、TSI培地には、非常に栄養価の高い寒天培地となる4つのタンパク質誘導体、酵母エキス、肉エキス、ペプトン、プロテオースペプトンが含まれています。硫酸第一鉄アンモニウム、チオ硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム、フェノールレッド、寒天も含まれています。.微生物が培地中に存在するグルコースを発酵することができないことは、それが腸内細菌科に属することから直ちに除外される。したがって、この検定は属と種を決定するためにどの識別経路をとるべきかを決定するために不可欠です。.各実験室は、それがTSI寒天培地またはKligler寒天培地のどちらで機能するかを決定します.索引1財団1.1塩化ナトリウムと寒天1.2 pH指示薬（フェノールレッド）1.3タンパク質誘導体（酵母エキス、肉エキス、ペプトン、プロテオースペプトン）1.4炭水化物（グルコース、ラクトース、スクロース）の発酵1.5ガス生産1.6チオ硫酸ナトリウムと硫酸第一鉄アンモニウム（硫化水素の製造）2準備3つの用途4シード5制限6参考文献財団各化合物は培地内で機能を果たします。.塩化ナトリウムと寒天塩化ナトリウムは、媒体の浸透平衡を維持するために必要です。寒天は固体の一貫性を与えますが.PH指示薬（フェノールレッド）調製された培地のｐＨは７．３にバランスされ、そしてｐＨ指示薬（フェノールレッド）は６．８未満で黄色に変わる。これは、糖の発酵によって生成された少量の酸が培地を赤橙色から黄色に変えることを意味します。.発酵が起こらなければ、ペプトンの使用による培地のアルカリ化が起こり、赤橙色から濃い赤へと変わります。.タンパク質誘導体（酵母エキス、肉エキス、ペプトン、プロテオースペプトン）細菌がＴＳＩ寒天中に存在するタンパク質を代謝すると、反応が酸素を必要とするので、培地をアルカリ化するアミンが生成される（主に斜面レベルで）。アミンがベゼルを強い赤に変える.しかし、これは炭水化物を発酵するかどうかにかかわらず細菌の能力に依存します. 炭水化物の発酵（グルコース、ラクトース、スクロース）糖の発酵の研究はいくつかの画像を与えることができ、それぞれは異なって解釈されます。テストの解釈は、微生物を3つのカテゴリーに分けます：非グルコース発酵槽、非ラクトース発酵槽およびラクトース/スクロース発酵槽.培地中のグルコースの量は限られているが、ラクトースとスクロースの濃度は10倍高いことに注意すべきである。.それがエネルギーのための最も簡単な炭水化物であるので、腸内細菌科の細菌および他のグルコース発酵微生物はこの糖を発酵し始めるでしょう。. 一方、ラクトースとスクロースは複雑な炭水化物であり、それらはエンブデン - マイヤーホフサイクルに入ることができるように分解されそしてグルコースに変換されなければならない。.-非発酵グルコース微生物接種された微生物がグルコースを発酵することができないとき、はるかに少ないが他の炭水化物を発酵することができません。したがって、ここでは酸は形成されませんが、ペプトンの使用によりベベル部にアミンが形成されます。.この場合、ベベルはより強い赤に変わり、チューブの底部は変化しないままか、アルカリ化されて、赤いチューブ全体を残すことができます。.解釈：K / Kは、アルカリベベル/アルカリまたは中性バックグラウンドを意味します記事の冒頭にある画像でチューブDの画像を参照してください.この結果は、微生物が腸内細菌科に属していないことを示しています.-ラクトース/スクロースの非発酵微生物バクテリアがグルコースを発酵させることができるがラクトースまたはスクロースを発酵させることができないならば、以下は起こります：細菌は約6〜8時間後に存在するすべてのグルコースを消費し、ベベルとタコスの両方を酸性化することができます。つまり、寒天は完全に黄色に変わっているでしょう。しかし、グルコースが枯渇してラクトースとスクロースを使用できなくなると、バクテリアはタンパク質の代謝を始めます。.この反応は酸素を必要とし、それ故ペプトンの劣化は表面（ベベル）で起こる。生成されたアミンは黄色から赤色に変わることでベゼルをアルカリ化します。この反応は、インキュベーションの18〜24時間後に証明されます.解釈：K / Aは、アルカリベベルとアシッドタコスを意味します.記事の冒頭にある画像でチューブBの画像を参照してください.-ラクトース/スクロース発酵微生物 明らかに、ラクトースおよびスクロースを発酵することができる微生物はグルコースを発酵することができる。