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生物学 - ページ 156
寒天ヘクトーンの基礎、調製および使用
の ヘクトーン寒天 または腸溶性ヘクテン寒天培地は、固体の、選択的かつ異なる培地です。それは、Shigella属およびSalmonella属の腸内病原性細菌を単離するために、KingおよびMetzgerによってHektoen Instituteで作成された。.培地は、プロテオースペプトン、酵母エキス、胆汁酸塩、ラクトース、スクロース、サリシン、チオ硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸鉄、クエン酸アンモニウム、ブロモチモールブルー、アシッドフクシンおよび寒天からなる。この製剤は、シゲラ属とサルモネラ属をこの培地で増殖することができる残りの細菌と区別することを可能にする。. Hektoen寒天培地と同じ機能を持つ他の手段がありますが、これは特にShigella種を回収したいときに他の手段と比較してより大きな利点を示します。.両方の属の種は、汚染された食物の消費のためにヒトにおいて深刻な胃腸の問題を引き起こします。したがって、伝染は糞便です。ヘクトーン寒天培地の使用が主に便や食品サンプルの微生物学的分析に示されるのはそのためです。.索引1財団2準備3使用 4品質管理5制限6参考文献財団Hektoen寒天は、栄養源としてペプトンと酵母エキスを含み、微生物開発に不可欠な要素を提供します。.しかしながら、それはまた、いくつかの細菌、特にグラム陽性菌およびいくつかのグラム陰性菌の増殖を阻害することによって作用する胆汁酸塩も有する。それが選択的媒体と考えられるのはこの理由のためである. 一方、ヘクトーン寒天培地はディファレンシャル培地です。この性質は、ブロモチモールブルーおよび酸性フクシンによって代表されるpH指示薬系と共に、ラクトース、サッカララおよびサリシンなどの発酵性炭水化物の存在によって与えられる。.サルモネラ属およびシゲラ属に属さない、この培地中で増殖することができる全ての細菌は、プロテウス属を除いて、サーモンまたはオレンジ色のコロニーを発生する。これは、存在する1つまたは複数の炭水化物が発酵して培地が酸性になり、pHインジケーターが変化するためです。.その部分については、シゲラ属とサルモネラ属は、環境をアルカリ化し、それゆえそのコロニーが青緑色であるエネルギー源としてペプトナのみを使用して、存在する炭水化物のいずれにも発酵することができない。.また、この培地中には硫化水素(無色の気体)を形成することができる区別される細菌があり得る。チオ硫酸ナトリウムは硫黄源として作用し、クエン酸鉄は顕在化剤です。両化合物は硫化鉄の黒色沈殿物の形成を可能にし、それは反応を証明する。.コロニーの中心の黒い沈殿物とその周囲の透明なハローは魚眼の外観を与えます。この特徴は、サルモネラ属の存在を示唆している.最後に、塩化ナトリウムは浸透圧バランスを維持し、寒天は培地に固体の粘稠度を与える。.準備76gの脱水媒体を秤量し、1リットルの蒸留水に溶解する。混合物を激しく振とうした後、10〜15分間静置します。それは加熱して煮沸することができ、完全に溶解するまで回転運動を与える。この培地はオートクレーブ処理されていません.培地が約45℃の温度に達したら、20mlの容量を滅菌ペトリ皿に直接注ぐ。.寒天を固化させる。その時点で彼らは使用の準備ができています。すぐに使用することをお勧めします。不可能な場合は、使用するまで冷蔵庫に保管してください。.プレートを植える前に、プレートを冷蔵庫から早く取り出して室温に戻します。.培地のpHは7.5±0.2でなければなりません。脱水された媒体の色は紫色で、準備は茶色がかった緑色です。.使用する Hektoen寒天培地の使用は、糞便および食品サンプル中のShigella属およびSalmonella属の細菌の検索に推奨されます。.試料が、亜セレン酸ブロス、亜セレン酸シスチンブロス、テトラチオネートブロスなどの特別なブロスで予め濃縮されている場合、これらの細菌を単離する可能性は非常に高まる。. 接種材料は強くなければならず、播種は条縞によって行われる。プレートをエアロビオシス中で37℃で24〜48時間インキュベートする。.コロニーの特性は、現時点でのそれらの解釈と区別のためにより明確であるため、インキュベーションは48時間推奨されています.品質管理この培地の品質管理を実施するために、以下のような公認の細菌株が使用されます。 ネズミチフス菌 ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, シゲラフレックスネリ ATCC 12022および 赤痢菌 ATCC...
