生物学 - ページ 6
ライトのしみの基礎、材料、技術および用途
の ライグスのしみ は、Romanowskyの汚れから、1902年にアメリカの病理学者James Homer Wrightによって作成された着色技法です。 Romanowskyの染色は不安定だったので、Wrigthは溶剤と固定剤としてメタノールを使用しました。.この着色は多色性です。つまり、染料が吸収する構造に応じていくつかの色が生成されます。この染色技術は、白血球の示差計数を行い、そして末梢血および骨髄中の赤血球、血小板および白血球の形態を研究するために広く使用されてきた。. 血液のさまざまな細胞株に異常が見られ、白血病や細菌感染症、寄生虫感染症などの病気の診断が容易になるため、その応用は非常に重要です。.おそらくこれらはこの技術が使用される最も一般的なアプリケーションです、しかしそれらは唯一のものではないです。それはまた、鼻汁、糞便粘液、痰、皮膚などのサンプルのように、血液および骨髄以外のサンプルにおいても有用である。.索引1ライトの汚れの基礎2材料 2.1準備2.2緩衝化緩衝液2.3着色を行うために必要な追加の材料3ライトのしみの成分3.1メタノール3.2ショックアブソーバー3.3エオシン（Y） 3.4メチレンブルー 4テクニック 5実用性5.1血液学5.2鼻汁5.3寄生虫学5.4呼吸器感染症5.5細菌学5.6菌学6血液サンプルの構造はライト染色でどのように観察されますか？?良い染色のための7の推奨事項Wrigthカラーリングの8つの一般的な間違い8.1非常に薄い染色8.2着色剤の沈殿8.3非常に赤みがかった色または青い色の塗抹標本9収納モード10参考文献ライトのしみの基礎ライトの染みは、酸性染料（エオシンY）と塩基性（メチレンブルー）からのメチルアルコールの溶液とその酸化生成物からなるRomanowskyの染みから生まれました。.ライトの染色に使用される染料の混合物は、ロマノフスキーとして知られる効果を引き起こし、すなわち、それは白血球の核および好中球顆粒に美しい紫色の着色を与え、一方赤血球はピンクに染色される。.ライトの染色に典型的な色の範囲を与える原因となる成分は、青BとエオシンYです。観察された効果は、化学構造への色素の結合と青BとエオシンYの相互作用に依存します。.核酸、核タンパク質、一部の細胞型の反応性未成熟細胞質などの酸性構造、フィックスブルーB（塩基性染料）.ヘモグロビン、セグメント化された好酸球の顆粒などの基本構造は、他の細胞構造の中でも、エオシンY（酸性染料）を固定します。.染色の結果は、ライト染料のpH、バッファー、洗浄液など、さまざまな要因の影響を受けます。染色および固定時間.したがって、試薬の調製における各ステップは非常に重要であり、あらゆる細部に注意して行わなければなりません。.材料 ライトカラーリング。 100 mLの場合は必須です。０．３ｇのライト染料を秤量し、９７ｍｌのメタノールおよび３ｍｌのグリセロールを計量する。.準備乳鉢に大量のライト染料を入れ、粉末が完全に溶解するまでグリセロールをゆっくり加える。. 次にメタノールを添加し、混合し、琥珀色の瓶に注ぐ。.ソリューションを使用する前に穏やかな動きとフィルターで振ってください.バッファードバッファー１リットルの蒸留水に、３．７６ｇの二リン酸二ナトリウム（Ｎａ2HPO4 2H20）プラス2.1グラムのリン酸二水素カリウム（KH）2PO4）.取り込まれた試薬がすべて溶解するまでよく混ぜます。 ｐＨを７．２に調整する。ガラス瓶に注ぎ、室温に保つ.着色を行うために必要な追加の材料さらに、他の材料が着色技術を実行するために必要とされます：これらは以下を含みます：物を運ぶシートまたは物を覆う着色、水または洗浄のための緩衝液でのピセタス（吸収紙、ガーゼまたは綿）.ライトステイン成分メタノールアルコール（メタノール）は、スライドへの血液塗抹標本の固定剤として機能します。.基本的にそれは還元剤、脱水剤および凝固剤固定剤です。したがって、その機能は、タンパク質を凝固させて不溶性にすることですが、タンパク質を変性させることはありません。.メタノールは、エタノールで得られるものよりも優れた結果が得られるため、すべてのラボで塗抹標本を修正するために最も広く使用されている試薬です。理想的な濃度は99％です.ショックアブソーバー7.2に調整されたpHは、細胞構造が色素を適切に吸収するために不可欠であるため、緩衝液（緩衝液）は、色素のpHを調整または維持する機能を有する。.他方、メタノール固定の通過は細胞を脱水し、緩衝液はそれらを再水和するのを助ける。.エオシン（Y） エオシンは酸性染料であるため、エオシンは塩基性成分と親和性があります。 2つのタイプのエオシンは互いに非常に似ているので、どちらか一方を使用しても同じ結果が得られます。.一方はエオシンY、黄色エオシンまたはテトラブロモフルオレセインと呼ばれ、もう一方のエオシンB、青みがかったエリスロシンBまたはジブロモジニトロフルオレセインと呼ばれます。しかし、エオシンYが最も一般的に使用されています.この染料の最も重要な特性は、その負の極性です、これは正電荷を持つ細胞構造によって引き寄せられます.メチレンブルー 基本的なカラーリングです。その主な特性は変色性であり、すなわち、すべての構造が同じ色に染色されるわけではない、それはそれが着色していることを構造の化学組成に依存する.いくつかのライトまたはダークブルーと他の暗い紫色または淡いライラックになります.テクニック...