培地中に存在する最小量のグルコースが使い果たされた後、形成されたピルビン酸塩はクレブスの好気性サイクルを通して代謝し始めて酸を形成し、そして８〜１２時間の間に全ての培地は黄色になるであろう。.バクテリアがラクトースまたはスクロースを分解することができるならば、酸は作り出され続けます、そして、18から24時間後に全体の管 - くちばしとタコス - は黄色のままです.グルコースの使用は2つの方法で行われることに注意する必要があります。1つはチューブの斜面で好気性の形態で、もう1つはチューブの底で嫌気的に.解釈：A / Aは酸面取り/酸底を意味します。それはガスを提示するかどうか.記事の冒頭にある画像でチューブAの画像を参照してください.ガス生産いくつかの微生物は糖の発酵中にガスを生成することができる。ガスは寒天の内側にかかる圧力によって管の中で証明されます。圧力は泡の形成や寒天の移動を引き起こします。時々ガス形成は媒体を破壊できます.TSI培地を播種するときに、それが底に達するまで寒天の中心できれいに作られていることが重要です。パンクがチューブの壁に向かって方向を変えられると、それは誤って形成されたチャネルを通って逃げるので、それはガスの生産において誤ったポジティブを引き起こす可能性がある。.寒天斜面で起こる反応と同様にガスの生産は酸素を必要とします、それ故にそれは綿の栓で管を覆うことを推奨します、そして、ベークライトのふたが使われるならば、それは完全に調整されるべきではありません....
寒天Thayer Martinの基礎、準備および使用
の セイヤーマーティン寒天 それはのための非常に栄養価が高くそして選択的な固体媒体です Neisseria meningitidisおよびNeisseria gonorrhoeae。 どちらも病原性または臨床的に重要なナイセリアとして知られています.Thayer Martin寒天の最も重要な特別な機能の1つは栄養補助食品のその高い含有量です。 Neisseriasは栄養の観点から非常に要求の厳しい微生物であり、したがって一般的な培地では増殖しないため、この特性は不可欠です。. 一方、これらの微生物は通常、非無菌領域に見られるため、ナイセリア属の発生に影響を与えることなく、付随するフローラの増殖を妨げる阻害剤の添加が必要である。.この寒天培地は、GCベースの寒天培地、ヘモグロビン、追加の栄養補助食品、および抑制性物質（抗生物質と抗真菌剤）の複合体から構成されています。商業住宅はそれぞれのサプリメントを別々に販売しています.この培地に植えるサンプルは、探している微生物によって異なります。に ナイセリア 淋病 理想的なサンプルは膣分泌物と尿道分泌物です。の間 髄膜炎菌 最も使用されているサンプルは、CSF、咽頭および鼻咽頭滲出液です。.索引1財団 1.1 GCベース寒天1.2ヘモグロビン1.3強化サプリメント1.4抑制剤2準備2.1オリジナルThayer Martin Agar2.2寒天Thayerマーティンの修正3使用4品質管理5制限6参考文献財団 ナイセリア属菌は、厄介な微生物として分類されているため、それらの単離は困難です。このため、ThayerMartínは複雑な媒体であり、その各コンポーネントは以下で説明される機能を果たします。GCコア寒天GC寒天は、プロテオースペプトン、コーンスターチ、塩化ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸一カリウムおよび寒天を含みます。その成分は、微生物開発のための基本的な栄養素を提供して、有毒な脂肪酸を中和して、浸透バランスを維持して、pHを定義して、そして環境に堅実な一貫性を提供するのに貢献します. ヘモグロビンヘモグロビンは、第Ｖ因子および第Ｘ因子（それぞれニコチンアミドアデニンジヌクレオチドＮＡＤおよびヘミン）を提供する。したがって、この環境では、ヘモフィルス種も成長します。ヘモグロビンは、脱水形態で市販されているか、または新鮮な脱フィブリン化ウシ血液を培地に添加することができる。.強化サプリメント一方、ベース寒天培地に含まれる栄養素はナイセリア属の要件を満たすのに十分ではないため、濃縮サプリメントをThayer-Martin培地に添加する必要があります。.最も一般的に使用されている強化サプリメントはisovitalexと呼ばれています。それはグルタミン、アデニン、NAD、コカルボキシラーゼ、グアニン、硝酸第二鉄、p-アミノ安息香酸、ビタミンB...