寒天遠藤の基礎、調製および使用
の 遠藤寒天 または培地Endoは、ある程度の選択性を有する固体の示差培養培地です。元の製法は乳糖発酵性細菌と非発酵性細菌を区別するために1904年に遠藤によって作成されました。初めはそれはの分離のために設計されました サルモネラ菌, しかし後にメディアの目的は大腸菌群の検索に向いた.遠藤寒天の原理は維持されていますが、その配合は長年にわたって無数の変化を遂げてきました。現在、培地はペプチドで消化された動物組織、ラクトース、リン酸水素二カリウム、亜硫酸ナトリウム、塩基性フクシンおよび寒天で構成されています。. この培地の主な用途は、腸内細菌科に属するグラム陰性桿菌および近隣の他の科に属するグラム陰性桿菌の単離および識別に関連している。.長い間、それは水、乳製品および食品サンプル中の大腸菌群の検出に使用されていたが、今日ではこの媒体の使用は他の同様の機能によって置き換えられてきた。しかしながら、いくつかの微生物学研究所は臨床起源のサンプルから腸内細菌科の単離のためにこの寒天を使用する.索引1財団2準備2.1遠藤寒天2.2寒天m-Endoの変種3使用4品質管理5制限6参考文献財団Endo agarには、必須ではない微生物の増殖に必要なアミノ酸、窒素、炭素、エネルギーの供給源となるペプトンが含まれています.他方、寒天のわずかに選択的な特徴は亜硫酸ナトリウムと塩基性フクシンの添加によって提供される。両方の成分が部分的または全体的にほとんどのグラム陽性菌の発育を阻害します. 異なる特徴は、この場合はラクトースおよび塩基性フクシンである発酵性炭水化物の存在によって与えられ、これはpHの指標としても役立つ。.この寒天上で成長し、ラクトースを発酵させることができるグラム陰性菌は、強いピンク色のコロニーを形成します。の病原性 大腸菌 緑色の金属光沢がある虹色の暗赤色のコロニーの形成。これは炭水化物の発酵からの酸の高生産のためです.コロニー周辺の培地も濃いピンク色に変わることに注意してください。ラクトースを含まない、発酵していないグラム陰性桿菌は、中程度または無色に似た薄いピンク色のコロニーを形成.リン酸水素二カリウムは培地のpHのバランスをとり、寒天は固体の粘稠度を提供する成分です。.準備遠藤寒天脱水媒体41.5グラムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。媒体が完全に溶解するまで頻繁に撹拌して混合物を加熱する。オートクレーブで121℃、15ポンドの圧力で15分間滅菌する。.オートクレーブから取り出すときは、約45〜50℃の温度に冷却し、混合する前に混合物を振ってホモジナイズします。滅菌ペトリ皿に20mlを注ぐ.プレートを固化させ、反転させて箱に入れるか、または暗い紙で包んでから冷蔵庫に入れます。直接光から準備された媒体を保護することは非常に重要です。推奨される方法は、必要となる正確な量を準備することです。.冷蔵庫に保管されている場合は、使用前にプレートを焼き戻す必要があります。.培地のpHは7.2から7.6の間でなければならず、調製された培地の色は薄いピンク色です。.バリアント寒天m-EndoMcCarthy、Delaney、Grassoの処方に従ったEndo agar(m-Endo)のもう1つのバージョンがあります。.この変異種は含まれています:ラクトース、トリプトース、カゼインの酵素消化、動物組織の酵素消化、塩化ナトリウム、二塩基性リン酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、酵母エキス、リン酸一カリウム、塩基性フクシン、デオキシコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウムと寒天.この場合、51 gの脱水媒体を秤量し、20 mlのエタノールを含む1リットルの蒸留水に懸濁します。.媒体が完全に溶解するまで撹拌しながらわずかに加熱する。過熱したり、オートクレーブで滅菌したりしないでください。混合物が均質になったら、滅菌ペトリ皿に入れて固化させる。. 使用するいくつかの国では、それはまだ水や食品サンプル中の総および糞便性大腸菌群の計数に使用されています。 大腸菌 糞便汚染の主な指標として.M-Endo寒天培地は、消毒および排水処理プログラムのモニタリングおよび管理、ならびに飲料水の水質の評価において、米国公衆衛生協会(APHA)によって推奨されています。.最も使用されている方法は、サンプルをラウリル硫酸ブロスで2〜4時間濃縮した後の膜ろ過です。.それはまた最も確からしい数の技術(NMP)による食糧および水の微生物学的分析において、特に寒天の存在を確証するための完全な確認段階において、EMB寒天培地の代わりとして使用することができます。 大腸菌 濁ったECブロスから.品質管理調製した遠藤寒天バッチの品質を評価するために、既知のまたは認証された対照株を播種する。.この目的のために使用することができる株の中には、次のとおりです。 大腸菌 ATCC 25922,...