MayGrünwald-Giemsaによる汚れ、テクニックと用途
の 5月Grünwald-Giemsaしみ o PappenheimはGiemsaとMayGrünwaldの試薬を混合したディファレンシャルカラーリング技術です。これは、末梢血および骨髄の塗抹標本における正常および異常な血球の識別、ならびに組織学的切片および細胞学的サンプルの染色に使用されます。.両方の試薬 - GemsaとMayGrünwald - は、Romanowskyタイプの染色、酸性染料と塩基性染料の組み合わせに基づく技術から派生しています。. ギムザは、エオシン、メチレンブルーおよびその誘導体とグリセロールとの混合物を安定化させることによって技術を改善した。対照的に、MayGrünwaldは、溶媒としてメタノールを使用して、エオシンとメチレンブルーを使用します。この戦略的な組み合わせは優れた結果をもたらしました.細胞形態の観察に関してはギムザおよびライト着色と同様に作用するが、この技術はマラリア、シャーガス病、リーシュマニア症およびトリコモナス症を引き起こす寄生虫の着色を微調整することによって以前のものを改良する。.さらに、それは精液の細胞学的研究のための非常に有用な技術であることが証明されています。それは精子の形態学的特徴を示すことによって強調されているだけでなく、非常に効率的に白血球、上皮細胞および精子形成の細胞と区別することを可能にします.索引1財団1.1いろいろな染料2テクニック2.1材料2.2濃厚染料溶液MayGrünwald2.3濃縮ギムザ染料2.4 pH 7.2の緩衝液の調製2.5血液塗抹標本または骨髄染色の手順2.6精子液の拡張彩色テクニック2.7重要な仕様3つの用途 3.1膣細胞診3.2精子サンプル4参考文献 財団この技術はRomanowskyの染みの基礎に従っており、そこでは酸性染料は細胞の塩基性成分に対して選択的親和性を有し、酸性成分は塩基性染料を引き付ける。.別の言い方をすると、細胞構造と色素の両方が正または負の電荷を持っています。等しい電荷は反発し、異なる電荷は引き付けられます.例えば、メチレンブルーのような塩基性染料は正に帯電しており、負に帯電した構造によって引き寄せられる。この染料が、負に帯電したリン酸基を持つDNAとRNAに富む核を染色するのはそのためです。. ＲＮＡを含む単核白血球のセグメント化された好塩基球および細胞質の顆粒もまた染色される。.同様に、酸性染料は負電荷を帯びているため、赤血球やセグメント化された好酸球の顆粒などの正電荷を帯びた構造と結合します。セグメント化された好中球の顆粒に関しては、これらは両方の染料を固定します.さまざまな着色剤この技術では、オルソクロマチック染料とメタクロマチックの間の反応の組み合わせが共存する。オルソクロマティック（エオシンとメチレンブルー）はそれらが関連している細胞構造に結合し、変化しない安定した色を提供します.一方、メタクロマティックス（メチレンブルーの紺碧のAと紺碧のB）は、特定の構造に結合すると元の色が変わり、色合いもさまざまになります。.最後に、メイグリュンワルド溶液によって行われる工程は水の存在を必要とする。なぜならそれがなければ染料は構造体を浸透するが固定されないからである。これが起こるためには、染料は極性またはイオン化されなければならず、したがって沈殿して関連構造に付着することができなければならない。.テクニック材料- スライド用スライド.- 着色橋.- May-Grünwaldの解.- ギムザステイン.- 蒸留水.濃縮染料溶液MayGrünwaldエオシン -...