寒天TCBSの基礎、調製および使用
の TCBS寒天 特にVibrio細菌の単離と培養に使用される、高度に選択的で異なる固体培地です。 コレラ菌、V. vulnificus そして V. parahaemolyticus この属の主要な病原体として.頭字語ＴＣＢＳは、チオ硫酸クエン酸胆汁スクロースを意味する。この寒天はビブリオの選択培地としても知られています。オリジナルの式は中西によって作成され、後で小林によって修正されました. それは酵母エキス、肉ペプトン、トリプテン、クエン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、牛胆汁、スクロース、塩化ナトリウム、クエン酸第二鉄、ブロモチモールブルー、チモールブルーおよび寒天からなる。.この組成物は水、糞便および食品サンプルからのビブリオ種の十分な開発を可能にします。を除いて ビブリオ・ホリサエ, それはこの媒体では成長しません。さらに、ＴＣＢＳ培地は他の付随する細菌、特に大腸菌群の増殖を抑制することができる。.ビブリオ属のいくつかの種が生み出す深刻な胃腸および腸外の問題のために、それらの診断は非常に重要である。人間は主に生または調理不足の海産物または汚染された水の消費によって感染していますが、創傷の感染によっても感染しています.このため、臨床検査室では、液体の便サンプルの便培養の研究にTCBS寒天を含める必要があります。特に患者が海水と接触した、または魚介類や魚を消費したと報告した場合.索引1財団2準備3使用4シード5制限6品質管理7参考文献財団酵母エキス、肉ペプトン、トリプチンがこの培地の栄養源です。しかし、TCBS寒天培地はほとんどの細菌にとって不愉快な培地です。. その高い選択性は、クエン酸ナトリウムと酸化胆汁酸の添加によって得られます。どちらも抑制剤であり、アルカリ性のpHを培地に与え、付随する植物相の増殖を制限し、そして増殖を促進します。 コレラ菌, 他の種の中で。それは注意する必要があります コレラ菌 胸焼けに非常に敏感です.その部分については、塩化ナトリウムは浸透圧的に媒体に対してバランスがとれている。さらに、その濃度が高いので、それは阻害剤としても働き、好塩菌の増殖を促進します。.スクロースは、ブロモチモールとチモールブルーの青いpH指示薬と一緒になって、培地に異なる特徴を与える発酵性の糖です。このため、これにより、スクロース発酵株と非発酵株とを区別することが可能となる。.スクロース発酵株のコロニーは黄色を発色し、酸の産生により培地を緑色から黄色に変える。非発酵槽は半透明になり、培地は元の色（緑）のままです。.同様に、この培地は硫黄源としてチオ硫酸ナトリウムおよび顕色剤としてクエン酸第二鉄を含有する。どちらも硫化水素（無色の気体）を産生することができる細菌を示しています。 H2Ｓはチオ硫酸塩から形成され、後にクエン酸第二鉄と反応すると可視の黒色沈殿物が形成する。.最後に、寒天は培地に固体の粘稠度を与えるものです。.準備脱水媒体89 gを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。加熱と頻繁な攪拌によって溶解を助けます。混合物は2分間煮ることができます.この培地はオートクレーブにかけません。それが溶解した後、それは滅菌プレート上に直接供給される。固化するとき、それらはプラークメーカーの中で逆さに配置され、それらが使用されるまで冷蔵庫（２〜８℃）に貯蔵される。.調製後の培地はpH 8.6±0.2であるべきです.脱水された媒体の色は薄ベージュか緑がかったベージュであり、媒体の色はフォレストグリーンか青緑色です.サンプルを蒔く前にプレートを焼き戻したままにしておくことが重要です。.使用するビブリオを分離するための最も一般的なサンプルは下痢便です.それらが選択培地上にすぐに播種することができない場合便サンプルは、ケアリーブレアの真ん中に輸送する必要があります.培養液の感受性を高めるために、糞便を濃縮培地としてpH 8.4のペプトン水に最大8時間通過させ、そこからTCBS培地に継代培養する。.また、ビブリオの一部の株は免疫抑制患者に敗血症を引き起こす可能性があるので、それらは血液培養から単離することができることにも留意しなければならない。同様に、コレラ病の流行がある場合には、海からの水と食物のサンプルを分析することができます。....