寒天EMBの基礎、調製および使用
の EMB寒天培地 は、腸内細菌科、主に腸内細菌科のグラム陰性桿菌、およびその他の非要求性グラム陰性桿菌の単離に使用される選択的かつ異なる固体培地です。頭字語EAMとしても知られています、これはエオシン - メチレンブルーを意味します.この培地は、1916年にHolt-Harris and Teagueによって作成されました。ペプトン、ラクトース、スクロース、リン酸二カリウム、寒天、エオシン、メチレンブルー、水が含まれています。特に、Levineで修飾されたEMB寒天培地を使用する場合は、MacConkey寒天培地と非常によく似ています。. 実際、生化学的には異なりますが、それぞれの検査室は同じ機能を果たしているので、どちらを使用するかを決定します。.それは、プロテウス属による大量生産の点で、古典的なマッコンキー寒天培地と同じ欠点さえも提示する。したがって、この現象を回避するために、寒天の濃度を最大5%まで上げることができます。.索引1財団1.1選択的1.2差動2準備3つの用途4品質管理5最後の検討事項6参考文献財団選択的EMB寒天培地は、阻害剤として作用するアニリン染料(エオシンとメチレンブルー)を含み、ほとんどのグラム陽性菌と一部の要求の厳しいグラム陰性菌の増殖を防ぐため、微妙に選択的です。.しかしながら、この寒天はグラム陽性菌の中には阻害物質の存在に抵抗し、小さな無色の点状のコロニー、例えば エンテロコッカス・フェカリス そしていくつか ブドウ球菌.次のような特定の酵母を栽培することもできます。 カンジダアルビカンスコンプレックス, それは非常に小さなピンク色のコロニーを与えるでしょう。サンプルが深さで播かれるならば、クラミド胞子でさえこの酵母から発生することができます. 差動他方、EMB寒天はまた、これらの染料(エオシンおよびメチレンブルー)が一緒になって酸性pHで沈殿物を形成するという性質を有するので示差培地でもあり、したがってそれらはそれらの生産の指標として役立つ。.したがって、弱発酵のラクトースまたはスクロース細菌は、24〜48時間で紫色のコロニーを形成します。例えば、クレブシエラ属、エンテロバクター属、セラチア属.以下のような、ラクトースを強く発酵させる細菌 大腸菌, として、またはスクロース エルシニア・エンテロコリチカ ○ プロテウスペネリ, 緑がかった黒い沈殿物を形成し、これらの種に特徴的な金属光沢を与える.EMB levine mediumを使用する場合(スクロースなし), エルシニア・エンテロコリチカ...
寒天は標準的な基礎、準備および使用法を有する
の スタンダードアカウント寒天 は、飲料水、廃水、牛乳飲料などの食品中に存在する好気性微生物負荷を定量するために設計された、固体の非選択的培地です。この培地はEnglish Plate Count Agarの頭字語でPCA寒天としても知られています。 1953年にBuchbinder、Baris、Goldsteinによって作成されました。.標準的な寒天培地は、酵母エキス、トリプテン、グルコース、寒天、蒸留水で構成されています。この配合は現在の好気性微生物負荷の開発を可能にする基本的な栄養素を含んでいます。. 培地にはインヒビターが含まれていないため、バクテリアは何の制限もなく発育することができるので、一般的なコロニー数には理想的です。しかしながら、プレート定量化技術は、存在する全ての細菌を検出するのではなく、標準的な播種寒天培地がさらされる環境条件下で増殖することができるもののみを検出するであろう。.この意味で、プレート定量化技術は、一般的に好気性中温型細菌、すなわち、25〜40℃の温度で増殖し、37℃の最適増殖温度で増殖するものの量を決定しようとしている。.この細菌グループは非常に重要です、なぜなら人のための病原菌のほとんどがあるからです.食品中に存在する好冷細菌の量を定量化することが時には興味深いかもしれないことに注意すべきです。これらの細菌は低温で発生するものです同様に、50℃〜80℃以上の範囲で増殖する好熱性細菌は、缶詰などの特定の種類の食品では重要になる可能性があります。.微生物定量は、サンプル1グラムまたは1ミリリットルあたりのコロニー形成単位(CFU)で表されます。.索引1財団2準備2.1プレート注入技術2.2植栽用3使用3.1プレート注入技術(深さでシード)3.2表面に蒔かれたテクニック4品質管理5制限6参考文献財団酵母エキス、トリフェインおよびグルコースは良好な微生物開発に必要な栄養素を提供するので、標準的な計数培地は要求のない好気性細菌の満足のいく開発を可能にするように設計されています. 一方、培地は鮮明な色と透明な外観を持っているため、ディープシード(プレートへの注ぎ込み)の方法によって開発されたコロニーを表示するのに理想的です。.