キンウン染色の基礎と技法
の きんうん染色 それは抗酸菌や酸性寄生虫を染色するために使用される着色技術です。それはZiehl-Neelsenのカラーリングの変更から生まれました。両方の手法は同じように解釈されますが、2つの要素が異なります。主な試薬の調製とKinyoun手法は熱を使用しないという点です。.このため、それは低温修飾Ziehl-NeelsenまたはKinyoun低温染色としても知られています。の着色に表示されます 結核菌, Mycobacterium leprae, 非定型抗酸菌, ノカルジア属sp, Cryptosporidium parvum、Cryptosporidium meleagridis、Cryptosporidium felis、Cryptosporidium muris そして Cyclosporas cayetanensis. それはそれらが部分的に耐酸性アルコールであるので、ノカルジアスはこの技術で弱く染まることを言及する価値があります、それでこのジャンルのために方法論の修正があります.次に、コクイディアの検出のために、KinyounコールドテクニックとDidierによって修正された3色テクニックを組み合わせました（Cryptosporidium parvum e Isospora...
グラム染色ファンデーション、材料、技術および用途
の グラム染色 診断微生物学における最も簡単で最も有用な染色技術です。この手法は、1884年にデンマークの医師Hans Christian Gramによって作成されました。彼は、細胞壁の組成に従って、グラム陽性菌とグラム陰性菌に分類しました。.この技術は、試薬を安定化させそして染色の質を改善するために1921年にHuckerによってある種の修正を受けたので、グラム染色はグラム - ハッカーとしても知られている。. この技術を用いて、微生物が有する形態、すなわち、とりわけ、それらが球菌、桿菌、桿菌、多形性、糸状であるかどうかを観察することも可能である。その空間内分布と同様に、クラスター内、チェーン内、孤立型、ペア内、テトラッド内など。.細菌感染が疑われる場合は、受け取ったサンプルの大部分をスライドに広げ、顕微鏡で検査するためにグラム染色する必要があります。.グラムの報告書は、作物の最終結果を得る前に、どの種類の微生物が感染の原因となり得るかについて医師に指導します。.場合によっては、患者の生活が非常に危険にさらされているため、医師は微生物の同定を待っている間に経験的な治療を行うためにグラムレポートを緊急に必要とします。.例えば、グラムが脳脊髄液にグラム陽性球菌があることを明らかにした場合、医師はそれに対して確立されたプロトコルに従って、このタイプの細菌を排除する抗生物質による初期治療を方向付けるでしょう。.最終的な結果が単離された微生物の名前とそれぞれのアンチビオグラムとともに届くと、医師は治療法を変更するかどうかを評価します。この決定はそれが受けている抗生物質に対する微生物の感受性と患者の進化の研究に従ってなされるでしょう。.索引1財団2材料3染料と試薬の調製3.1クリスタルバイオレット溶液 3.2ヨードルゴール3.3漂白3.4コントラスト4試薬の保管5着色するサンプルの塗布の準備5.1 - 直接サンプルのグラム5.2 - 作物のグラム6テクニック7効用8よくある間違い9参考文献財団これは4つの基本的なステップを提示するテクニックです：染色、媒染剤との固定、変色と収縮。したがって、細菌を着色することに加えて、この技術はまた、それらを区別します.クリスタルバイオレットは最初に使用された着色剤です。それはペプチドグリカンに対して親和性を有し、紫色は存在する全ての細菌を染色し、次いでルゴールが配置され、それは媒染剤として作用する、すなわちそれは細胞内でクリスタルバイオレット - ヨウ素 - リボ核タンパク質の不溶性複合体の形成を誘導する。.ペプチドグリカンの厚い壁を有するグラム陽性菌は、より多くの複合体（クリスタルバイオレット - ヨウ素）を形成し、それ故にそれらは色素を保持する。.グラム陽性菌の壁には、酸化剤に対して高い親和性を示す不飽和酸が多く含まれていることも影響します（Lugol）。.一方、グラム陰性菌はペプチドグリカンの薄層を持っているため、グラム陽性菌よりも細菌が複雑ではありません。.その後、グラム陽性菌とグラム陰性菌の挙動が異なる変色のステップが来ます。.グラム陰性菌は、その細胞壁の一部であるリポ多糖類に富む外膜を含む。脂肪はアルコールアセトンとの接触により破壊されるため、外膜が不安定化し、紫色の結晶が放出されます。.これはどのようにしてそれが色赤を取って、サフラニンまたは塩基性フクシンで対比染色されるかです。.グラム陽性菌の場合、漂白剤が孔を塞ぐように作用し、クリスタルバイオレット／ヨウ素錯体が漏れるのを防ぐので、それらは変色に抵抗する。. それ故、紫色の結晶による着色は安定しており、サフラニンまたはフクシンのための余地はない。このため、これらの細菌は濃い青または紫に染まります。.材料グラムカラーリングセットは以下から構成されています。バイオレットクリスタルルゴールアセトンアルコールサフラニンまたはベーシックフクシン染料および試薬の調製クリスタルバイオレット溶液 解決策A：バイオレットクリスタル-2...