大豆寒天トリプチカーゼの基礎、調製および使用
の トリプチカゼイン大豆寒天 またはトリプチケースソイ寒天培地は、固体の非選択的かつ栄養価の高い培地です。これは、英語のトリプチケース・ソイ寒天の頭字語でTSAという文字で表されています。それはトリピン、大豆ペプトン、塩化ナトリウムおよび寒天から成っています.その高い栄養力のために、それは適度に要求と非要求の微生物の栽培に理想的です。追加のサプリメントを含まない培地は初代培養にはお勧めできませんが、純菌株を継代培養し、それらを生存可能な状態に保つために非常に役立ちます。. また、特に寒天の診断に必要な溶血のパターンを観察し、オプトキンとバシトラシンの分類群をマウントする必要がある場合、この寒天は血液寒天などの濃縮培地の調製の基礎として機能します。 肺炎球菌 そして 化膿連鎖球菌 それぞれ.他方、抗生物質と組み合わせると、混合フローラを有する試料から臨床的に重要な通性的かつ厳密な嫌気性微生物を単離するのに有用である。.最後に、トリプチカゼイン大豆寒天の組成とその性能は、さまざまな薬局方（ヨーロッパ、日本、北米）によって確立された要件を満たしています。.索引1財団 2準備2.1トリプチカゼイン大豆寒天プレート2.2血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート2.3加熱血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート2.4トリプチカゼイン大豆寒天のくさび3つの用途4シード5品質管理5.1無菌管理5.2成長管理 ５．３血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天培地の増殖制御および溶血パターン6参考文献財団 細菌の適切な発達のためには、アミノ酸、ビタミン、プリン塩基、ピリミジン酸などのエネルギー寄与の存在が必要です。.この意味で、トリプテンと大豆ペプトンはこれらの栄養素を微生物に供給し、それによってそれらの完全な発達を可能にします。しかし、要求の厳しい細菌のためには、その濃縮度を高めるために、この寒天に脱繊維血または加熱血を補給する必要があります。.一方、抗生物質が培地に添加されると、それは選択培地になる。シスチンテルライトを加えながら、リステリア属の種の単離を促進するために0.6％酵母エキスを加えることもできます。 そして 子羊の血液は理想的です コリネバクテリウム・ジフテリア.最後に、塩化ナトリウムは培地に浸透圧バランスを与え、寒天は固体のコンシステンシーを与える。. 準備トリプチカゼイン寒天プレートトリプチカゼイン大豆寒天を調製するために、40グラムの脱水された市販の培地をデジタルスケールで秤量する必要があります。フィオラに含まれる蒸留水1リットルに溶けます.混合物を５分間放置し、次に媒体の溶解を助けるために熱源に持って行く。それは頻繁にかき混ぜられ、1または2分間煮沸するために放置されるべきです。続いて、培地をオートクレーブ内で１２１℃で１５分間滅菌する。.50℃に冷却し、滅菌ペトリ皿に分配する。固め、ひっくり返し、プラークに並べ、冷蔵庫に保管しましょう.培地の最終pHは7.3±0.2であるべきです.脱水培地の色は薄いベージュ色で、乾燥した場所で10〜35℃に保存する必要があることを考慮に入れる必要があります。.その部分のために、準備された寒天は薄琥珀色です。調製したプレートは使用するまで冷蔵庫（2〜8℃）に保存してください.プレートは使用前に室温に達している必要があります.血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレート血液寒天は、トリプチカゼイン大豆寒天を５０℃に冷却する際に５％の脱繊維化血液を添加することによって調製される。混合物を穏やかな動きで回転させることによって均質化する。.滅菌ペトリ皿に入れてください。媒体の色はチェリーレッドであるべきです.加熱血液を添加したトリプチカゼイン大豆寒天プレートＴＳＡベースの血液寒天を調製するために、上記の手順は同じであるが、オートクレーブを出るとき、それは培地の温度が約５６〜７０℃の間になるまで放置される。その時に血液が入れられ、培地が茶色に変わるまで混合される.滅菌ペトリ皿に入れる。媒体の色はチョコレートブラウンです.トリプチカゼイン大豆寒天のくさび寒天を調製するための手順は、ペトリ皿に培地を供給する代わりに、滅菌する前にベークライト蓋をしたチューブに10〜12 mlの間で分配されることを除いて、プレートについて記載したものと同じである.続いて、チューブを121℃で15分間オートクレーブにかける。去るとき、彼らはサポートの助けを借りて傾いて、彼ら自身が固まるのを許します.準備されたくさびは表面によって播種され、決められた時間の間、特定の要求の厳しい生存微生物を維持するのに役立ちます.用途次のような場合に、トリプチカゼイン大豆寒天が使用されます。-ほとんどの研究室で日常的に使用されている古典的な血液寒天培地を調製するためのベースとして.-要求の厳しい細菌の分離. -溶血パターンの観察.-診断テストの実行.-特別な血液寒天培地用の基礎として コリネバクテリウム・ジフテリア, テルルシスチン そして...