ドリガルスキーのスパチュラで表面に播種する方法でコロニーを数えることも可能です。.微生物負荷が高い場合、CFUを数えるために研究対象のサンプルの10進希釈をしなければなりません.この媒体は、アメリカ公衆衛生協会(APHA)によって好気性中温菌の計数に推奨されていることに注意してください。.準備脱水媒体23.5グラムを量り、蒸留水1リットルに溶かす。混合物を完全に溶解させるためには、沸騰するまで頻繁に撹拌しながら加熱しなければならない。以下のステップは、使用されるシーディング技術によって異なります.プレート流し込み技術試験管に12から15mlを分注することによって分配する。その後、121℃のオートクレーブで15分間滅菌します。ブロックの形で垂直方向に固化することができます。使用するまで冷蔵庫に保管する.使用する予定のキューを溶かします。サンプルが調製されている間、溶けたら、44〜47℃のウォーターバスでそれを保ちます.表面に植えるため121℃のオートクレーブで培地を滅菌してから、滅菌ペトリ皿に20ミリリットルを配布します。固化し、転倒させて使用するまで冷蔵庫に保存する.使用前にプレートを焼き戻します。培地のpHは7.0±0.2であるべきです.使用する寒天標準計数は、水と食物の微生物学的分析の間の好気性中温菌計数技術で使用されます。それは研究中のサンプルの衛生的な品質を決定するので、好気性中温菌の計数は必要です.(この媒体を使用して)この技術を適用すると、それらの定量化のために単離されたコロニーの巨視的可視化が可能になる。.プラーク注入技術(深さでシード)-手続きこの手法は次のもので構成されています。1)存在する細菌を再分配するために試料を均質化する。.2)最初の懸濁は、滅菌バイアルまたはバッグ中で、90mlの希釈剤中の10gまたは10mlのサンプルの比率を考慮して行われる(10ml)。-1).3)最初の懸濁液から、サンプルの種類に応じて適切な10進希釈が行われます。例:(10-2, 10年-3, 10年-4)希釈はペプトン水またはリン酸緩衝液で行われます.これを行うには、最初の懸濁液を1 ml取り、9 mlの希釈液に入れます。必要ならば希釈を続けます。ここで1 mlの希釈液を取ります。-2 など.4)各希釈液1mlを取り、空の滅菌ペトリ皿に入れる。.5)各プレートに、予め融解して44〜47℃に設定した12〜15mlの標準計数寒天を添加する。.6)サンプルを寒天に均一に分配し、固化させるためにプレートに滑らかな回転運動を与える。. 7)プレートを逆にし、エアロビオシス中37℃で24から48時間インキュベートする。.8)時間が終了したら、プレートを調べてそれを可能にする希釈液中のコロニーを数えることに進みます。それは30から300 CFUの間にあるそれらのプレートを数えるために選ばれます.計数は手動で行うことができ、またはコロニー計数装置を使用することができる。.サンプル1mlあたりの許容値は、それらが管理されている基準に応じて国によって異なります。.-UFCの計算一般的な計算は次の式を使って行われます。 結果を1桁または2桁で表し、適切な基数10を掛けます。例:結果が16.545の場合、3桁目に基づいて17.000に丸められ、次のように表されます。1.7 x 104....
寒天CLEDの基礎、用途および調製
の CLED寒天 (シスチン - ラクトース - 電解質 - 欠損)は、尿路感染症の診断に使用されるディファレンシャル固体培地です。培地の組成は、尿中病原体の良好な増殖のために設計されており、コロニー形成単位(CFU)の定量化に理想的です。.グラム陰性菌およびグラム陽性菌もその中で増殖することができるので、CLED培地は非選択的である。しかし、これは問題ではありません、ほとんどの尿路感染症は単一タイプの微生物によって引き起こされているからです。. 多菌感染症の場合、2〜3種類のバクテリアが得られますが、まれであり、ほとんどの場合汚染されたサンプルです。.この培地で増殖することができるグラム陰性菌の中には、家族に属する桿菌があります。 腸内細菌科 尿路病原体は、尿サンプル中で最も頻繁に分離されます。 大腸菌、肺炎桿菌、プロテウス・ミラビリス, Morganella morganii, 緑膿菌, とりわけ.同様に、この培地で増殖することができるグラム陽性菌の中には 黄色ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌、大便連鎖球菌、ストレプトコッカス・アガラクティエ、コリネバクテリウム属、ラクトバチルス属 そして彼らは複合体のように酵母を育てることさえできます カンジダ・アルビカンス. しかしながら、培地の化学組成のために、それはいくつかの要求の厳しい尿生殖器病原体の増殖を可能にしない。 淋菌,...