ギムザ染色の基礎、材料、技法および用途
の ギムザステイン 酸性染料と塩基性染料の混合物に基づく、臨床サンプルの染色の一種です。その創設はRomanowskyによってなされた作品にインスパイアされました。そこではドイツ出身の化学者であり細菌学者でもあるGustav Giemsaは、化合物を安定させるためにグリセロールを加えることによってそれを完成させました。.Romanowskyのオリジナルのテクニックに加えられた変更は顕微鏡観察をかなり改善することを可能にしました、それ故にテクニックはギムザステインの名前で洗礼を受けました. それは実行するのが簡単な技術であり、非常に機能的でそして経済的であるので、それは血液学的塗抹標本、骨髄サンプルおよび組織切片のために臨床検査室で現在広く使用されている。.ギムザ染色法は、細胞の特定の構造の観察を可能にするので、細胞学的研究にとって非常に有用である。この技術は、細胞の細胞質、核、核小体、液胞および顆粒を染色し、微細な微量のクロマチンでも区別することができます。.さらに、核の大きさ、形状または着色の有意な変化を検出することができ、そこで核 - 細胞質関係の喪失を視覚化することが可能である。.その一方で、骨髄や末梢血中の未熟細胞を特定することができ、白血病などの重篤な疾患の診断に重要です。とりわけ、寄生虫、細胞外および細胞内細菌、真菌を検出することも可能である。.細胞遺伝学では、細胞の有糸分裂を研究することが可能であるので、それはかなり使われます。.索引1ギムザカラーリングの基礎2材料2.1母液を調製するための材料2.2母液の調製モード2.3緩衝液を調製するための材料2.4染料の最終調製2.5着色に必要な追加の材料3テクニック3.1染色プロセス4ユーティリティ4.1血液学4.2菌学4.3細菌学4.4寄生虫学4.5細胞診4.6細胞遺伝学5ギムザ染色の有効性を実証する研究6良い染色のための推奨事項ギムザの着色における7つの一般的な誤り7.1非常に青い着色 7.2過度にピンク色 7.3塗抹標本に沈殿物がある 7.4形態的アーティファクトの存在8収納モード9参考文献ギムザカラーリングの基礎Romanowskyタイプの染料は、それぞれ塩基性および酸性構造の染色を達成するために、酸性染料と塩基性染料との間のコントラストの使用に基づいている。見て分かるように、基本構造を染色する酸性染料の親和性があり、逆もまた同様である。.使用される塩基性染料はメチレンブルーとその酸化誘導体（Azure AとAzure B）で、酸性染料はエオシンです。.細胞の酸構造は核酸、セグメント化された好塩基球の顆粒などであり、したがってメチレンブルーで染色されます。.これと同じ意味で、細胞の基本構造は、ヘモグロビンおよびいくつかの顆粒、例えばセグメント化好酸球に含まれるものなどである。これらはエオシンで染色されます.他方、メチレンブルーおよびアズールは変色性染料によって特徴付けられるという事実のために、それらはそれらが有するポリアニオンの負荷に従って異なる構造に可変の色調を与えることができる。.これは、塩基性染料と酸性染料の戦略的な組み合わせが、各構造の生化学的特性に従って、酸性構造の場合には淡い青、濃い青、薄紫色、紫の色調を経て、広範囲の色を発色させる方法です。.エオシンによって提供される着色がより安定している間、赤みがかったオレンジとサーモンの間に色を生成する. 材料母液を調製するための材料原液の調製には、アセトンを含まないメチルアルコール500 ccと中性グリセリン50 ccを計る、600 mgの粉末ギムザ染料が必要です。.母液の調製モード重いギムザパウダーを乳鉢に入れます。