寒天血液ファンデーション、使用および準備
の 血液寒天 それは濃縮された固体培地であり、異なるが選択的ではない。臨床サンプルや継代培養からの多種多様な微生物の回収と増殖に使用されます。.実験室で受け取ったほとんどの臨床サンプルの播種には、古典的な血液寒天培地を含める必要があります。特定の変更を加えて準備されていない限り、それが有用ではない便試料を除く. この培地は基本的に濃縮ベース寒天と5％血液で構成されています。寒天のベースは必要に応じて変えることができますが、主にペプトン、アミノ酸、ビタミン、肉エキス、塩化ナトリウム、寒天などで構成されます。.血液に関しては、通常、ヒツジ、ウサギ、ウマなどの動物から血液を採取するためにバイオテルミアと接触する必要があります。しかし、これは必ずしも可能ではなく、時には人間の血液が使われます.血液寒天培地は実験室で調製することができ、またはそれ専用の会社のためにすぐに購入することができる。この培地の調製は最も繊細なものの一つであり、その調製に不注意があると汚染されたバッチになる.すべての可能な予防措置を講じる必要があるのはこのためです。そして最終的には品質管理は準備される100ごとに37℃1プレートでインキュベートされるべきです.索引1財団2つの用途2.1血液型の選択2.2寒天の種類の選択2.3調製に使用した基本培地に応じた血液寒天の使用3準備3.1計量して溶かす3.2滅菌する3.3血液の凝集3.4ペトリ皿に注ぐ4参考文献財団血液寒天培地は濃縮された、差別的かつ非選択的培地であるという特徴を有することは既に述べた。これらの各プロパティの基盤については、以下で説明します。.血液寒天培地は、寒天ベースに5〜10％の血液を主な添加物として含むため、濃縮培地です。両方の化合物は多くの栄養素を含んでいます、そしてこの特性はそれの中で培養可能なバクテリアの大部分が成長することを可能にします.その成長は制限なしに起こります。このため、非選択的です。しかしながら、いくつかの微生物の増殖を妨げ、他の微生物の増殖を促進する化合物がこの培地に添加される場合、それは選択的になる。これは、特定の種類の抗生物質や抗真菌剤が添加されている場合です。.同様に、血液寒天培地は、β溶血性、α溶血性およびγ溶血性の3種類の細菌を区別することができるので、異なる培地です。.ベータ溶血剤は、赤血球を溶解または完全に破壊し、コロニーの周囲に明瞭なハローを形成し、β溶血またはβ溶血を生じさせる溶血 - 溶血および微生物をβ溶血といいます。.β溶血性細菌の例は 化膿連鎖球菌 そして Streptococcus agalactiae. アルファ溶血剤は、ヘモグロビンがメトヘモグロビンに酸化されてコロニーの周りに緑色がかった色を生成する部分溶血を行うものです。この現象は溶血αまたはα溶血として知られており、細菌はα溶血として分類されます。.α溶血性細菌の例は 肺炎球菌 そして 連鎖球菌 グループの ビリダン. 最後に、ガンマ溶血性または非溶血性と呼ばれる細菌があります。これらは寒天上で変化を生じることなく成長します、γ-溶血として知られている効果、そして微生物はγ-溶血性です.γ-溶血性細菌の例：D群の連鎖球菌のいくつかの株（Streptococcus bovisとEnterococcus faecalis）.用途血液寒天培地は、微生物学研究室で最も一般的に使用されているものの1つです。.血液寒天培地上で増殖することができる微生物の中には、厳密な、通性の、微好気性の、嫌気性の、グラム陽性またはグラム陰性の好気性細菌、急速増殖性または低速増殖性細菌がある。.栄養的観点から要求が厳しいかまたは厄介ないくつかの細菌、ならびに真菌および酵母もまた増殖する。同様に、代謝的に非常に弱い系統を継代培養または再活性化することは有用である。.ただし、血液型と寒天培地の選択は、回復が疑われる可能性のある微生物およびプラークの使用法（培養または抗生物質）によって異なります。.血液型の選択血は子羊、ウサギ、ウマ、人間のいずれでもかまいません.いくつかの例外を除いて、最も推奨されるのは子羊の血です。