シモンズクエン酸塩寒天の基礎、調製および使用
の シモンズクエン酸塩寒天 それは微生物、特にグラム陰性桿菌を同定するための生化学的試験として使用される固体培地です。元の媒体は1923年にコーザーによって作成されました.Koserのクエン酸塩培地は、リン酸ナトリウム、リン酸アンモニウム、リン酸一カリウム、硫酸マグネシウムおよびクエン酸ナトリウムを含むブロスからなっていた。. 理解できるように、培地中の唯一の炭素源はクエン酸塩であり、そして窒素はリン酸アンモニウムであり、タンパク質および炭水化物はこれらの元素の供給源として省略されており、それらは他の培地中に一般に存在する。.したがって、その培地に接種された細菌は、それがクエン酸炭素を摂取することができる場合にのみ繁殖することができる。培地に濁りがあれば試験は陽性であったが、非特異的な濁りが生じる可能性があるという不都合があった。.この問題は、Koserのオリジナルの処方にSimmonsが寒天とブロモチモールブルーを追加することで解決されました。原理は同じですが、解釈が異なります.索引1財団1.1播種モード1.2解釈 2準備3使用4最後の検討事項4.1接種材料4.2播種4.3色の濃さ5参考文献財団いくつかの細菌は、発酵または乳酸の生産がなくても生き残る能力を有し、他の基質の使用を通してエネルギーを得る必要がある。この試験で提供される唯一の炭素源はクエン酸塩です。.これらの条件下で生き残ることができる細菌は、トリカルボン酸サイクルまたはクエン酸発酵サイクルを使用して、伝統的な経路に代わるものを介してクエン酸を迅速に代謝する。. 細菌によるクエン酸塩の異化は、補酵素Aの介入なしに酵素的メカニズムを構成する。この酵素は、クエン酸(クエン酸オキサロ酢酸リアーゼ)またはクエン酸デスモラーゼとして知られている。反応は二価カチオンの存在を必要とし、それはこの場合マグネシウムにより供給される。.反応はオキサロ酢酸およびピルビン酸を生成し、それは次に窒素源の使用により形成されるアルカリ性pHの中間で有機酸を生じる。これらの有機酸は炭酸塩や重炭酸塩を生成する炭素源として使われ、さらに培地をアルカリ化します。.播種モードシモンズクエン酸塩培地は、直線ループまたは針を用いて魚の尾部に軽く接種し、そして35〜37℃で24時間インキュベートするべきである。結果が観察される時間の終わりに.播種は寒天の表面にのみ行われます。パンクしない.解釈 培地が元の色(緑色)で目に見える成長がない場合は、テストは陰性ですが、培地が青色に変わる場合は、pH指示薬によって検出されるアルカリ性生成物の存在を示します。この場合、テストは陽性です. これは、細菌がクエン酸の炭素を使用している場合、アンモニアを放出するリン酸アンモニウムの窒素も吸収し、培地をアルカリ化することができるために起こります。.他方、培地中で細菌の増殖が観察されたが色の変化がない場合、試験は陽性と見なされるべきである。増殖があればそれは細菌が炭素源としてクエン酸塩を使用することができたことを意味する。現時点ではpHの変化はありませんが(時にはそれがかかる場合があります).最終色の解釈に疑問がある場合は、接種されていないクエン酸塩の試験管と比較することができます。.準備1リットルの水に対して24.2グラムの脱水媒体を量ります。混合して約5分間放置します。頻繁に攪拌しながら、1〜2分間加熱して媒体の溶解を完了します。.試験管に4ml入れ、121℃で15分間オートクレーブする。オートクレーブを離れるときは、寒天がひび割れや底のない、より傾斜したフルートのピークの形で固まるように、サポートを使って傾けます.クエン酸塩培地の最終pHは6.9(緑色)である。この培地はpHの変化に非常に敏感です.pH 6以下では、培地は黄色に変わります。この色はバクテリアによるテストでは観察されません.そしてpH 7.6以上では、培地は強いプルシアンブルーに変わります。. 使用するシモンズクエン酸塩寒天培地は、特定の微生物、特に腸内細菌科に属する桿菌および他のグルコース非発酵桿菌の同定に使用される。. 最終検討事項シモンズクエン酸培地は、特定のエラーが発生した場合に偽陽性が得られる可能性があるため、非常に繊細なテストです。.注意が必要なのは次のとおりです。接種物他の培地に影響を与えずに、植える場所に黄色の銅色が発生する可能性があるため、非常に濃いまたは負荷のある細菌接種物を作らないでください。しかし、それは成長があるという信念につながる可能性があります。テストの陽性を意味するものではありません.同様に、死にかけているバクテリアの細胞壁の中に予め形成された有機化合物がpH指示薬を変えるのに十分な炭素と窒素を放出することができるので、厚い接種物は偽陽性を生成することができます.したがって、理想は、余分な材料を使わないようにするために、プラチナハンドルの代わりに針を使って植えることです.播種他方、問題の微生物の同定のために一連の生化学的試験が植えられているとき、他の媒体からのタンパク質または炭水化物の引きずりを避けるために、クエン酸塩試験が最初に接種されることが重要である。. 誤って導入されたこれらの物質のいずれかが代謝されてpHの変化を引き起こすので、この状況下では偽陽性を得ることが可能である。.物質の引きずりを防ぐもう1つの方法は、ハンドルをしっかりと燃やして、1つのテストと別のテストの間に新しい接種材料を接種することです。.植菌を行うためにコロニーに触れるときにも注意を払う必要があります。寒天の一部を細菌が由来する培養液から引きずらないようにするためです。.この意味で、Matsen、SherrisおよびBransonは、クエン酸塩テストを接種する前に他の炭素源の移動を避けるために接種材料を生理学的溶液で希釈することを推奨しています。.色の濃さ試験が陽性であるときに生成される色の強度は、商業施設によって異なる可能性があることを考慮に入れる必要があります。.さらに、24時間で陽性反応を示す微生物もありますが、pHを変化させるのに48時間以上かかるような菌株もあります。.参考文献Mac Faddin J.(2003)。臨床的に重要な細菌の同定のための生化学的試験第3版社説Panamericanaブエノスアイレスアルゼンチン.Forbes B、Sahm D、Weissfeld A.(2009)。ベイリー&スコットの微生物学的診断12編社説Panamericana S.A.アルゼンチン.Koneman E、Allen...