しこりがある場合は、それらをスプレーする必要があります。続いて、かなりの量の測定されたグリセリンを加えてよく混ぜる。得られた混合物を非常にきれいな琥珀色の瓶に注ぐ。.グリセリンの残りの部分はモルタルに入れます。モルタルの壁に付着している残りの染料をきれいにするために再び混ぜ合わせて、同じ瓶に注ぎます.ボトルにふたをして55℃のウォーターバスで2時間運びます。ベインマリーバスに入っている間、30分かそこら毎に混合物を軽くかき混ぜる.その後、混合物を冷却してアルコールを入れる。以前は、測定されたアルコールの一部を乳鉢に入れて染料の残りを洗い終えた後、残りのアルコールと共に混合物に加えていました。.この製剤は少なくとも2週間は熟成させるべきです。母液の使用部分は濾過しなければならない。.製剤の汚染を避けるために、常時使用する部分をスポイト付きの小さな琥珀色の瓶に入れることをお勧めします。試薬がなくなるたびに充電してください.緩衝液を調製するための材料一方、ｐＨ７．２の緩衝液を以下のように調製する。６．７７グラムのリン酸ナトリウム（無水）を秤量する（ＮａＨＰＯ）。4）、２．５９ｇのリン酸二水素カリウム（ＫＨ）2PO4）および1000 ccまでの蒸留水.染料の最終調製最終染色液の調製のために、２ｃｃの濾過した原液を秤量し、そして６ｃｃの緩衝液と混合する。混合物を撹拌する.考慮に入れなければならない関連する事実は、染料の調製の技術は商業家に従って変わることができるということです。.着色を行うために必要な追加の材料記載された材料とは別に、それはカラーブリッジ、水スクリーンまたは洗濯用緩衝液、物体またはカバーのためのシート、着色時間および吸い取り紙を制御するためのストップウォッチまたは乾燥に使用できる何らかの材料を備えるべきである。ガーゼまたは綿）.テクニック染色プロセス1）着色する前に、サンプルをきれいなスライドに広げておく必要があります。.試料は、血液、骨髄、組織学的組織の切片または頸膣サンプルであり得る。それはそれらを着色する前に外側が薄くて、乾燥の1または2時間を持っていることをお勧めします.2）あなたが着色しなければならないすべてのシートは、着色された橋の上に置かれます。常に同じ順序で作業し、各シートをよく識別してください.３）塗抹標本の上に数滴の１００％メチルアルコール（メタノール）を置き、そして試料を固定しそして脱水するために３〜５分間放置する。.４）シート中に存在するメタノールを捨て、風乾させる。.5）乾いたら、シート全体が覆われるまでスポイトで最終染色液を置きます。 15分間そのままにします。何人かの著者は25分までに推薦する。商業住宅による.6）染料を抜き取り、塗抹標本を蒸留水または7.2緩衝液で洗浄する.７）吸い取り紙の上に、支持体の助けを借りて垂直に配置されたシートを屋外で乾燥させる。.8）アルコールで湿らせたガーゼまたは綿棒でスライドの裏側を拭き、残っている染料をすべて取り除きます。.公益事業ギムザ染色法は、血液学、真菌学、細菌学、寄生虫学、細胞学および細胞遺伝学を含むいくつかの分野で使用されています。. 血液学それはこの染色に与えられる最も頻繁な実用性です。それを用いて、骨髄または末梢血のサンプルに存在するすべての細胞を識別することができます。白血球増加症または白血球減少症、血小板減少症などを検出することができること、各シリーズの数を推定することと同様に.未熟細胞を特定することは敏感であるので、それは急性または慢性白血病の診断に関連している。とりわけ、鎌状赤血球症、鎌状赤血球症などの貧血を診断することも可能である。.菌学この分野では、検索にそれを使用するのが一般的です。 Histoplasma...