例えば、推奨される血液がウマまたはウサギであるヘモフィルス種を分離するために、子羊の血液は第V因子を阻害する酵素を持っているので.最も推奨されないのは人間ですが、最も利用されているのはおそらくそれが最も入手しやすいからです。. 血液は除細動され、いかなる種類の添加物もなく健康な動物から得られなければなりません。人間の血液を使用するためには、いくつかの要因を考慮する必要があります。血液が細菌感染症を患ったことがある人から来ている場合、彼らは特異的な抗体を持っているでしょう。これらの条件下では、いくつかの細菌の増殖は阻害される可能性があります。.それが血液バンクから得られるならば、それはクエン酸塩を含んでいます、そしてそれは特定のバクテリアがその存在下で発達しないことは可能です。一方、血液が抗生物質を服用している患者から来ている場合は、感受性細菌の増殖を抑制することができます.そしてもし血液が糖尿病の人からのものであれば、過剰なグルコースは溶血パターンの適切な発達を妨げます。.ベース寒天タイプの選択血液寒天の調製に使用されるベース寒天は非常に幅広くあり得る。それらの中には、栄養寒天、ブレインハートインフュージョン寒天、トリプチケースソイ寒天、ミューラーヒントン寒天、セイヤーマーティン寒天、コロンビア寒天、ブルセラ寒天、カンピロバクター寒天などがある。.その調製に使用される基本培地に応じて血液寒天の使用栄養寒天このベースは、使用頻度が最も少ないのです。なぜなら、その上には、腸内細菌などの主に要求のない細菌が生育するからです。, シュードモナスsp, 黄色ブドウ球菌、バチルス種, とりわけ。連鎖球菌を分離することはお勧めできません.ハートブレインインフュージョンアガー（BHI）それはを含むほとんどの細菌の成長に必要な栄養素を持っているので、それは血液寒天培地の基礎として最も使われているものの一つです。 連鎖球菌sp そして他の要求の厳しいバクテリア。溶血のパターンを観察するのは適切ではありませんが.子羊の血液は通常、このベースで使用されています.他の化合物が特定の微生物を単離するために添加される場合、血液寒天変異体もまた調製され得る。例えば、ウサギの血液、シスチンおよびグルコースを補給したブレインハートインフュージョン寒天培地は、単離に役立つ。 Francisella...
寒天サルモネラ - 赤痢菌の基礎、調製および使用
の サルモネラ・シゲラ寒天 SS寒天としても知られている、環境および臨床サンプルの両方から、Salmonella属およびShigella属の腸内病原性細菌を単離するために特別に設計された、中程度に選択的かつ異なる培地です。.SS寒天は複雑な組成をしています。それは肉抽出物、ペプトン、ラクトース、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、クエン酸第二鉄、寒天、ニュートラルレッド、鮮緑色および蒸留水からなる。その高い選択性を考えると、豊富な混合植物相でサンプルを植えることが可能です。. 微生物学研究所では、サルモネラ - シゲラ培地が下痢の糞便、下水、飲料水および食品のサンプル中のサルモネラ菌およびシゲラの存在を調べるために広く使用されています。.サルモネラ菌株を回収するために、濃縮前のブロス（ラクトースブロス）と濃縮（亜セレン酸シスチンブロス）の使用が必要な場合があります。.サルモネラ菌の存在が非常に少量であると疑われる場合、または工業生産に典型的なプロセス、主に加工食品によって菌株が誤処理される可能性がある場合、これらのステップが必要です。抗生物質で治療された患者の便検体を濃縮することもお勧めです。.続いて、濃縮ブロスをサルモネラ - シゲラ寒天およびキシロース寒天、デオキシシロキサンリシン（XLD）および腸溶性ヘクテン寒天（HE）のような他の同様の培地に播種することができる。.索引1財団1.1栄養力1.2一貫性1.3選択的1.4差動2準備3使用 4制限5品質管理6参考文献財団Salmonella-Shigella培地の各成分は特定の機能を持ち、混合物全体としてそれを特徴付ける特性を与えます。.