寒天チョコレートの基礎、用途および調製
の チョコレート寒天 それは固体の、濃縮された、非選択的かつ非分化的培地である。それはあらゆるタイプの細菌を育てることができるが栄養の観点から要求の微生物の隔離のために主に使用されています.そのため、CSFや関節液など、通常は無菌のサンプルの播種においてその有用性が特に高まります。それはまた、多微生物サンプルを播種するために選択された手段の中に含まれていますが、これらの場合には、付随する植物相を阻害する抗生物質を加えることが必要です。. この媒体はチョコレートと非常によく似た特徴的な褐色をしているので、その名前です。準備は血液寒天に非常に似ています、この場合だけ赤血球が壊れるように血液を加熱しなければなりません.血液寒天のようなその調製は、それが容易に汚染されるので、非常に繊細です。このため、多くの研究所では、品質を保証する商業用住宅ですでに準備されているこの培地を入手することを好みます。.索引1財団2つの用途2.1コロンビア寒天培地で調製したチョコレート寒天培地2.2 GCベース寒天で調製したチョコレート寒天(淋菌用)2.3MüellerHinton寒天で調製したチョコレート寒天2.4 Thayer Martin寒天培地で調製したチョコレート寒天3準備3.1計算3.2計量して溶かす3.3滅菌する3.4血液の凝集3.5血液を使わずにチョコレートアガーを作るもう一つの方法4品質管理5参考文献財団この培地は、栄養分が豊富な寒天と加熱された血液で構成されています。赤血球の溶血は、属などのいくつかの微生物の増殖に必要な第X因子(ヘミン)および第V因子(NAD)を提供します。 血友病. それはまたの分離のために非常に有用です Neisserias sp.血液寒天のように、必要に応じて様々な培地を基本寒天として使用できます。最も推奨されるのはコロンビア寒天培地、ミューラーヒントン、GC寒天培地およびThayer Martin寒天培地であるが、使用される培地の中にはブレインハートインフュージョンおよびトリプチケースソイ寒天培地がある。.チョコレート寒天のいくつかの変種は、IsovitalexまたはPolivitexと呼ばれる市販の強化サプリメントを含みます.これらのサプリメントはビタミンBを含みます12年, L-グルタミン、アデニン、塩酸グアニン、p-アミノ安息香酸、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NAD)、チアミンピロリン酸、硝酸第二鉄、塩酸チアミン、塩酸システイン、L-シスチンおよびグルコース. チョコレート寒天は血液寒天よりも濃縮されているが、溶血パターンの観察はできないことに注意することが重要です。.用途 Columbia寒天を使用したチョコレート寒天この培地はカゼインと心臓の膵臓で消化された食肉ペプチド、塩化ナトリウム、寒天、酵母エキスとコーンスターチを含みます。ビタミン、ミネラル、必須アミノ酸も豊富です.加熱された血液を含むこの塩基は、ナイセリア属の細菌の単離に理想的です。一方、ブルセラのサプリメントを培地に添加すれば、上記の微生物を単離することができる。馬の血を使用すると結果が改善されます.GCベース寒天で調製したチョコレート寒天(淋菌用)この培地はペプトン、コーンスターチ、一塩基性および二塩基性緩衝液、塩化ナトリウムおよび寒天を含んでいます.市販されているほとんどのチョコレートアガープレゼンテーションにはこのベースが含まれており、加熱された血液は含まれていませんが、ヘミンと成長因子、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、V因子、グルコースの化学的サプリメントの合成混合物が含まれます。.MüellerHinton寒天で調製したチョコレート寒天それはのような要求の厳しい微生物の抗菌剤感受性試験を実行するために使用されます。 肺炎球菌 5%加熱ラム血を使用.それはまたナイセリア属とヘモフィルスの一次単離にも役立ちますが、 血友病 ウマ血液の使用は、それが第X因子および第V因子の豊富な供給源であるので、好ましい。.一方、播種するサンプルが非滅菌領域からのものである場合は、その領域の通常の細菌叢を抑制するために抗生物質を添加することをお勧めします。.属の細菌の存在が疑われる呼吸器サンプルの例 血友病 バシトラシンはの成長を抑制するのに使用されています ブドウ球菌、ミクロコッカス、レンサ球菌...