胞子染色の基礎、技術および用途
の 胞子染色 不利な状況にあるときにいくつかの細菌属を形成する耐性構造を着色するために使用される方法論である。これらの構造は生き残りの方法に対応します.胞子を形成する属はたくさんあります。しかし、主なものはバチルスとクロストリジウムです。これらの属は、それらがヒトに対して病原性の種を有するので、より関連性があると考えられる。. 各桿菌は胞子を生じさせることができます。調製物を染色する時点で、芽胞は桿菌の内側（内生胞子）またはその外側（外生胞子）に見出すことができる。グラム染色などの従来の細菌染色法では、胞子は無色のままです。.現在のところ、胞子の厚い構造を横切ってそれを染色することができるいくつかの着色方法がある。これらの方法論は非常に多様です。これらの中で我々は、Dorner法、Möeller染色法、そしてWirtz-Conklinとしても知られるShaeffer-Fulton法を挙げることができる。.言及されたすべての技術のうち、Shaeffer-Fulton方法論は日常的な実験室で最もよく使われています。それはその名前を1930年に着色を作った2人の微生物学者：アリシアシェファーとマクドナルドフルトンに因む。しかし、時には1900年代の2人の細菌学者に敬意を表してこの技術がWirtz-Conklinと呼ばれることもあります。.索引1財団2胞子の着色技術 2.1ドーナーのテクニック2.2修正ドーナー法2.3 Shaeffer-FultonまたはWirtz-Conklinのテクニック2.4メラー法2.5熱なしの修正メーラー法3つの用途3.1例4参考文献 財団胞子は非常に厚い壁を持っているので、従来の着色では染まりません。胞子の複雑な構成はほとんどの染料の侵入を防ぎます.胞子を外側から内側に向かって調べると、次のような層が観察されます。第一に、糖タンパク質によって形成される最も薄い外層である外膜層。.それから、高温に対する耐性を提供するクチクラが続き、その後にペプチドグリカンからなる皮質が続く。それからプロトプラストを保護する基盤の壁があります.胞子は、15％のカルシウムとジピコリン酸を含む脱水構造です。それ故、大部分の胞子着色技術は、染料が厚い構造を浸透することができるように熱を加えることに基づいている。.胞子が染色されると、それは染料を排除することはできません。 Shaeffer-Fulton法では、マラカイトグリーンが栄養細胞に入り、熱を加えると内生胞子と外生胞子にも浸透します。. 水で洗浄すると、色素は栄養細胞から除去されます。これは、緑色のマラカイト染料がわずかに塩基性で、栄養細胞に弱く結合するために起こります。. その一方で、それは胞子から出ることができず、最後にサフラニンを含む桿菌は対比されます。この基礎は、似たようなことが起こる残りのテクニックにも有効です。.胞子着色技術 胞子を染色するためには、調べたい疑わしい系統の純粋な文化が必要です。.微生物を胞子形成させるように刺激するために、培養物を２４時間極端な温度にさらす。このためには、培養液を44℃のオーブンまたは冷蔵庫（8℃）に24時間または48時間置くことができます。.言及された温度であまりにも多くの時間が残されている場合、全ての内生胞子が桿菌を離れているので外生胞子のみが観察されるであろう。.時間の終わりに、数滴の滅菌生理的溶液を清潔なスライド上に置くべきである。それから穀物の小さい部分は取られ、良い広がりはなされる. その後それを乾燥させるために放置し、それを熱に固定しそしてそれを以下に説明するいくつかの技術で染色する。ドーナーのテクニック１−試験管中で、蒸留水中の胞子形成微生物の濃縮懸濁液を調製し、そして等容量の濾過されたキンウンフェノールフクシンを添加する。.2- 5から10分間沸騰水で浴槽にチューブを置きます.3-清潔なスライド上で、一滴の前の懸濁液を一滴の10％ニグロシン水溶液と混合し、煮沸し、濾過する。.4-穏やかな熱ですぐに広がりそして乾燥する.5- 100倍対物レンズで検査（液浸）.胞子は赤く染まり、細菌細胞は濃い灰色の背景に対してほぼ無色に見えます。.修正ドーナー法１－胞子形成微生物の懸濁液をスライド上に広げ、熱に固定する。.