栄養価肉抽出物とペプトン（消化されたカゼインと動物組織）は、残りの成分に耐えることができる微生物の開発に必要な栄養素（窒素、炭素とビタミン）を供給します。. 一貫性寒天は培地に堅実な粘稠度を提供する責任があります。.選択的この培地は、胆汁酸塩、クエン酸ナトリウム、および鮮やかな緑色を含んでいるので、非常に選択的です。したがって、それはすべてのグラム陽性菌およびいくつかの大腸菌群を含むグラム陰性菌の大部分の増殖を阻害する。.サルモネラ属の細菌およびいくつかの赤痢菌の菌株はこれらの化合物を支持するが.主に、サルモネラ属は胆汁酸塩に対して非常に耐性があるので、それらは糞便を通して細菌を絶えず排出する何人かの保因者患者の胆嚢に住むことができます。.差動ラクトースは、ラクトース発酵株と非発酵株を区別するのに役立つ発酵性炭水化物です。この特性は、この媒体中でフェノールレッドであるpH指示薬の存在によって証明される.ラクトース発酵株は赤色のコロニーを与え、非発酵株は無色です。サルモネラ菌と赤痢菌は乳糖を発酵させないため、この特性は重要です。.一方、この培地は、硫黄源としてチオ硫酸ナトリウムおよび鉄源としてクエン酸第二鉄を含有する。両化合物は、硫化水素を生成することができる細菌を識別することができる。これらは反応して、不溶性かつ可視の硫化鉄の黒色沈殿物を形成する。.この特性は、サルモネラ属のいくつかの株を有する。通常、それらのコロニーは無色の平らで、中心に黒い点があります。サルモネラの残りの部分はHを産生しない2無色コロニーとしてSおよび発達する.一方、シゲラ属のコロニーは黒色化することなく無色の平らである。.準備これは準備がとても簡単なことを意味します.63グラムの脱水した市販の培地を量り、1リットルの蒸留水に溶かします。溶液を加熱してかき混ぜる。混合物は数分間沸騰する可能性があります.この培地はオートクレーブにかけないでください。溶解後、シングルまたはダブルの滅菌プレートに直接供給されます。.固化するとき、それらはプラークメーカーの中で逆さに配置され、それらが使用されるまで冷蔵庫（２〜８℃）に貯蔵される。.調製後の培地はpH 7.2±0.2でオレンジレッドになるはずです.サンプルを蒔く前にプレートを焼き戻しできるようにすることが重要です。元のサンプルに直接播種して寒天の一部に材料を排出し、そこから枯渇によってストリートを得る.濃縮ブロスを使用する場合は、亜セレン酸ブロスの一部を通過させてdrigalskiスパチュラで播種する。.好気中で37℃で24時間インキュベートする. 重さを量るグラムの量と培地の最終的なpHは、商業施設によって異なります。培地のベースプレートは常にその準備のための徴候をもたらします.使用する それは頻繁に便の文化の分析でそして残留水サンプル、飲料水および食糧の微生物学的研究で使用されます.しばしば二重プレートが調製され、一方の側にサルモネラ - シゲラ寒天が配置され、他方の側にXLD寒天が配置される。.制限事項-赤痢菌のいくつかの株はこの培地では増殖しない。したがって、この属の一次単離には推奨されません。.-黒い中心を持つすべての明確なコロニーがサルモネラ菌を示すわけではありません。プロテウスのいくつかの株のコロニーはサルモネラ菌のコロニーと区別がつかないので、生化学的試験は正しい同定をするために行われなければならない。.-脱水媒体は吸湿性が高いので、環境への暴露には注意が必要です。したがって、それは乾燥した密閉された環境に保たれなければならない。ごく短期間営業.-時間が経つにつれて培地中の胆汁酸塩が沈殿し、寒天内でつや消しに似た画像を形成することがありますが、これは結果に影響を与えません.-赤痢菌のいくつかの株はゆっくりとラクトースを発酵することができる.品質管理培地が正しく機能していることを証明するために、既知または認証された対照株を植えて、成長が予想される特性を満たすかどうかを観察することをお勧めします。. この目的のために、 大腸菌、エンテロバクターsp、肺炎桿菌、flexleri赤痢菌、ネズミチフス菌 ○ エンテロコッカス・フェカリス. 期待される結果は以下のとおりです。大腸菌...