Cetrimida寒天ファンデーション、調製、用途
の セトリミド寒天 またはcetrimideはのために設計されている選択的な固体培地です、 緑膿菌. それはこの種に特徴的な顔料の生産を強調することに基づいていて、King、Ward、およびRaneyによって作成されたTech agarの改良から開発されました.元の処方は、塩化マグネシウム塩、硫酸カリウム、膵臓ゼラチン消化および寒天を含んでいた。式の修正は、セトリミド(セチルトリメチルアンモニウムブロミド)およびグリセロールの添加からなる。. セトリミド寒天はサンプルの微生物学的研究に有用です。 緑膿菌. この細菌は通常の環境微生物叢の一部ではあるが、日和見病原体のように振舞うことが多いので、この細菌は非常に重要であることに留意すべきである。.したがって、この病原菌によって引き起こされる最も一般的な問題の1つは、院内感染症です。つまり、病院環境内で発生し、免疫システムが低下している患者を攻撃します。.一方、この微生物は湿気と親和性があるため、最も影響を受けやすい汚染対象は次のとおりです。補助呼吸器械、薬、ネブライザー、水源、エアコン、消毒剤、石鹸液、注射液、開放創傷、カテーテル、尿道カテーテル、.この意味で、セトリミド寒天は微生物学的管理を行いそして以前に命名された要素に収穫するのに有用である。.索引1財団1.1解釈2準備3つの用途4シード5制限6品質管理7参考文献財団Cetrimideの寒天は培地の成長を促進する能力に基づいています 緑膿菌, それらの色素の生産を刺激し、そして順番に他の微生物の成長を抑制します. これらの特性は、その各構成要素が果たす機能によるものです。存在するゼラチンペプトンは、窒素、ビタミン、ミネラルの供給源として機能します。グリセロールまたはグリセリンは炭素源として働きます.その部分のために、セトリミド(臭化セチルトリメチルアンモニウム)は他のバクテリアの成長を阻害する物質です。 緑膿菌, 同じ属に属する他の種を含む.セトラミドはカチオン性界面活性剤として作用し、ほとんどのバクテリアの原形質膜を不安定にするので、阻害が起こる。 緑膿菌 そしてなんとか生き残ることができる他の何人か.一方、塩化マグネシウムと硫酸カリウムが含まれています。これらの化合物は、その能力に関連する表現型の発現を刺激する。 緑膿菌 ピオシアニン、ピオベルジン、ピオルビン、ピオメラニンおよびフルオレセイン:それらの中の様々な顔料の製造方法。最後に、寒天を含み、しっかりとしたコンシステンシーが得られます。.解釈この寒天培地で得られた増殖の解釈は、次のようにして行われます。青緑色、緑色、褐色または赤みを帯びた色素を生成する規則的な縁を有する円形の滑らかなコロニーの観察、およびフルーティーな臭い(アミノアセトフェノン)の放出は、前記試料中のこの細菌の存在の推定結果である。.一方、それは 緑膿菌 プレートが紫外線にさらされたときのコロニー上の明るい黄緑色の色素の観察. 観察された各色は特定の顔料の生成によるものであることに留意すべきである。青緑色顔料は、ピオシアニン、緑色からピオベルジン、赤色からピロールビン、褐色からピオメラニン、および紫外光下の鮮やかな黄緑色のフルオレセインの生成に対応する。.準備脱水媒体43...