２−試料を濾紙のストリップで覆い、そこにフェン酸フクシンを加える。蒸気を放出するまで、ブンゼンバーナーの炎で５〜７分間染料を加熱する。それから紙は取り除かれます.3-水で製剤を洗い、それから吸収紙で乾かす.4-ニグロシンまたは針を広げるために2番目のスライドを使用して、10％ニグロシンの薄いフィルムで塗抹標本を覆う.胞子および細菌による着色は、先行技術に記載されているものと同じである。.Shaeffer-FultonまたはWirtz-Conklinテクニック1-スライド上に胞子形成微生物の懸濁液で薄いスプレッドを作り、熱にそれを修正する.2-スライドを5％マラカイトグリーンの水溶液で覆う（濾紙をシートの上に置くことができる）.3-ブンゼンバーナーの炎を加熱して蒸気を逃がし、炎を取り除きます。 6〜10分間操作を繰り返します。手順の間にマラカイトグリーン溶液があまりにも多く蒸発するならば、もっと加えることができます.4-（それが置かれている場合）ろ紙を取り外し、水で洗浄する.5-スライドを0.5％水性サフラニンで30秒間カバーする（技術のいくつかの変形例は0.1％水性サフラニンを使用し、3分間放置する）。. この技術では胞子は緑色で、桿菌は赤色です。.それは非常に透明または無色に見えるので、若い文化の内生胞子はうまく染まらないという欠点があります。これを避けるために、48時間のインキュベーションの培養液を使用することをお勧めします。.メラー法1-塗抹標本をクロロホルムで2分間覆う.2-クロロホルムを捨てる.3- 5％クロム酸で5分間覆う.4-蒸留水で洗う5-シートはフクシン - フェノールコイで覆われ、蒸気が出るまでブンゼンバーナーの炎にさらされます。それからそれはしばらくの間炎から取り除かれます。操作が10分になるまで繰り返されます.6-水で洗う.7-脱色するために酸性化エタノール（塩酸アルコール）を使用する。 20〜30秒放置.8-蒸留水で洗う.9-シートをメチレンブルーで5分間覆う.10-蒸留水で洗う.11-乾燥させたままにし、サンプルを顕微鏡で撮影する.胞子は赤と青の桿菌に見えます。蒸気は有毒であり、長期的には発ガン性がある可能性があるため、蒸気を吸い込まないことが重要です。.熱を加えない修正メラー法2007年に葉山と彼の共同研究者たちは、メラーのテクニックを改良しました。彼らは染料の加熱工程を取り除き、それをフクシン -...
チミンの化学構造と機能
の チミン は、ピリミジンのものから誘導される複素環、２個の炭素原子が２個の窒素原子で置換されているベンゼン環からなる有機化合物である。その凝縮式はCです。5H6N2○2, 環状アミドとDNAを構成する窒素含有塩基の1つ.具体的には、チミンは、シトシンおよびウラシルと共に、ピリミジン窒素含有塩基である。チミンとウラシルの違いは、前者はDNAの構造に存在し、後者はRNAの構造に存在するということです。.デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）は、互いに巻き付けられた２つのヘリックスまたはバンドによって形成される。バンドの外側はデオキシリボース糖の鎖によって形成され、その分子は隣接するデオキシリボース分子の3 'と5'の位置の間のホスホジエステル結合を介して結合している。.窒素含有塩基の１つ：アデニン、グアニン、シトシンおよびチミンはデオキシリボースの１ '位に結合する。一方のヘリックスのプリンアデニン塩基は、２つの水素結合を介して他方のヘリックスのピリミジン塩基チミンに結合または結合している。.索引1化学構造2チミンの互変異性体3つの機能3.1転写3.2遺伝コード3.3健康への影響4参考文献 化学構造最初の図では、チミンの化学構造が表されています。ここでは、複素環式アミドを完成させる2つのカルボニル基（C = O）と2つの窒素原子が示されています。 -CH3）. この環はピリミジンの環（ピリミジン環）に由来し、それは平らであるが芳香族ではない。チミン分子中のそれぞれの原子数は、以下の窒素から始めて割り当てられる。. したがって、C-5は基-CHに結合している。3, Ｃ － ６はＮ － １の左隣接炭素原子であり、そしてＣ － ４およびＣ －...