寒天BHIの基礎、準備および使用
の BHI寒天 またはブレインハートインフュージョン寒天培地は、栄養価の高い固形培地です。スペイン語では、それをブレインハートインフュージョン寒天と呼びます。これは非選択的培地であり、これは、あらゆる種類のグラム陽性菌およびグラム陰性菌、ならびにいくつかの酵母菌および糸状菌を開発することができることを意味する。.それは、子牛の脳および心臓の注入、動物組織の消化性加水分解物、カゼイン膵臓加水分解物、塩化ナトリウム、グルコース、リン酸二ナトリウムおよび寒天からなる。. BHI寒天培地は、細菌検査室で最も頻繁に使用される培地の1つです。それは初代培養、他の選択培地で得られたコロニーの継代培養として、または実験室での菌株の維持のために、補足なしで使用することができます。.一方、血液寒天培地やチョコレート寒天培地などの濃縮培地を調製する際のベースとして使用するのに理想的な培地です。どちらも栄養の観点から要求の厳しい微生物を分離するのに理想的です。しかし、それはグルコースを含んでいるので溶血のパターンを観察するのは適切ではないということを考慮に入れなければなりません。.同様に、BHI寒天培地は、一般的な培地では増殖が困難な病原性微生物を単離するための特別な手段の調製に使用できます。 ヘモフィルスsp, Francisella tularensis、Corynebacterium diphtheriaeおよびHistoplasma capsulatum.抗生物質添加剤のBHI寒天培地は、真菌の単離のための選択培地になります。.索引1財団2準備2.1ウェッジ2.2プレート2.3血液寒天の調製3つの用途3.1サプリメントなしでの使用3.2他の培地を調製するためのベース寒天として4品質管理5参考文献財団それは血液や他の栄養補助食品の添加でその濃縮度を高めることができる、適度に要求の厳しい微生物を分離するための栄養価の高い培地です。.それは非選択的培地であり、それゆえそれはほとんどのグラム陽性菌およびグラム陰性菌、ならびにいくつかの真菌の増殖を可能にする。しかし、それは抗生物質の添加で選択的になることがあります. この培地には、子牛の脳と心臓、動物組織由来のペプチド加水分解物、カゼイン膵臓加水分解物が含まれています。これらの化合物はすべて、ビタミン、アミノ酸、窒素、および炭素の供給源として機能します。.グルコースは、発酵した後に微生物にエネルギーを提供する炭水化物です。一方、塩化ナトリウムおよびリン酸二ナトリウムは浸透平衡を維持し、中性に近いpHを提供する。最後に、寒天は培地に固体の粘稠度を与える.準備脱水媒体52グラムを量り、1リットルの蒸留水に溶かす。混合物を沸騰するまで熱源に持って行き、溶解プロセスの間頻繁にかき混ぜる.添加物なしでBHI寒天のくさびか版を準備できます.くさびくさびの調製のために、各チューブの半分を満たすまで調製物を供給し、それらが固化するまでベースの上に横たわるようになるとき、蓋をして121℃で15分間オートクレーブ中で滅菌する。それから使用まで冷蔵庫で保管してください. プレート溶解した混合物を121℃で15分間オートクレーブ処理し、それが出たときにそれを50℃に冷却しそして20mlの培地を滅菌ペトリ皿に入れる。それらは使用されるまで固化し、反転させそして冷蔵庫に貯蔵することが許される。植える前にプレートが室温になるようにする.培地のpHは7.4±0.2であるべきです.準備されていない媒体はベージュ色で、準備されています.血液寒天の調製培地を滅菌した後、約45〜50℃の温度に冷却し、この時点で血液(50ml)を加え、穏やかに混合して均質化し、各ペトリ皿に20mlを無菌的に入れる。泡がプレート上に形成された場合、それらを排除するためにバーナーの炎が泡の上を素早く通過するはずです。.同様に、混合物が45〜50℃の温度に達したときに対応する添加剤を加えることによって特別な培地を調製することができる。.媒体はチェリーレッドです.用途サプリメントなしで使用する無添加のBHI寒天培地は初代培養として、また後で同定するために中程度または中程度の要求がある純粋な微生物株を植えるのに役立ちます.それは淡色の媒体であるので、それは顔料を観察するのに理想的であり、そしてまたそれは妨害物質を含まないので、それはオキシダーゼおよびカタラーゼのような生化学的試験を行うために使用され得る。寒天.同様に、BHI寒天ウェッジは、実験室で一定期間菌株を維持するために広く使用されています(bacterioteca)。.細菌株を表面に植えたプレートまたはウェッジを37℃で24から48時間インキュベートする。一方、真菌では温度と潜伏時間は求められている真菌の種類によって異なります. 他の培地を調製するためのベース寒天としてこのベースで濃縮された選択培地を調製することができます.充実したその主な機能は、微生物検査室での日常的な使用のための血液寒天の調製における基礎として役立つことです。特にBHI塩基は、以下の株の単離に役立ちます。 連鎖球菌sp. しかしながら、それはグルコースを含むので溶血パターンの観察には適さないという欠点を有する。.それはまたの分離のためのウサギまたは馬の血の寒天の準備で使用されます ヘモフィルスsp. より良い結果を得るためには、濃縮サプリメントを追加することができます(IsoVitaleX).サンプルが気道から寒天に由来する場合は、付随する細菌叢を抑制し、菌株の回復の可能性を高めるためにバシトラシンを添加することができます。 ヘモフィルスsp.一方、血液寒天培地(子羊またはヒト)は亜テルル酸塩シスチンを用いて調製することができます。 コリネバクテリウムジフテリア. 同様に、それを単離するためにシスチンとグルコースを添加して、ウサギ血液寒天を調製することは有用です。 Francisella tularensis.血液寒天プレートの播種は、消耗により行われ、そして微好気性(5〜10%CO)中で35〜37℃で24〜48時間インキュベートされる。2).選択的抗生物質を添加したこの培地は、真菌の単離のためにサブロー寒天培地に代わることができます。.BHI寒天培地とクロラムフェニコール(ゲンタマイシンまたはペニシリン)、ストレプトマイシンおよびウマ血液との組み合わせは、...
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