チラコイドの特徴、構造および機能
の チラコイド それらは、植物の植物細胞、シアノバクテリアおよび藻類の葉緑体内に位置する平たい嚢の形の区画である。それらは通常、グラナ複数形と呼ばれる構造で編成されています。 グラナム- そしてそれはコインの山のように見えます.チラコイドは、前記細胞小器官の内膜および外膜とは別に、葉緑体の第三の膜系と考えられている。この構造の膜は、葉緑体の基質からチラコイドの内部を分離し、そして代謝経路に関与する一連の色素およびタンパク質を有する。.チラコイドにおいて、生化学的反応は、光合成、すなわち植物が日光を受けてそれを炭水化物に変換するプロセスにとって不可欠である。具体的には、太陽光に依存して光を閉じ込めてエネルギー（ATP）とNADPHに変換するフェーズを実行するために必要な機構が膜に固定されています。.索引1一般的な特徴2つの構造2.1チラコイド膜2.2膜の脂質組成2.3膜のタンパク質組成2.4チラコイドの内腔3つの機能3.1光合成の段階3.2光に依存する段階3.3光リン酸化4進化5参考文献 一般的な特徴チラコイドは、葉緑体の内部三次元膜系である。完全に成熟した葉緑体は、直径が0.3から0.6μmの間で、40から60粒が積み重なっています。.花崗岩を構成するチラコイドの数は大きく異なります：十分な日光にさらされる植物の10袋未満から極端な色合いの環境に住む植物の100以上のチラコイドまで.積み重ねられたチラコイドは互いに連結されて葉緑体内に連続区画を形成する。チラコイドの内部は、水が多い自然のかなり広々とした区画です。.チラコイドの膜は、光合成に不可欠です。プロセスの最初の段階がそこで行われるからです。.構造チラコイドは、完全に成熟した葉緑体の中で優勢な構造です。葉緑体が伝統的な光学顕微鏡で可視化されるならば、いくつかの種の粒子が観察されることができる. これらはチラコイドスタックです。それゆえ、これらの構造の最初の観察者はそれらを「グラナ」と呼んだ。.電子顕微鏡の助けを借りて、画像を拡大することができ、これらの粒子の性質は実際に積み重ねられたチラコイドであると結論付けられた。.チラコイド膜の形成および構造は、プロトプラスチジウムとして知られる、まだ分化していない色素体からの葉緑体の形成に依存する。光の存在は葉緑体への変換を刺激し、そして後に積み重なったチラコイドの形成を促進する.チラコイド膜葉緑体およびシアノバクテリアにおいて、チラコイド膜は原形質膜の内側部分と接触していない。しかしながら、チラコイド膜の形成は内膜の陥入から始まる。.シアノバクテリアおよびある種の藻類では、チラコイドは単層のラメラによって形成されている。これとは対照的に、成熟葉緑体にはより複雑な系が見られる.この最後のグループでは、2つの重要な部分を区別することができます：間質のグラナとラメラ。 1つ目は小さい積み重ねられたディスクから成り、2つ目はこれらの積み重ねを互いに接続し、連続的な構造を形成します。チラコイドの内腔.膜の脂質組成膜を構成する脂質は高度に特殊化されており、ほぼ80％のガラクトシルジアシルグリセロール：モノガラクトシルジアシルグリセロールおよびジガラクトシルジアシルグリセロールからなる。これらのガラクトリピドは、チラコイドに典型的な、高度に不飽和の鎖を有する。.同様に、チラコイド膜は、ホスファチジルグリセロールなどの脂質をより低い割合で含有する。言及した脂質は膜の両方の層に均一に分布していない。構造の機能に寄与していると思われるある程度の非対称性があります.膜のタンパク質組成光化学系IとIIはこの膜の主要なタンパク質成分です。それらはチトクロームb複合体と関連していることが判明した。6FとATPシンテターゼ.光化学系IIの大部分の要素は積み重なったグラナ膜に位置しているのに対し、光化学系Iは大部分が非積み重ねのチラコイド膜に位置していることがわかった。つまり、両方のフォトシステムには物理的な分離があります。.これらの複合体には、内在性膜タンパク質、周辺タンパク質、補因子、およびさまざまな色素が含まれます。.チラコイドの内腔チラコイドの内部は水性で濃い物質からなり、その組成は基質のそれとは異なります。それは光リン酸化に関与し、ＡＴＰ合成のためのプロトンモーター力を発生させるプロトンを貯蔵する。このプロセスでは、内腔のpHは4に達することができます.モデル生物の内腔のプロテオーム シロイヌナズナ 80を超えるタンパク質が同定されているが、それらの機能は完全には解明されていない.ルーメンタンパク質は、チラコイドの生合成の調節、ならびに光合成複合体を形成するタンパク質、特に光化学系IIおよびNAD（P）Hデヒドロゲンサの活性および代謝回転に関与している。.機能野菜に不可欠な光合成のプロセスは、チラコイドから始まります。葉緑体間質でそれらを区切る膜は、光合成反応が起こるために必要なすべての酵素機構を持っています.光合成のステージ光合成は2つの主な段階に分けられます：光反応と暗反応.名前が示すように、最初のグループに属する反応は光の存在下でのみ進行することができますが、2番目のグループの反応はそれがあってもなくても起こります。環境が「暗」である必要はないことに注意してください、それは光から独立しているだけです.反応の最初のグループ、「発光性」はチラコイドで起こり、次のように要約することができます。光+クロロフィル+ 12 H2O + 12 NADP+ + 18 ADP + 18 P私は...
